198443. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új rezorcin-éterek előállítására
1 2 oxi-propil-oxi]-fenil} -oxaminsav-nátriumsó : 100-nál hatástalan. Az ismertetett kísérleti körülmények között a mepacrin a foszfolipáz A2-t olyan mértékben gátolja, hogy az lC50-érték: 1600]/amól/liter. Emberi trombocitákból nyert foszfolipáz C gátlásának meghatározása (in vitro teszt) „Buffy coats"-ból kiindulva frakdonált centrifugálással és ezt követően mélyfagyasztással emberi trombocitákat nyerünk. A sejtszuszpenzió ultrahanggal végzett kezelésével a foszfolipáz C-t felszabadítjuk, ami 150.000 g-vei 1 órán át végzett ultracentrifugálás után oldható formában a centrifugálási maradékban van. Az enzimaktivitás meghatározása céljából az enzimet (20—100 pg protein) 6 pH-jú 0,025 mólos trisz/ /maleát-pufferben 0,2 mmól kalcium-klorid hozzátétele mellett 0,02 mmól radioaktívan jelzett szubsztrátummal 37 °C-on 5 percig inkubáljuk, a szubsztrátum : foszfatidil-[] 4C]-inozit. A reakciót kloroform és metanol térfogat szerint (v;v) 2:1 arányú elegyével végzett kirázással állítjuk meg. A fel nem használt szubsztrátum az extrakció során a szerves fázisban megy át, míg a MC-inozit-foszfát reakciótennék a vizes fázisban marad és annak mennyiségét egy alikvot rész radiometrikus mérésével meg lehet határozni. A vizsgálandó vegyületeknek foszfolipáz C re kifejtett gátló hatását úgy határozzuk meg. hogy a vegyieteket vizes, dimetil-szulfoxidos oldat formájában (a végső koncentráció: a teljes tétel 5 térfogatszázalékáig terjed) az inkubálásra kerülő elegyhez adjuk. A vizsgált vegyületek hatáserősségét az IC50- -értékkel fejezzük ki, ami a kontroll aktivitásához képest 50%-os gátlást eredményező koncentrációt jelenti. Ezeket az 1C50 értékeket grafikusan ábrázoljuk olymódon, hogy egy koordináta-rendszerben a százalékban kifejezett gátlást az ordinátára, míg ápolóiban kifejezett koncentráció logaritmusát az abszciszszára visszük fel. A fenti modellkísérlet során p mól (liter dimenzióban kifejezve az alábbi 1C5 0 -értékeket kaptuk: N-(3-[3-(4-acetil-3-hidroxi-2-n-propil-fenoxi)-propil-oxi]-2-ciano-fenil} -1 H-tetrazol-5-karboxamid-trietanol-ammóniumsó 14, N-j3-[3-(4-acetil-3-hidroxj-2-n-propil-fenoxi)-2-hidroxi-propil-oxi]-2-ciano-fenilJ -oxaminsav-nátriumsó : 100-nál hatástalan. Az ismertetett kísérleti körülmények között a mepacrin a foszfolipán C-t olyan mértékben gátolja, hogy az ICjo érték : 20 pmól/liter. A találmány főleg az olyan (1) általános képletű vegyületek és sóik, különösen gyógyszerészeti szempontból alkalmas sóik előállítására vonatkozik, ahol R6 jelentése hidrogénatom, halogénatom, rövidszénláncú alkilcsoport, vagy rövidszénláncú alkoxi-karbonil-csoport. A találmány leginkább az olyan (I) általános képletű vegyületek és sóik, különösen gyógyszerészeti szempontból alkalmas sók előállítására vonatkozik, ahol Rí legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, így metilcsoport, R2 legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, így propilcsoport, R3 hidrogénatomot jelent, R4 és Rs közül az egyik egy -NH-C(=0)-R8 általános képletű csoport, míg a másik egy R9 helyettesítőt képvisel, Ré hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, így metilcsoport, legfeljebb 35-ös atomszámú halogénatom, így fluor-, klór- vagy brómatom, legfeljebb 5 szénatomot tartalmazó rövidszénláncú alkoxi-karbonil-csoport, így etoxi-karbonil-csoport vagy karboxilcsoport. R7 jelentése hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, így metilcsoport, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkoxiesoport, így metoxiesoport, vagy pedig legfeljebb 35-ös atomszámú halogénatom, így klór- vagy brómatom, Rg karboxilcsoport, legfeljebb 4 szénatomot tartalmazó rövidszénláncú alkoxi-karbonil-csoport, így metoxi-karbonil-csoport, vagy etoxi-karbonilcsoport, vagy 5-tetrazolilcsoport, R9 jelentése hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, így metilcsoport, 17- 53 atomszámú halogénatom, így klór-, brónv vagy jódatom, továbbá triíluor-metil-csoport, míg alk különösen egyenes szénláncú és terminálisán kapcsolódó alkiléncsoport, amely 2-5 szénatomot tartalmaz, így 1,3-propiléncsoport vagy 1,5-pentiléncsoport. A találmány mindenekelőtt például az (1) és az (E ) általános képletű vegyületek és ezen vegyületek sói, különösen gyógyszerészetileg alkalmazható sói előállítására vonatkozik — az említett általános képletekben Rt jelentése legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, így metilcsoport, R2 legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoportot jelent, R6 jelentése hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, legfeljebb 35-ös atemszámú halogénatom, legfeljebb 5 szénatomot tartalmazó rövidszénláncú alkoxi-karbonil-csoport, vagy karboxilcsoport, R7 hidrogénatomot, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoportot vagy legfeljebb 35-ös atomszámú halogénatomot jelent, R8 karboxilcsoport, az alkoxi-részben legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkoxi-karbonil-csoport, vagy 4-tctrazolilcsoport, R9 hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport. legalább 17 és legfeljebb 53 atomszámú halogénatom, illetve trifluor-metil-csoport és alk jelentése legfeljebb 4 szénatomos alkiléncsoport. A találmány a fentiekben meghatározott vegyületcsoporton belül főleg az olyan (!') általános képletű vegyületek és sóik, különösen bázisokkal képezett és gyógyszerészeti szempontból alkalmas sóik előállítására vonatkozik, ahol R, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, így metilcsoport, R2 jelentése egyenes szénláncú, legfeljebb 4 szénatomot tartalmazó rövidszénláncú alkilcsoport. így propilcsoport, Rs karboxilcsoport vagy 5-tetrazolilcsoport, R9 hidrogénatomot, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoportot, így metilcsoportot, trifluor-metil-csoportot, vagy legfeljebb 35-ös atomszámú halogénatomot, így fluor-, klór- vagy brómatomot jelent, R7 hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, így metilcsoport, vagy legfeljebb 35-ös atomszámú halogénatom, így klóratom, Re jelentése hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos rövidszénláncú alkilcsoport, így metilcsoport, legfeljebb 35-ös atomszámú halogénatom, így fluor-, klórvagy brómatom, vagy legfeljebb 5 szénatomot tartalmazó rövidszénláncú alkoxi-karbonil-csoport, így metoxi-karbonil-cscport, vagy karboxilcsoport és alk egyenes szénláncú, terminálisán kapcsolódó rö-198.443 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
