198708. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4,5,6-szubsztituált-N-(szubsztituált-fenil)-2-pirimidin-amin származékok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198708 B 2 Vegyület neve Ic50 (*M) 4-(2-Furanil)-N-[3-(lH--imidazol-l-il)-fenil]--2-pirimidin-amin 0,8 N-(3-/2-(Dietil-amino-etoxi/-fenil]-4-(2--furanil)-2-pirimidin-amin 1,3 N-[4-(lH-Imidazol-l--il)-3-(trifluor-metil)-fenil)-4-(2-piridinil)-2-pírímídín-amin 1,6 N-[3-/2-(Dietil-amino)--etoxi/-fenil]-4-(2--tienil)-2-pirimidin-amin 0,6 N-[3-/2-(Dietil-amino)-etoxi/-fenil]-4-(4--piridinil)-2-pirimidin-amin 0,7 N-[4-(4-Piridinil)-2--pirimidinil]-l,4--benzol-diamin 2,4 N-[3-(lH-Imidazol-l-il)-fenil]-4-(4-piridinil)--2-pirimidin-amin 0,4 N-[3-(lH-Imidazol-l-il)-fenil]-4-(2-tienil)-2-pirimidin-amin 0,2 A találmány szerinti eljárással előállított vegyülelek lipoxigenáz-gátló hatását is vizsgáltuk a leukotrién B4 (LTB4) és az 5-hidroxi-ikozántetránsav (5-HETE) felszabadulásának és bioszintézisének gátlásában kifejezve. A vizsgálatnál 3xl07 mennyiségű tengeri malacból származó peritoneális neutrophilist 37 °C- on inkubálunk Duibeccos pufferban, amely 50 mmól trisz-puffert tartalmaz (pH = 7,1). 5 perccel a 100 /imól arahidronsav és 20 ^mól kalcium-jonofor (A 23187) adagolása előtt kontroll anyagot (hordozót) vagy vizsgálandó vegyiiletet adagolunk a neutrophilishez 10 ^g/ml koncentrációban. Három perccel az arachidronsav és akalcium-jodofor adagolása után a teljes lipid mennyiséget kloroformmal extraháljuk, miután a pH értékét citromsavval 3-ra beállítottuk a kloroformmal azonos mennyiségű etanol adagolása mellett. Az 5-HETE-t és LTB4-et HPLC-vel választjuk el (5 jimól, 4x25 cm-es oktadecil szilikagél oszlop, IBM Instruments gyártm. 70 - 80%-os vizes metanol, pH * 3,0 ecetsavval beállítva). A mobil fázist 1,0 ml/perc sebességgel szívatjuk és az LTB4 és 5-HETE kimutatását 270, ill. 236 nm-en mutatott adszorpcióval végezzük. Az LTB4 és 5-HETE mennyiségét a kontrolihoz viszonyított százalékban fejezzük ki. Minél alacsonyabb a százalékos érték, annál aktívabb a vegyület. A kapott eredményeket a következő 2. táblázatban foglaltuk össze: 2. Táblázat Neutrofil lipoigenáz gátlása immunogén úton stimulált tengenmalac neutrofilek esetén Vegyület neve Gátlás % LTB4 5-HETE 4-(3-Piridinil)-N-[3-trifluor-metil)-fenilj-2-pirimidin-amin 58,1 N-(4-Acetil-fenil)-4-(3-piridinil)-2--pirimidin-amin 37,0 N-(4-Fluor-fenil)-4-(2-piridinil)-2--pirimidin-amin 45,0 N-(4-Metil-fenil)-4-(4-piridinil)-2--pirimidin-amin 4,50 N-(4-Fluor-fenil)-4-(4-piridinil)-2- ■ pirimidin-amin 53,0 4-(3-Piridinil)-N[3-(trifluor-metil)fenil]-2-pirimidinil•amin 58,0 N-Fenil-4-(4-piridinil)-2-pirimidinamin 58,0 N-(3-Metil-fenil)-4- -(3-piridinil)-2- - pirimidin-amin 40,0 N-[4-(Etil-fenil)-4-(4-piridinil)-2--pirimidin-amin 33,9 41,0 N-(4-Etil-fenil)-4--(2-piridinil)-2-•pirimidin-amin 29,5 41,0 4-(2-Furanil)-N-(3--metil-fenil)-2--pirimidin-amin 7,4 3,0 N-|4-(4-Metil-l-piperazinil)-fenil]-4-(2-tienil)-2-pirimidin-amin 48,0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 i5 60 65 12
