198934. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-amino-purin származékok előállítására

1

HU 198934 B

2

11. példa

2-Amino-9-[4-(benzoü-oxi)-3-(hidroxi-metil)-but-l-illpurin előállítása

0,70 g (0,9 mmól) 9-(3-(hidroxi-metil)-4-(mo- 5 nometoxi-tritil-oxi)-but-l-il]-2-(monometoxi-tritil-amino)-purin és 10 mg 4-(dimetil-amino)-piridin 5 ml N,N-dimetil-formamiddal készült oldatához 0,61 g (2,7 mmól) benzoesavanhidridet adunk, és az oldatot 1 órán keresztül kever- jq jük. Az oldathoz 1 ml metanolt adunk, és az oldószert eltávolítjuk. A maradékot 9 ml 80%-os ecetsavban felvesszük, és az oldatot 80 °C-on 20 percen keresztül keverjük. Az oldathoz 3 ml vizet adunk, és kétszer 10 ml hexánnal extraháljuk. , A vizes fázist megtartjuk és az oldószert eltávo- 1 Htjuk. A maradékot vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldat és kloroform között megosztjuk és a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, majd az oldószert eltávolítjuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás el- 20

járással tisztítjuk, az eluálást kloroform és metanol 14:1 térfogatarányú elegyével végezzük.

Metanollal eldörzsölve 235 mg (76%) cím szerinti vegyületet kapunk fehér, kristályos for- ,

mában, olvadáspontja 116 — 118 °C.

UV-spektrum Amax (metanol): 223 (36700),

309 (6680) nm;

IR-spektrum j/max (KBr): 3320, 1710, 1610,

1580 cm'1. 30

1H-NMR-spektrum [(CD3)2SO] 8: 1,83 (1H, m, 3’-H), 1,93 (2H, q, J = 7,1Hz, 2’-H), 3,52 (2H, t, J = 5,3Hz, D20 cserével d, CH2OH), 4,19 (2H, t, J = 7,0Hz, l’-H), 4,2-4,3 (2H, ABX,

JAB = 11,0Hz, JAX = 5,6Hz, CH2OOC), 6,43 35

(2H, s, D20 kicserélhető, 2-NH2), 7,5-7,9 (5I-I,

m, C6H5), 8,10 (1H, s, 8-H), 8,55 (1H, s, 6-H);

Elemanalízis eredmények a Ci^H^NsOj összegképlet alapján:

számított: C: 59,81, H: 5,61, N: 20,52%,

talált: C: 59,20, H: 5,63, N: 20,82%.

A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek biológiai tulajdonságait az alábbiakban ismertetjük:

2-Amino-9- [4- hidroxi-3-(hidroxi-metil)-but-1- -ill-purin és 2-amino-9-[4-acetoxi-3-(acetoxi-inetil)-but-l-ill-purin orális felszívódása, és 9- -f4-hidroxi-3-(hidroxi-metil)-but-l-ill-gsaninná alakulása egérben

20 g-os, nőstény, 18 órán keresztül éheztetett Balb/C egereknek orálisan 0,2 mmól/kg dózisban, 0,1 ml dózistérfogatban, 1%-os karboxi-metil-cellulózban adjuk a 2-amino-9-[4-hidroxi-3-(hidroxi-metil)-but-l-il]purint, 2-amino-9-[4- -acetoxi-3-(acetoxi-metil)-but-l-il]purint és a 9- (4 - hidroxi-3- ( hidroxi- me til)-but-1- il]-guanint.

15, 60 és 180 perc múlva minden időpontban 3 egértől vért veszünk a szívből, heparinozott fecskendő segítségével. Az azonos időpontokban vett vérmintákból azonos alikvotokhoz azonos térfogatú 16%-os triklór-ecetsavat adunk. A kicsapódott proteineket 8500 g-vel centrifugálva eltávolítjuk, a felülúszó 0,5 ml-ét azonnal 0,1 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldathoz adjuk, és a kapott elegyet vagy nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, vagy •20 °C-on tároljuk az analízis elvégzéséig.

Az eredményeket az 1. táblázatban ismertetjük.

1. táblázat

Kísérlet Vizsgált vegyület

száma

1. 9-[4-hidroxi-3-(hidroxi-metil)-but-l-il]guanin 2-amino-9- [4- hidroxi- 3- (hidroxi-metil)-but-il-l]-purin

t

2. 9-[4-hidroxi-3-(hidroxi-metil)-bul-l-il]-guanin 2-amino-9-[4-hidroxi-3- hidroxi-metil)-but-l-il]-purin 2-amino-9-[4-acetoxi-3- -(acetoxi-metil)-but-l-ilj-purin

3. 9-[4-hidroxi-3-(hidroxi-metil)-but-l-il]-guanin 2-í amino-9- [4- hidroxi-3-- (hidroxi-metil)-but-l-il]-purin

9-[4-acetoxi-3-(hidroxi-metil)-but-l-il]-puria

2-amino-9'[3-(hidroxi-metil)'-4-(metoxi-karbonil-oxi)-but--1-ilJ-purin

9-[4-hidroxi-3-(hidroxi-metil)-but-l-il]-guanin koncentrációja a vérben a beadás után (/jg/ml) 15 perccel 1 órával 3 órával

0,7

0,4

0,1

3,0

2,2

0,3

1,3

1,0

0,4

4,6

2,8

0,6

18,7

4,3

0,3

1,4

1,1

0,5

4,8

4,6

1,2

12,9

5,1

0,3

13,7

5,6

0,7

7