198952. lajstromszámú szabadalom • Eljárás emlős agyalapi mirígy eredetű növekedési hormon kibocsátást elősegítő faktor (PGRF) előállítására
1 HU 198952 B 2 ínékeket vékonyréteg kromatográfiásan Rf értékekkel azonosítottuk. A vékonyrétegkromatográfiát 0,25 mm vastag, fluoreszcens indikátort nem tartalmazó szilikagél 60-nal (E. Merck, Darmstadt, NSZK) bevont üveglemezeken végeztük, a kifejlesztéshez használt oldószerelegy összetétele: 1-butanol, piridin, ecetsav, víz 6:6:1,2:4,8 térfogatarányban. A kimutatást ninhidrin-reagenssel végeztük (2 g ninhidrin 50 ml ecelsav és 950 ml 1-bulanol elegyében). Táblázat Példa Vegyület Rf érték Kitermelés mg/g gyanta 1. PGRF(1 —44) szabad sav 0,464 80 2. PGRF (1 — 40) szabad sav 0,414 37 2/a. PGRF (1-34) szabad sav 0,500 121 2/b. PGRF (1-31) szabad sav 0,536 143 2/c. PGRF (1-28) szabad sav 0,550 17 3. PGRF (1-44) amid 0,464 67 4. PGRF analóg 0,421 39 5. PGRF (1-40) amid 0,464 60 6. PGRF (1-37) szabad sav 0,421 29 6/a. PGRF (1-37) amid 0,507 25 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás N-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gly-Gln-R34-Asn-Gln-Glu-R38-Gly-R40-Arg-Ala-Arg-Leu (I) általános képletű peptidek előállítására. Az (I) általános képletben R34 jelentése Ser vagy Alá, R38 jelentése Arg vagy Ser, R40 jelentése Alá vagy Arg, valamint a fenti peptidek 1 — 28. aminosavszekvenciájától az 1 — 43. aminosav-szekvenciáig terjedő fragmenseinek és e vegyületek C-terminális amidjainak előállítására, azzal jellemezve, hogy X‘-Tyr (X2)-Ala-Asp(X3)-Ala-Ile-Phe-Thr - (X4)-Asn-Ser(X5)-Tyr(X2)-Arg(X6)-Lys(X7)-Vaí-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser(X5)-Ala-Arg(X6)-Lys(X7)-Leu-Leu-GIn-Asp(X3)-R34(X3)-Asn-Gln-Glu(X3)-R3«(X5 vagy X6)-Gly-R40(X6)-Arg(X6)-Leu-X“ (II) általános képletű védett peptidről vagy a fenti védett pepiid 1 — 28. aminosav-szekvenciójától az 1 — 43. aminosav-szekvenciáig terjedő fragmenséről - ahol (X1), (X2), (X3), (X4), (X*), (X6), (X7) hidrogénatom vagy a peptidkémiában önmagában ismert védőcsoport és (Xs) a védett peptid mindenkori C-terminális végén levő hidroxil- vagy aminocsoport vagy a peptidkémiában önmagában ismert védőcsoport, és R34, R3g és R40 jelentése a fenti — lehasítjuk a védőcsoportokat. (Elsőbbsége: 1982. 09. 15.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás az (I) általános képletű peptidek 1 — 28. aminosav-szekvenciájától az 1 — 40. aminosav-szekvenciáig terjedő fragmenseinek és ezek C-terminális amidjainak előállítására, ahol R34, R38 és R4q jelentése az 1. igénypontban megadott, azzal jellemezve, hogy egy (II) álalános képletű védett peptid 1 — 28. aminosav-szekvenciájától az 1 — 40. aminosavszekvenciáig terjedő fragmenséről — ahol (X1), (X2), (X3), (X4), (X5), (X6), (X7), (X8), R34, R38 és R4o az 1. igénypontban megadott - a védőcsoportokat lehasítjuk. (Elsőbbsége: 1982. 06. 16.) 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a (II) általános képletű — ahol R34 jelentése Ser, R30 jelentése Arg és R40 jelentése Ala, R, X1, X2, X3, X4, Xs, X6, X7 és X8 jelentése a 2. igénypont szerinti —, 1 — 40. aminosavszekvenciájú védett peptidről lehasítjuk a védőcsoportokat. (Elsőbbsége: 1982. 06. 16.) 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a (II) általános képletű védett pepiidről - ahol R34, R38, R4o, X1), X2, X3, X4, X5, X6, X7 és X8 jelentése a 1. igénypont szerinti —, hasítjuk le a védőcsoportokat. (Elsőbbsége: 1982.09.15.) 5. Az 1. vagy 4. igénypont szerinti eljárás az (I) általános képletű peptidek — ahol R34, R38 és R4o jelentése az 1. igénypont szerinti — valamint a fenti peptidek 1 — 28. aminosav-szekvenciájától az 1 - 43. aminosav-szekvenciáig terjedő fragmensei C-terminális amidjainak előállítására. azzal jellemezve, hogy olyan (II) R34, R38, R40, X1, X2, X3, X4, X5, X^, X7 jelentése a 1. igénypont szerinti és X8 jelentése aminocsoport, vagy a fenti védett peptid valamely 1 — 28. aminosavszekvenciájától az 1 — 43. aminosav-szekvenciáig terjedő fragmenséről a védőcsoportokat lehasítjuk. (Elsőbbsége: 1982. 09.15.) 6. Az 1. vagy 4. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános képletű vegyületek, ahol R34, R38, R4o, X1, X2, X3, X4, Xs, X6, X7 jelentése a 1. igénypont szerinti és X8 jelentése hidroxilcsoport, vagy a fenti védett peptid valamely 1 — 28. aminosav-szekvenciájától az 1 — 43. aminosavszekvenciáig terjedő fragmensei előállítására, azzal jellemezve, hogy olyan (II) általános képletű vegyületekről, ahol R34, R38, R40, X1, X2, X3, X , Xs, X6, X7 jelentése a 1. igénypont szerinti és X8 jelentése hidroxilcsoport, vagy a fenti védett peptid valamely 1-28. aminosav-szekvenciájától az 1 — 43. aminosav-szekvenciáig terjedő fragmenséről a védőcsoportokat lehasítjuk. (Elsőbbsége: 1982.09.15.) 7. A 2. vagy 3. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános képletű vegyületek, ahol R34, R38 és R40 jelentése a 2. igénypont szerinti, 1 — 28. ami-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
