198387. lajstromszámú szabadalom • Eljárás timolot és 7-karboxi-alkil-amino-acil-1,4,-ditia-7-aza-spiro [4 4]nonán-8-karbonsavat tartalmazó glaukóma elleni készítmények előállítására
1 198 387 2 A találmány hatóanyagként timololt ,azaz [ 1 -[(1,1 dimetil-etil)-amino]-3-[(4-morfo]inil-l,2,5-tiadiazol-3-il)-oxi]-2-propanol]-t és 7-karboxi-alkil-amino-acil-l,4-ditia-7- -aza-spiro[4,4]nonán-8-karbonsavat tartalmazó, galukóma elleni készítmények > előállítására vonatkozik. A glaukóma szembetegség komplexum, amely a szemen belüli megnövekedett nyomással (intraocular pressure, IOP) kapcsolatos. A megnövekedett intraokuláris nyomás eredményeként a látóidegfő károsodása következtében a látási funkció irreverzibilis elvesztése állhat be. Ha nem kezelik, ez az állapot végleges vakságot okozhat. A szemorvosok többsége azon a nézeten van, hogy a szem hipertenziója, vagyis a megnövekedett intraokuláris nyomás állapota, a látóidegfő károsodása vagy a jellegzetes glaukómás látótér-veszteség nélkül, a glaukóma jelentkezésének legkorábbi fázisa. A glaukóma kezelésére jelenleg használt számos gyógyszer nem teljesen kielégítő, főképpen a betegség legkorábbi fázisában, amikor a mellékhatások, amelyeket okoznak, gyakrabban rosszabbak, mint a betegség tünetei. Az epinefrint, amit oldat alakjában helyileg alkalmaznak, a magasvémyomású, cukorbeteg, pajzsmírigytúlműködéses és agyérelmeszesedéses betegeknél a szisztémás hatás lehetősége miatt elővigyázattal kell használni. A timolol klinikailag alkalmazott, helyileg használt szer az intraokuláris nyomás csökkentésére, amit élővigyázattal kell alkalmazni azoknál a betegeknél, akiknél a (3-adrenerg blokád nem kívánatos lehet. A helyileg alkalmazott timolol általános abszorpciója és szisztémás (3-blokádja a felelősek a galukóma timolol-terápiájának ellenjavallatáért olyan betegeknél, akiknek tüdőfunkciója veszélyeztetett és olyan betegeknél, akik nem tudják elviselni szisztémás szív- és érrendszeri hatásukat. A pilokarpin egy helyi gyógyszer, amit szisztémásán ártalmatlannak és igen hatásosnak tartanak, jelentős lokális nehézségeket okozhat. A pupilla összehúzódása következtében a szem elveszti azt a képességét, hogy a világosság után a sötétséghez alkamazkodjék. Az alkalmazkodóképesség stimulálódhat ügy, hogy a beteg szemének fénytörése néha inkorrekt és látása homályos lesz. A gyógyszer maga helyi értágulatot és vörös szemeket okozhat. A szem izgalmi állapota általános. A szénsav-anhidráz inhibitorokat használják szisztémásán, de ezeknek számos hátránya van. Miközben hatásos az intraokuláris nyomás csökkentésére, gyakran okoz zsibbadtságot és bizsergést, gymor- és bélrendszeri rendellenességet és gyakran depressziót, letargiát, az étvágy elvesztését és általános rossz közérzetet. A 31 400 3263 számú európai szabadalmi bejelentés (nyilvánosságra hozatali száma 36 351) megkísérelte legyőzni ezeket a nehézségeket úgy, hogy egy szénsavanhidráz inhibitor alkálifémsóját alkalmazta helyileg. A 99 2 39 és 114 333 számú nyilvánosságra hozott európai szabadalmi bejelentések ismertetnek bizonyos angiotenzin-átalakító enzim inhibitorokat, mint az intraokuláris nyomás szabályozására használható szereket. A jelen találmány új megközelítést nyújt a glaukómával kapcsolatos megnövekedett intraokuláris nyomás terápiás csökkentésére és szabályozására. A találmány tárgyát képezi egy helyi kezelésre szolgáin, szemészetileg elfogadható, glaukómával kapcsolatos megnövekedett intraokuláris nyomás csökkentésére és/\agy szabályozására alkalmas gyógyszerkészítmény előállítása, amely egy gyógyszerészetileg elfogadható angiotenzin-á talakító enzim inhibitort és egy gyógyszerésze'ileg elfogadható /3-adrenerg blokkoló anyagot, egy szemészetileg elfogadható hordozóval keverve tartalmaz. A készítmény előnyösen 0,005—50 pg ACE (angiotensin converting enzyme) inhibitort és 5—500 pg /3-adrenerg blokkoló anyagot tartalmaz. A találmány szerint előállított készítmény /3-adrenerg blokkolóként timololt [1-[1 ,l-dimetil-etil)-amino]-3-[(4- -morfolinil-l,2,4-tiadiazol-3-il)-oxi]-2-propanol] ésangioterzin-átalakító enzim inhibotorként 7-[N-(l-(S)-karboxi-3-fenil-propil)-(S)-alaniI]-l,4-ditia-7-aza-5piro [4,4]nonán-8(S)-karbonsavat tartalmaz. Utóbbi ACE inhibitort az 50 800 számú nyilvánosságra hozott európai szabadalmi bejelentés ismerteti. A timolol jól ismert /3-adrenerg blokkoló. A továbbiakban a /3-adrenerg blokkolóra, illetve az angiotenzin-átalakító enzim inhibitorra történő hivatkozás a fenti két hatóanyagra utal. A találmány szerint előállított előnyös gyógyszerkészítmény a következő összetételű: a) 7-[N-(l (S)-karboxi-3-fenil-propil)-(S)-a]anil ]-l ,4- -ditia-7-aza-spiro[4,4]-nonán-8(S)-karbonsav, 0,005— 50 pg mennyiségben, és b) timolol, 5—500 pg mennyiségben, szemészetileg elfogadható, helyi használatra alkalmas hordozóval keverve. Az angiotenzin átalakító enzim (ACE) inhibitorai a szakirodalomból ismertek. Az angiotenzin II a vérnyomást növelő anyag, amely in vivo az angiotenzin átalakító enzimnek az angiotenzin I-re gyakorolt hatására termelődik. Azok a vegyületek, amelyek az angiotenzin átalakító enzim hatását gátolni tudják, klinikailag alkalmazhatók hipertóniában szenvedő humán betegek vérnyomásának a szabályozására. Az angiotenzin átalakító enzim inhibitorok a szakirodalomból ismertek és igen különböző szerkezetűek lehetnek [például: An. Rev. Biochem. 51, 283 (1982) és az itt felsorolt referenciák]. Az angiotenzin átalakító enzim (ACE) aktivitását szintetikus szubsztrátum, a hippuril-hisztidil-leucin (HHL) hidrolízis termékének spektrofotometrikus vizsgálatával határozzuk meg, ahogyan azt Cushman és Cheung ismertették [Biochem. Pharmacol., 20, 1637 (1971)]. Az alkalmazott angiotenzin átalakító enzimet Cheung és Cushman eljárásához [Biochem. Biophys. A:ta, 293, 451 (1973)] hasonló módon állítjuk elő. Az enzimaktivitási vizsgálatoknál az inkubálást 37 °C-on végezzük. Minden egyes 0,25 ml mennyiségű vizsgálati keverék a következő komponensekből áll: 300 mM nátrium-kloridot tartalmazó 100 mmólos kálium-foszfát puffer, 5 mM hippuril-hisztidil-leucin és 1,87 mE enzim, pH=8,3, és az inhibitorok különböző koncentrációi. Az enzimreakciót 60 perc múlva 0,25 ml 1 n HC1 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
