199139. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,4-dihidropiridin-származékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
199139 1 A találmány tárgya eljárás az új (1) általános képletű 1,4-dihidro-piridin-származékok és e vegyületek savaddíciós sóinak előállítására. E vegyületek vérnyomáscsökkentő hatást mutatnak, és mint ilyenek, gyógyászati készítményekben hatóanyagként alkalmazhatók. Az (I) általános képletben Ar jelentése egy nitrocsoporttal szubsztituált fenilcsoport, R! és R2 jelentése egymástól függetlenül 1—4 szénatomos alkilcsoport, A jelentése imidazol-1 -il-( 1—4 szénatomos alkil)-csoport, B jelentése 1—3 fluoratommal helyettesített 1—4 szénatomos alkilcsoport. Az 1—4 szénatomos alkilcsoportra példaként említjük meg a metil-, etil-, n-propi!-, izopropil- és n-butil-csoportokat. Az R1 és R2 szubsztituens jelentésére példaként említjük meg a metil-, etil-, n-propil-, izopropil-, butilcsoportot. R1 és/vagy R2 célszerű jelentése metilvagy etil-csoport. B jelentésére példaként említjük meg a mono-, di- vagy trifluor-metil-csoportot. B jelentése célszerűen -CH2F csopo t. Ar jelentésére megemlítjük a 2- vagy 3- -nitro-fenil-csoportot. A találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletű vegyületek kedvező gyógyászati hatással, így a magas vérnyomást csökkentő hatással rendelkeznek, ezért a melegvérű állatoknál a magas vérnyomás kezelésére alkalmasak. Ezen kívül a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek gátolják a kálciumnak a sejtbe való beáramlását, így értágító hatással is rendelkeznek, ezért különféle szív-betegségek — mint szív-görcs, angina pectoris, szív-hypertophia és koronáriás érgörcs — kezelésére alkalmasak. Az (1) általános képletű vegyületek ezen kívül megakadályozzák a vérlemezek aggregációját és inhibitálják a thromboxan synthetas működését. Ez utóbbi tevékenység kombinálva a vérnyomás csökkentő hatással, a vegyületeket igen hasznossá teszi a caroliovasculáris rendellenességek, elsősorban a thrombosis kezelésében. A vérnyomás-csökkentő hatást az alábbi vizsgálatokkal ellenőriztük. Spontán magas vérnyomást mutató hím vagy nőstény patkányok vérnyomását mértük 37°C hőmérsékletű térben, az állatok farok vénájában. Azokat az állatokat, amelyek systoles vérnyomása 155 Hgmm alatt volt, nem vontuk be a vizsgálatokba. Az állat-csoportoknak orálisan adtuk be a vizsgálandó vegyületeket megfelelő vivőanyaggal formulázva, illetőleg a vivőanyagot önmagában. A systoles nyomást a beadás előtt, illetőleg meghatározott idő eltelte után mértük. A szívverés gyorsaságát a farokvégi artériás pulzus alapján regisztráltuk. Az eredményeket statisztikai módszerekkel értékeltük (csoporton belül). 2 2 A kálcium-antagonista hatást in vitro vizsgáltuk izolált májkapu-éren, növekvő kálcium-ion koncentráció mellett. A vérlemezek aggregációjának gátlását ismert módon ellenőriztük [Fantl: Australian J. Exp. Bioi. Med. Sei. 45 355—362 (1967)]. Minthogy a vérlemez aggregáció az első lépés a thrombus képződésénél, úgy véljük, hogy az aggregációt csökkentő vagy a vérlemez tapadását csökkentő vegyületek inhibitálják az atherosclerosisos folyamatot. A lemezek tapadására kifejtett hatást lemezekben gazdag plazmán ellenőrizzük; a vizsgált plazma kis mennyiségű arachidonsavat tartalmaz, amely in vitro lényegesen növeli az aggregációt és fiziológiásán is ilyen értelemben hat in vivo körülmények között. A vizsgálatokat ismert módon végezzük. 2,5—3 kg tömegű Üj-Zélandi patkányokat injekció beadásával érzéstelenítünk a marginális fül-éren keresztül nátrium-pentobarbitonnal (30—40 mg/kg dózisban). A nyaki verőérben kanült vezetünk be és 100—150 ml vért veszünk le 50 ml-es fecskendővel, amelyben 3,8% nátrium-citrát van (a vér és cifrát aránya =9:1). A vért 10 percig 1500 fordulat/perc sebességgel centrifugáljuk 5°C hőmérsékleten, majd a vérlemezben gazdag plazmát (PRP) elkülönítjük. A vérlemezeket ezután szobahőmérsékleten tartjuk csavaros tetővel ellátott műanyag centrifuga- edényekben. A vizsgálathoz vérlemez aggregométert használunk (HU aggregométer Browne A. Ltd. Leicester, Nagy-Britannia) 1,0 ml alikvot részt veszünk ki a vérlemezben gazdag plazmából, ezeket az adagokat 5—10 percig felmelegítjük, majd 1100 fordulat/perc sebességgel keverjük. 250 pM arachidonsav hozzáadásával (8 pl térfogatban) a mintákat elindítjuk az aggregációt. Az aggregométeren ellenőrizzük az arachidonsav által előidézett hatást; a készüléket maximális érzékenységre állítva használjuk. 250 pM arachidonsav hozzáadásával kontroll vizsgálatokat végzünk. Az arachidonsav adagolását megelőző 5 percben beadagoljuk a vérlemezben gazdag plazmát és a vizsgálati vegyületeket. Az arachidonsav adagolás után ellenőrizzük minden esetben a készülék maximális kitérését, ezt feljegyezzük. A vizsgálati vegyületeket 10~4M koncentrációban (végkoncentráció) vizsgáljuk; 10 pl 1X10-2 mól-os, desztillált vízzel készült törzsoldatot alkalmazva. összehasonlító anyagként Dazoxiben-t használunk [Randall, M. J. és társai, Research 23 145—162 (1981)]. E vegyület thromboxan synthetaz inhibitor hatást fejt ki. A thromboxan synthetase inhibitor hatással rendelkező vegyületek eredményesen alkalmazhatók cardiovasculáris megbetegedései, így thrombosis, érelmesszesedés, agyi ischemias bántalmak, angina pectoris, perifériás érrendszeri bántalmak és migrén kezelésére. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
