198482. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-(3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahidropirido-(2,3-d)pirimidin származékok és ezen vegyületeket tartalmazó gyógyszerek előállítására
1 HU 198482 B 2 ledesztilláljuk, a maradékhoz hozzáadunk 20 ml vizet, a vizes elegyet ecetsav hozzácsepegtetésével megsavanyítjuk. Az elegyet 2 órán át O’C hőmérsékleten állni hagyjuk, majd a szilárd részeket kiszűrjük. íly módon 0,485 g (hozam: 88%) N-[4-(’-[2-amino-4- (3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[2,3-d]pirimidin-6-i l-metil]-amino)-benzoil]-L-glutaminsavat nyerünk, op.: 198’C-tól kezdve bomlik. 1 H-NMR-spektrum (DMSO-de), delta: 1,86 - 2,1 (m, 6 H), 2,31 (t, 2 H, J = 7,2), 2,8 - 2,86 (m, 1 H), 3,24 - 3,28 (m, 2 H), 4,2 - 4,4 (m, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 6,29 (s, 1 H), 6,34 (t, 1 H, J = 5,24), 6.56 - 6,58 (AA’BB’, 2H), 7,62 - 7,65 (AA’BB\ 2 H), 8,06 (d, J = 5,15), 9,7 )széles s, 1 H). Ugyanezt a terméket úgy is előállíthatjuk, hogy az N-[4-(N’-[2-pivaloil-amino-4(3H)-oxo-pirido-[2,3-d]pirimidin-6-il-metil] -N’-formil-amino)-benzoil]glutaminsav-dietil-észtert elhidrolizáljuk. Egy másik módszer szerint eljárhatunk a következőképpen: 1,44 g (2,4 mmól) N’-[4-(N-[2-pivaloil-amino-4(3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-pirido-[2,3-d]p irimidin-6-il-metil]-N’-formil-amino)-benzoil]-L-glut aminsav-dietil-észtert feloldunk 1 normál nátrium-hidroxid-oldatban, és az oldatot 72 órán át 25’C hőmérsékleten keverjük. Utána az elegyhez aktívszenet adunk, a szuszpenziót keverjük, majd az aktívszenet kiszűrjük. A szűrletet ecetsavval megsavanyítjuk, az elegyet félórán át 0*C hőmérsékleten tartjuk, majd a kivált fehérszínű, szilárd anyagot kiszűrjük. íly módon 0,87 g (hozam: 84 %), az előző bekezdésben megadott terméket kapunk, op.: 198*C-tól kezdődően lassan elbomlik. IR-spektrum (KBr), nümax: 3460 - 2500 (NH és COOH), 1695, 1655 és 1600 (C=0) cm'1. ‘H-NMR-spektrum (DMSO-dö), delta: 1,85 - 2,02 (ni, 6 H), 2,3 (t, 2 H, J = 7,4 Hz), 2,81 - 2,88 (m, 1 H), 3,23 - 3,32 (m, 2 H), 4,2 - 4,4 (m, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 6,34 (t, 1 H, J= 5,28 Hz), 6,55 -6.57 (m, 2 H, AA’BB’), 7,61 - 7,64 (AA’BB’, 2 H), 8,08 (d, 1 H, J = 7,64 Hz), 9,7 (széles s, 1 H). 13. példa Az N-[4-(N’-[2-amino-4(3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[2,3-d] pirimidin-6-il-metil]-amino)-benzoil]L-glutaminsavból 1 mg/ml koncentrációjú oldatot készítünk egy olyan oldószer-elegyben, amely acetonitrilből (15 %) és trietil-amin és ecetsav 0,1 %-os, pH = 7,0-ra pufferolt oldatából (85 %) áll. Ezt az oldatot felvisszük a nagyfelbontású folyadék-kromatográfban levő, 10 mm x 50 cm méretű, Cyclobond I jelzésű, fordított fázisú szilikagéllel töltött oszlopra, és eluensként ugyanezt az oldószer-elegyet használjuk. Az áramlási sebesség: 1,10 ml/perc, s a kromatografálást 254 nm hullámhosszúságú ultraibolya fényben végzett fényelnyelés-vizsgálattal követjük. Az első diasztereoizomert (amely lényegében nem tartalmazza a másik izomert) 45,58 perces retenciós idővel kapjuk, ezt az izomert A-izomemek nevezzük. A másik diasztereoizomert (amely lényegében nem tartalmazza az első izomert) 48,32 perc retenciós idővel kapjuk, ezt az izomert B-izomemek nevezzük. 14. példa 10-10 nőstény egeret intraperitoneálisan, a hátsó lábak töve tájékán megfertőzünk C3H emlő adenokarcinóma sejtekkel. Utána a vizsgálandó vegyületeket Emulphor IP emulgeálószer 0,5 ml térfogatú részleteiben emulgeálva adjuk az állatoknak, 10 napon át. A kontrollcsoportba tartozó állatokat ugyanígy kezeljük, de ezeknek a vizsgálandó anyagot nem adjuk be. Az N-[4-(N’-[2-amino-4(3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[2,3-d] pirimidin-6-il-metil]-amino)-benzoil]L-glutaminsav 6,25 mg/kg-os dózisban 10 túlélő állat közül 7 állat esetében 96 %-os gátlást mutatott. Egy nyolc napos kezelési időszak alatt, 6C3HED jelzésű limfoszaikómával szemben az alábbi eredményeket kaptuk a fenti vegyülettel: Dózis (mg/kg) Gátlás Túlélés 6,0 77 10/10 12,5 100 9/10 25,0 100 7/10 50,0 100 4/10 100,0 100 1/10 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás (I) általános képletű, ahol R‘ hidrogénatom, vagy R5CO-általános képletű csoport, ahol R5 hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport és a *-gal megjelölt szénatom konfigurációja L, vegyületek és ezek tautomer formái előállítására, azzal jellemezve, hogy a) egy (II) általános képletű vegyületet, ahol R1 a fenti, R2 és R3 jelentése karboxilcsoport védésére alkalmas, azonos vagy eltérő, önmagában ismert védőcsoport és R4 az aminocsoport védésére alkalmas, önmagában ismert védőcsoport, hidrolizálunk, vagy b) egy (ül) általános képletű vegyületet, ahol R‘ a fenti, R2’ és R3’ hidrogénatom vagy a karboxilcsoport védésére alkalmas, azonos vagy eltérő, önmagában ismert védőcsoport, és R4’ hidrogénatom vagy az aminocsoport védésére alkalmas, önmagában ismert védőcsoport, katalitikusán hidrogénezünk és egy így keletkezett vegyületről az adott esetben jelenlévő védőcsoportokat eltávolítjuk, vagy c) olyan (I) általános képletű vegyületek előállítására, ahol R1 jelentése RsCO- általános képletű csoport, egy (VI) általános képletű vegyületet, ahol R‘ hidrogénatom és R2, R3’ és R4’ a fenti, R5COOH általános képletű savval, ahol R5 hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, vagy annak reaktív acilező származékával reagáltatunk, és egy így keletkezett vegyületről az adott esetben jelenlevő védőcsoportokat lehasítjuk. (E: 1986. 06. 30.) 2. Az 1. igénypont szerinti a) eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (II) általános képletű vegyületből indulunk ki, ahol R1 jelentése hidrogénatom, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
