199429. lajstromszámú szabadalom • Új imidazolszármazékokat tartalmazó reagens-készítmény hidrogén-peroxid és peroxidként ható anyagok kimutatására,valamint eljárás az imidazolszármazékok előállítására
HU 199429 B alkilcsoporttal helyettesített aminocsoport; — R3 és R5 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1—6 szénatomos alkilvagy 1—6 szénatomos alkoxicsoport, — R2 jelentése (a’) általános képletű csoport, amelyben — R4 jelentése hidroxil-, amino-, egy vagy két 1—4 szénatomos alkilcsoporttal helyettesített amino-, /omega-karboxi-(l—4 szénatomos alkil)/-amino-, /omega-szulfo-(1—4 szénatomos alkil)/-amino-, /omega-foszfonil- ( 1 —4 szénatomos alkil) /amino- vagy bisz/omega-karboxi-(l—4 szénatomos alkil)/-amino- vagy bisz-/omegaszulfo-(l—4 szénatomos alkil)/-amino-csoport; — R3 és Rj jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1—4 szénatomos alkoxicsoport, azzal a megkötéssel, hogy ha Rj jelentése julolidinil- vagy tetrahidrokinolinil-csoport, akkor az R, és R2 csoportok R4, illetve R4 helyettesítői közül legalább egy hidroxilcsoportot jelent — valamint ezek sói képezik. Az (I) általános képletü indikátorok minden ismert kimutatási rendszerbe bedolgozhatok. . Az R,, R2, Rj, R4 és R5 szubsztituensekben az alkilcsoport 1—6 szénatomos, előnyösen 4 szénatomos alkilcsoportokat jelent. Előnyösek a metil-, etil-, butil- és terc-butil-csoportok. Az R, R3 és R5 szubsztituensekben az alkoxicsoport 1—6, előnyösen 4 szénatomos csoportokat jelent. Előnyös a metoxi- és etoxicsoport. A kénsav-, foszfonsav- és karbonsav-maradékok, amelyek túlnyomórészt alkilcsoportok szubsztituensei, főleg az oldhatóság javítását szolgálják. Az indikátorokkal olyan tesztek készíthetők, amelyek a küvettában mérhetők. Ebből a célból az indikátort peroxidázzal, az illető paraméter kimutatásához szükséges enzim (ekk)el, más reagensekkel, a pufferrendszerrel, adott esetben nedvesítőszerekkel és más segédanyagokkal együtt liofilizáljuk, porként keverjük vagy tablettákká préseljük. Az így kapott reagenskeveréket felhasználás előtt vízben oldjuk, és így készítjük a reagensoldatot. A minta (szubsztrátoldat, enzimoldat, szérum vagy plazma) hozzáadása után a keletkező elszíneződést fotométeren mérjük, és a moláris extinkciós koefficienseken és a hozzáadott reagens, illetve minta térfogatán át számítjuk az illető koncentrációt, illetve enzimaktivitást. így mind kinetikus mind végpontmérések lehetségesek. Az indikátorok peroxidázzal, az illető kimutatási paraméter (ek) biztosításához szük3 4 séges reagens (ekk) el, illetve más enzimekkel, pufferrendszerrel, adott esetben nedvesítőszerekkel és más segédanyagokkal együtt szívóképes reagenshordozókba, például papírokba, filcekbe stb. felszívhatok. Ilyen célra egy vagy több impregnáló oldatot készíthetünk vizes vagy szerves keverékoldószeres oldatok formájában, attól függően, ahogy a reagensek vagy segédanyagok oldódnak. Ezekkel az oldatokkal hordozókat impregnálunk vagy bepermetezünk. Utána megszárítjuk. Az így kapott reagenshordozók gyorsdiagnosztikumokként használhatók különböző anyagok közvetlen meghatározására például testfolyadékokból. Ennek során a testfolyadékot közvetlenül felvisszük a reagenshordozóra vagy belemartjuk abba. A keletkező elszíneződés összehasonlító színskálával való összehasonlítással félkvantitatív meghatározást tesz lehetővé. Remissziós fotometriás. eljárásokkal kvantitative kiértékelés lehetséges. Készíthető azonban az előbb leírtak szerint valamilyen papírba vagy filcbe felszívatott reagensek vízzel vagy pufferral való eluálásával is olyan reagensoldat, amellyel az előbb leírtak alapján szubsztrátok vagy enzimek küvettában és fotométerben meghatározhatók (lásd 2.301.999 sz. német szövetségi köztársaságbeli nyilvánosságrahozatali irat). A találmány szerinti indikátorok alkalmazásának további lehetősége enzimek vagy szubsztrátok remissziós fotométer segítségével való kvantitatív meghatározására szolgáló reagensfilmekben való felhasználásuk. Ekkor az indikátort az egyéb szükséges, reagensekkel és segédanyagokkal együtt, például az 1.598.153 sz. német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírásnak vagy a 2.910.134 sz. német szövetségi köztársaságbeli nyilvánosságahozatali iratnak megfelelő eljárás szerint reagensfilmekké feldolgozzuk. Kiderült továbbá, hogy a találmány szerinti anyagok stabilizátorokkal is sikeresen kombinálhatok, ahogy a 27.16.060 sz. német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírásban leírják. Ezek a stabilizátorok (1-aril-szemikarbazidok) eredményezik azt, hogy a kész tesztek fényhatással szemben érzéketlenek lesznek, és nagyobb mennyiségekkel a remissziós fotometriás mérések függvénygörbéi modulálhatok. A találmány szerinti indikátorok, amint mondtuk, minden szokásos reagenshordozóba, azaz szívóképes hordozóba, így szűrőpapírba, filcekbe stb. vagy duzzadó-, illetve szívóképes reagensfilmbe bedolgozhatok (lásd 15 98 153 sz. német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírás, 29 10 134 sz. és 32 47 608 sz. német szövetségi kőztársaságbeli nyilvánosságrahozatali iratok). Mivel előnyösen szérumban lévő ernzimek és szubsztrátok kimutatására kerülnek felhasználásra, az 1—4. ábrákon keresztmetszetben egy sor olyan eszközt mutatunk be, ame-4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
