198949. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5-szubsztituált 3'-azido-2',3'-didezoxi-ribonukleozidok előállítására
1 HU 198949 B 2 50 ml 80%-os ecetsavat mérünk be, és az elegyet 4 napig szobabOmérsékleten állni hagyjuk. A kivált trifenil-karbinoll üvegszűrőn kiszűrjük, kevés 80%-os ccetsawal átmossuk, majd az ecetsavas oldatokat egyesítjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz kétszer 10 ml vizet adunk, és a bepárlást megismételjük. Az így kapott kristályos terméket 20 ml etii-acetáttal elkeverjük és üvegszűrőn szűrjük. A termék átkristályosítás nélkül felhasználható. 2,0 g (86%) 2,3’-anhidro-2’-de?oxi-uridint kapunk; op.: 212- -214 °C. c) lépés: 3’-Azido-2’,3’-didezoxi-urídin előállítása 25 ml űrtartalmú gömblombikba 0,63 g (3 mmól) 2,3’-anhidro-2'-dezoxi-uridint, 0,78 g (12 mmól) nátrium-azidot és 5 ml dimetil-formamidot mérünk be, és az elegyet a kiindulási anyag teljes elreagálásáig visszafolyatás közben forraljuk. A reakció menetét vékonyrétegkromatográfiásan követjük; adszorbensként Merck Kieselgel HF254 lapot, eluálószerként 8:2 térfogatarányú etil-acetát.metanol elegyet használunk. Körülbelül 3 órás forralás után, amikor az elegyben kiindulási anyag már nem mutatható ki, az elegyet szobahőmérsékletre hűtjük, a nátrium-azíd maradékáról dekantáljuk, és a dimetil-formamidot csökkentett nyomáson lepároljuk. A maradékhoz kétszer 10 ml vizet adunk, és a bepárlást megismételjük. Végül a maradékot 10 ml vízben oldjuk, és folyamatos extraháló edényből körülbelül 150 ml etii-acetátlal 48 órán át extraháljuk. Az etil-acetátos oldatot magnézium-szulfát fölött szárítjuk, szűrjük, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 10 ml etil-acetáttal elkeverjük, és éjszakán át hűtőszekrényben tartjuk. A kivált kristályokat kiszűrjük. 0,34 g (44%) 3’-azido-2’,3’-didezoxi-uridint kapunk; op,: 168- -169 °C. NMR spektrum vonalai (CDCI3 + DMSO-d6): 2,38 (2H, dd, J=6,3 és 5,9Hz), 3,6-4,0 (3H, m), 4,36 (1H, td, J = 4,4Hz), 4,83 (1H, széles t), 5,64 (1H, d, J =8,2Hz), 6,17 (1H, t), 7,89 (1H, d), 10,76 (1H, széles s) ppm. 2. példa 3’-Azido-2,,3’-didezoxi-timidin (/VI/ általános képletű vegyület, R = metil) előállítása a) lépés: 5’-Tritil-2,3’-anhidro-timidin (/IV) általános képletű vegyület, R = metil) előállítása 500 ml űrtartalmú gömblombikba 20 g (82,5 mmól), előzetesen 2 órán át csökkentett nyomáson 120 0C-on szárított timidint, 25 g (89,92 mmól) tritil-kloridot, 20 ml trietil-amint és 200 ml dioxánt mérünk be, és az elegyet forráspontig melegítjük. 5-10 perces forralás után éles, tiszta oldat képződik, majd rövid idő elteltével megindul a kristályos trietil-amin-hidroklorid kiválása. A reakció menetét vékonyrétegkromatográfiás úton követjük, adszorbensként Merck Kieselgel HF2S4 lapot, eluálószerként 95:5 térfogatarányú eii!-acctát:metanol elegyet használunk. Másfél órás forralás után, amikor az elegyben kiindulási anyag már nem mutatható ki, a kivált kristályokat üvegszűrőn kiszűrjük és 20 ml dioxánnai átmossuk. A dioxános oldatokat egyesítjük, jeges vízben 10 °C alatti hőmérsékletre hűtjük, és 16 ml trietil-amint adunk hozzá. Ezután az elegybe körülbelül 30 perc alatt 10 ml (128,0 mmól) mezil-kloridot csepegtetünk. A reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a kivált trietíl-amin-hidrokloridot üvegszűrőn kiszűrjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 20 ml etanollal elkeverjük, és a bepárlást megismételjük. Az így kapott sziruphoz 100 ml etanolt és 100 ml 1 mólos vizes nátriumhidroxid oldatot adunk, és az elegyet 2 órán át visszafolyatás közben forraljuk. Ezután az etanolt csökkentett nyomáson lepároljuk, és a szirupszerű maradékot háromszor 10 ml forró vízzel átmossuk. A maradékhoz 100 ml etanolt adunk, az elegyet 10-20 percig forraljuk, majd lehűtjük, és éjszakán át hűtőszekrényben tartjuk. A kivált kristályokat üvegszűrőn leszűrjük és szárítjuk. 32 g 5’-tritil-2,3’-anhidro-timidint kapunk; hozam: 80%. b) lépés: 2,3’-Anhidro-timidin (/V/ általános képletű vegyület, R = metil) előállítása 500 ml űrtartalmú gömblombikba 34,0 g 5’-tritil-2,3’-anhidro-timidint és 300 ml 80%-os ecetsavat mérünk be, és az oldatot 4 napig szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A kivált trifenilkarbinolt üvegszűrőn kiszűrjük és kevés 80%-os ecetsawal átmossuk. Az ecetsavas oldatokat egyesítjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz kétszer 20 ml vizet adunk, és a bepárlást megismételjük. Ezután a maradékot 50 ml kloroformmal elkeverjük és üvegszűrőn szűrjük. 15,0 g (92%) 2,3’-anhidro-timidint kapunk; op.: 242 — 243 °C. c) lépés: 3’-Azido-2’,3’-didezoxi-timidin előállítása 50 ml Űrtartalmú gömblombikba 2,2 g (10 mmól) 2,3’-anhidro-timidint, 2,8 g (40 mmól) nátrium-azidot és 25 ml dimetil-formamidot mérünk be, és az elegyet a kiindulási anyag eltűnéséig visszafolyatás közben forraljuk. A reakció menetét vékonyrétegkromatográfiásan követjük; adszorbensként Merck Kieselgel HF254 lapot, eluálószerként 95:5 térfogatarányű etil-acetát: :metanol elegyet használunk. 2 — 3 órás forralás után, amikor kiindulási anyag az elegyben már nem mutatható ki, a sötétbarna folyadékot leöntjük a nátrium-azid maradékáról, és a dimetilformamidot csökkentett nyomáson lepároljuk. A maradékhoz kétszer 10 ml vizet adunk, és a bepárlást megismételjük. A kapott szilárd maradékot 10 ml vízben oldjuk, és folyamatos extraháló edényből körülbelül 250 ml etil-acetáttal 48 órán át extraháljuk. Az etil-acetátos oldatot magnézium-szulfát fölött szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz 10 ml vizet adunk, és az elegyet éjszakán át hűtőszekrényben tároljuk. 1,5 g (55,63%) kristályos, fehér 3’-azido-2’,3’-didezoxi-limidint kapunk; op.: 121 — 122 eC. NMR spektrum vonalai (CDCI3 + DMSO-d*): 1,89 (3H, d, J-1,3Hz), 2,38 (2H, dd, J -6,4 és 6,0Hz), 3,6-4,0 (3H, m), 4,37 (1H, td, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
