199151. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bisz-foszfonsav-származékok előállítására
199151 (3) Antiartritiszes hatás A találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletű vegyületeknek artritiszszel szemben kifejtett kiváló profilaktikus és gyógyító hatását a következő kísérleti mód- 5 szerekkel vizsgálhatjuk, illetve igazolhatjuk. Közelebbről az antiartritiszes hatás vizsgálata céljából olyan, adjuvánssal kiváltott artritiszt mint kísérleti modellt használunk, amely az emberi reumás ízületi gyulladásra a leginkább emlékeztethető. Kétféle kísérletet hajtunk végre. Az egyik kísérletben a vizsgált vegyületek terápiás hatásának azonosítása céljából a kísérleti vegyületeket már adjuvánssal kiváltott artritiázben szenvedő állatoknak adjuk be. Egy másik vizsgálatban a vegyületet profilaktikus hatásának vizsgálata céljából a kísérleti vegyületeket az adjuváns beadása után adjuk be, majd vizsgáljuk az esetleg jelentkező artritisz kifejlődését. A gyógyító, illetve megelőző hatás vizsgálatára szolgáló kísérleteket a következőkben részletesebben ismertetjük. (3)-l kísérlet: Terápiás hatás patkányoknál adjuvánssal kiváltott artritiszen Hím 7 hetes Lewis-patkányok farkába szubkután injekció útján 6 mg/ml dózisban beadunk 0,1 ml olyan szuszpenziót, amely Mycobacterium butyricum vízmentes elpusztult sejtjeinek folyékony paraffinnal készült szuszpenziója. 17 vagy 18 nap elteltével mindkét hátsó mancs vastagságát mérjük. Olyan, 6 egyedből álló patkánycsoportot különítünk el, amelyeknél az artritisz észrevehető módon kifejlődött. A csoport kialakítását követő napon a vizsgálandó vegyületet szub-21 4. kután vagy orálisan beadjuk naponta egyszer 14 napon át. Az utolsó beadást követő napon mindkét hátsó mancs esetében a talpak vastagságát ismét megmérjük. (3)-ll vizsgálat: Megelőző hatás patkányoknál adjuvánssal kiváltott artritisz vonatkozásában Hím 6- vagy 7-hetes Lewis-patkányok bal 10 hátsó mancsába szubkután injektálással 6 mg/ml dózisban 0,05 ml olyan szuszpenziót adunk be, amely Mycobacterium butyricum vízmentes elpusztult sejtjeinek folyékony parafinnal készült szuszpenziója. Az adjuváns 15 injektálása után a kísérleti vegyületet beadjuk a patkányoknak naponta egyszer 21 napon át. Az utolsó beadást kővető napon a patkányok mindkét hátsó lábának vastagságát mérjük. A (3)-I és (3)-II kísérleteknél a találmány 20 szerinti vegyületeket feloldjuk fiziológiás konyhasó oldatban (pH 7,4) nátrium-hidroxidot és sósavat használva a szubkután beadás céljából olyan mennyiségekben, hogy a dózis 2 ml/kg legyen m(g orális beadás cél- 25 jából 7,4 pH-értékű desztillált vízben olyan mennyiségben, hogy a dózis 5 ml/kg legyen. Egyidejűleg összehasonlító hatóanyagként indometacint szuszpendálunk 0,5%-os metil-cellulóz-oldatban olyan mennyiségben, hogy 30 a dózis 5 ml/kg legyen. Mindegyik patkányt megmérünk a kísérleti vegyületek beadásának első napján, illetve utolsó napján, és így a tömegek közötti különbséget kiszámítjuk. Mindegyik csoport esetében a kapott ered- 35 ményeket „átlag± standard hiba" egységekben adjuk meg, és az egyes csoportok között összehasonlítást végzünk 1-utas variációs analízissel. A szignifikancia szint 5%. 22 táblázat (3) —I kíse'rlet Szubkután beadás Dózis (mg/kg) Beadási mód Tömegkülönbség Mancs vastagsága (jobb ás bal mancs átlaga) (x 0,01 mm) normal kontrollse 6 57±3 658±1 (fiziológiás konyhasó oldat) artritiszes se 6 32±1** 1401±32 kontroll Indometacin 1 po 6 67±4 956±32 1. előállítási 0,1 se 6 4°±2** 1258±31 példa szerinti 0,3 se 6 50±2** 1102+36 vegyület 1,0 se 6 56±4** 956±36 3,0 se 6 56+1 974+32 13
