198741. lajstromszámú szabadalom • Eljárás citorodin S származékok, valamint ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
7 HU 198741 B 8 docsoportot tartalmazó immunoglobulin származékot kapjuk. (III) általános képletű maleimid-származékként előnyösen N-if-maleimido-butiril-oxi-szukcinimidet, stb. használunk. A (III) általános képletű maleiinidszármazék amidkötést képez az immunoglobulin aminocsoportjaival nukleofil szubsztitúciós reakcióban, így (V) általános képletű, maleimidocsoportot tartalmazó immunoglobulin képződik, és melléktermékként N-hidroxi-szukcinimid. A (III) általános képletű maleimidszármazék mennyiségétől függően a maleimidcsoportot immunoglobulin molekulánként 1-20, előnyösen 5-20 arányban visszük be. A bevezetés azonban nem eredményezi az immunoglobulin antitest-aktivitásának elvesztését. A találmány szerinti immunoglobulin komplexet úgy állítjuk elő, hogy a maleimidocsoportokat tartalmazó, (V) általános képletű immunoglobulin-származékot a tiolcsoportot tartalmazó citorodin S származékkal reagáltatjuk. A reakciót úgy hajtjuk végre, hogy a tiolcsoportokat tartalmazó citorodin S származék vízzel elegyedő szerves oldószerrel (például metanollal, etanollal, dimetil-formamiddal, stb.) készült oldatát 7,5 pH értéknél a maleimidocsoportokat tartalmazó immunoglobulin 7,5 pH-jú pufferrel (ugyanazzal, mint amelyet az immunoglobulin oldására használunk) készült oldatéval keverjük. A citorodin S származék, amelyben X jelentése -NH-R3-COOH, alkalmas kondenzálószer jelenlétében proteinek vagy más vegyületek aminocsoportjaival peptidkötésre képes. A peptidkötés a karboxilcsoport aktív észtere és a protein vagy más vegyület aminocsoportja között, kondenzélószer alkalmazása mellett nukleofil reakcióban alakul ki. Ennek megfelelően komplexet úgy képezhetünk, hogy peptidkötést alakítunk ki a citorodin S származék bevezetett karboxilcsoportja és az immunoglobulinban eredetileg jelenlevő (oldallénc például lizinmaradék) aminocsoport között. A citorodin S származékokat, amelyekben X jelentése -NH-R^COOH, aktív észterré alakítjuk egy kondenzélószerrel, igy komplex képzéséhez alkalmazzuk. E célból az olyan citorodin S származékot, ahol X jelentése az (I) általános képletben -NH-R^COOH, karbodiimiddel reagéltatjuk. Karbodiimidként előnyösen diciklohexil-karbodiimidet, l,3-dimetil-amino-propil-3- -etil-karbodiimid-hidrokloridot, dietil-karbodiimidet, difenil-karbodiimidet, dibenzilkarbodiimidet, ciánamidot, stb. használunk. A reakciót úgy végezzük, hogy a citorodin S származékot karbodiimiddel reagéltatjuk egy vízzel elegyedő szerves oldószerben (például metanolban, etanolban, dimetil-formamidban, stb.) vagy egy 7,5 pH-jú pufferben (ugyanabban, mint amelyet az immunoglobulin oldására használunk), szobahőmérsékleten egy óra hosszat, majd a reakcióelegyet az immunoglobulin 7,5 pH-jú vizes oldatához adjuk. A citorodin S származék mennyiségétől függően a citorodin S származékot immunoglobulin molekulánként 1-20, előnyösen 5-20 arányban kapcsoljuk. A kapcsolás azonban nem eredményezi a globulin antitest-aktivitásának elvesztését. A citorodin S és az immunoglobulin kötési aránya a komplexben 1-15:1, azaz 1-15 molekula citorodin S kapcsolódik 1 molekula immunoglobulinhoz. Az ilyen magas arányban alkalmazott rákellenes komponens eredményezi a nagy rákellenes aktivitás előállítását. A találmány szerinti citorodin S származék klinikai dózisa az alkalmazás módjától függ, általában felnőtt esetén napi 1-20 mg citorodin S. A találmány szerinti gyógyszerkészítmények intravénásán, intraperitoneélisan vagy rektélisan alkalmazhatók. Intravénás alkalmazás esetén a szokásos intravénás injekciók mellett az intravénás cseppek is alkalmazhatók. Az (I) általános képletű citorodin S származékokat tartalmazó gyógyszerkészítmények a szokásos módon, szokásos hordozó- és adalékanyagok alkalmazásával készíthetők. Az injektálható készítmény lehet például injekciós célra szánt por alakú készítmény. Ezt úgy készíthetjük, hogy egy vagy több alkalmas segédanyagot, például mannitot, szacharózt, laktózt, maltózt, glükózt, vagy fruktózt adunk az (I) általános képletű citorodin S származékhoz, az elegyet feloldjuk vízben, és az oldatot flakonokba vagy ampullákba töltjük, majd liofilizáljuk, és lezárjuk. A rektális készítményt liofilizált alapból, például szemiszintetikus alapból készíthetjük, amelyet úgy állítunk elő, hogy kakaóvajat vagy zsirsav-triglicerideket zsírsav-monogliceriddel vagy zsírsav-digliceriddel keverünk különböző arányban, vagy készíthetjük hidrofil alapból, például polietilén-glikolból vagy glicerozselatinból úgy, hogy az elegyet felmelegítve megolvasztjuk, homogén keveréket képezünk, és olvadt formájú készítményt állítunk elő. A találmány szerinti eljárást a következő példákkal szemléltetjük a korlátozás szándéka nélkül. 1. példa 2 ml metanolban feloldottunk 10 mg citorodin S-t. Az oldathoz hozzáadtuk 5,8 mg ammóniuin-acetát 10 mg/ml-es metanolos oldatát, amely megfelel a citorodin S 10 mólegyenértékének, továbbá 1,4 mg nátrium-ciano-bór-hidrid 10 mg/ml-es metanolos oldatát, amely megfelel 3 rnólegyenértéknek. Az elegyet 25 °C-on 4 óra hosszat reagáltattuk. A 5 10 15 2:0 25 30 35 40 45 50 55 f>0 65 6
