198593. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a spárga (Asparagus Officinalis) szövettényésztéses szaporítására
3 4 HU 198593 B 1. példa Az 1. táblázatban bemutatott táptalajon fejlődött hajtásokat feldaraboljuk úgy, hogy az alapjukkal összenőtt hajtáscsomókat nyerjünk, amelyeknek többé-kevésbé elkalluszosodott az alapja. Ezeket a hajtéscsoinókat a 3. táblázatban bemutatott szilárd, agaros táptalajba dugványozzuk, és kb. 3-5 hétig 16 órás megvilágítás mellett, 3000 lux fényerő- 10 nél, 22 °C hőmérsékleten neveljük. Ez alatt az idő alatt az alapon a kallusz növekedik, 30-50%-ban gyökeresedés is előfordul, a hajtások növekednek és új hajtások is fejlődnek a csomókban. Ekkor a tenyészeteket ki- 15 szedjük és aszeptikus körülmények között a keletkezett hajtásokat levágjuk, a 2. táblázatban bemutatott folyékony táptalaj felületére fektetjük, kb. 20 hajtást rakva egy tenyészedénybe. A visszavágott alapokat töosz- 20 tás nélkül ismét a 3. táblázatban bemutatott agaros táptalajba dugványozzuk, ahol a fent leirt körülmények között ismét 3-5 hétig neveljük, majd a fent leírt visszavágást és friss táptalajba dugványozást még kétszer 25 megismételjük, de az alapokat tőosztással előbb kisebb egyedekre szedtük szét. A 4, dugványozás végén már valamennyi növénycsomó gyökérrel rendelkezett. A gyökeres csomókat, üvegházban talajba ültettük és 2 hónapig neveltük, ebből 2 hétig magas páratartalom mellett, fóliasátorban. Az edzett növényeket ezután tósosztással gyökeres növényegyedekre szedtük szét és konténerbe ültettük. Az eljárással egy edény spárgatenyészetből egy év alatt 10.000 gyökeres növény nevelhető, és előállítható annyi szaporítóanyag, amely a következő évben 1 millió gyökeres növény létrehozásához elegendő. 2, példa Az 1. példában leirt módon szaporítjuk 45 és gyökereztetjük a tenyészeteket, miközben a levágott hajtásokat az 1. táblázatban leírt agaros táptalaj felületére fektetjük. A gyökereztető táptalajra helyezést tőosztással havonta megismételjük, az általános gyökeresedés elérésésig, amikor a gyökeres tenyészeteket 2-3 hajtásos dugványokra szedjük szét és azokat a gyökérzet regenerálódása után üvegházb^n, talajba ültetjük és 2 hónapi edzés után konténerbe ültetjük. Az agaros táp- 55 talajon nőtt tenyészeteket 2 hónap után feldaraboljuk és a hajtások csúcsi részét ismét szaporító táptalajra fektetjük, míg az alapi részekkel újabb gyökereztetési ciklust indítunk meg. Az eljárás lépéseinek rendszeres ismétlésével egy év alatt 10.000 gyökeres növény állítható elő egy edény spórgatenyészetből. 3. példa A tenyésztést az 1. példa szerint szaporító vagy gyökereztetö táptalajon végezzük, 5 majd a keletkezett hajtásokat levágjuk és az 1. tál Házaiban leírt, de agart nem tartalmazó folyékony táptalajra fektetjük. A hajtásokból kinőtt két vagy több hajtással, rüggyel és kalluszos alappal rendelkező dugványokat az anyhajtásról levágjuk és a 3. táblázatban leírt táptalajba dugványozzuk. Egy hónapos, 18-20 °C-on 16 órás megvilágítás mellett egy hónapig neveljük, majd a gyökeres növényeket talajba ültetjük, a nem gyökeres bokrokat tőosztással 2-3 hajtásos dugványokra szedjük szét és a 3. táblázatban leírt, de gyökereztetö hormont nem tartalmazó táptalajba dugványozzuk és gyökereztetjük, majd talajba ültetjük. A nem gyökeresedett, de több hajtással rendelkező bokrokkal a tőosztást és gyökereztetést a teljes gyökeresedésig végezzük. Egy tenyészetből egy év alatt több, mint 1 millió gyökeres növény állítható elő, ha a szaporítást 200.000 primer dugvány előállításáig végezzük, majd a gyökereztetést tőosztással 2-3 szór megismételve is végezzük. 30 4, példa A tenyésztést az 1. példa szerint szaporító vagy gyökereztetö táptalajon végezzük, majd a keletkezett hajtásokat levágjuk és az 35 1. táblázatban leírt táptalajba dugványozzuk és 2 mg/1 kinetint tartalmazó folyékony táptalajt öntünk a tenyészetekre és ebben a kétfázisú táptalajban egy hónapig tenyésztjük. A hajtásokból kinőtt két vagy több haj- 40 tással, rüggyel és kalluszos alappal rendelkező dugványokat az anyahajtásról levágjuk és a 3. táblázatban leírt táptalajba dugványozzuk. Ebben a táptalajban 3 hétig neveljük 22 °C hőmérsékleten, majd tőosztással 2- -3 hajtásos kalluszos alapú részekre választjuk és a 3. táblázat szerinti, de gyökereztetö hormont nem tartalmazó táptalajba dugványozzuk és 4 hétig 5 °C hőmérsékleten továbbneveljük és a gyökeres növényeket ta- 50 'ajba ültetjük. Spárga szövetienyésztéshez használt táptalajok l. táblázat Spárga szaporító táptalaj (mg/liter) 60 NH4NO3 1600 mg KNO3 1900 mg DaCl2.2H20 440 mg MgSCU.7H20 370 mg Ha2EDTA+FeS04.7H20 25 mg 65 H3BO3 6,2 mg M11SO4.4H2O 22,3 mg 4