198296. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 2-piridinil-ecetsav származékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 2 tyáján észlelt sérülések hosszának összegét adjuk meg sérülési (léziós) indexként (mm). A kezelt csoport sérülési indexét a kontroll csoporthoz hasonlítva az alább megadott képlet szerint számítjuk ki a %-os gátlást. A %-os gátlást a dózis (mg/kg) függvényében féllogaritmusos papíron ábrázolva határozzuk meg az ED50- értéket. Minden vizsgálandó vegyületet néhány csepp Tween 80-at tartalmazó fiziológiás sóoldatban szuszpendálunk, és a hidrogén-kloridos etanol adagolását 30 perccel megelőzően orálisan adjuk be az állatoknak. ’ A kontroll csoport - A kezelt csoport Gátlás % • átlagos léziós indexe - átlagos léziós indexe x j qq A kontroll csoport átlagos léziós in'dexe A gyomorsav kiválasztás gátlásában kifejtett hatást és a gyomornyálkahártyának hidrogén-kloridos etanollal szemben való védelmében elért hatást az V. táblázatban mutatjuk be. V. táblázat A példa száma EDjo (mg/kg i.d.) Hatás a gyomorsav kiválasztásra ED5o (mg/kg p.o) Hatás HG-etanollal kiváltott fekélyre LD5o (mg/kg p.o) (egérben) 30. 2,4 31. 4,0 6,8 — 32. 3,8 _ — 33. 15,5 — — 35. 9,3 3,4 >1300 37. 12,3 — — 38. 3,5 1,1 — 39. 4,4 7,7 — 41. 5,0 1,4 >1300 43. 36,0 3,7 — 44. 5,6 0,3 — 46. 5,3 2,8 >2000 47. '7,8 . 4,5 — 48. 3,8 — — 49.-2,3 — 53. 6,4--3. Vizsgálati példa Aszpirinnel indukált fekély ellen kifejtett hatás 220 g körüli testtömegű, 24 órán át éheztetett Sprague-Dawley törzsbe tartozó hím patkányok piloruszát éteres anesztézia mellett elkötjük, és a vizsgálandó gyógyszereket a duodenumukba visszük. Az éteres anesztézia hatásának megszűnése után 1%-os CMC-ban szuszpendált aszpirint adunk be 150 mg/ /testtömeg kg mennyiségben az állatoknak. 5 óra múlva éteres anesztézia mellett eltávolítjuk a gyomrukat, a gyomorba 10 ml 2%-os formaiint injektálunk és a gyomrot 15 percre 2%-os formalinoldatba merítjük, ezután a gyomrot a nagyobb görbület mentén felvágjuk és tízszeres, nagyítású mikroszkóp alatt megmérjük a gyomor mirigyes részén keletkezett sérülések hosszát, és az egy patkányon mért sérülések hosszát, és az egy patkányon mért sérülések hoszszából (mm) meghatározzuk a sérülési indexet. Az ED5 o értéket az előbbiekben ismertetett módon határozzuk meg. 4. Vizsgálati példa Indometadnnal kiváltott fekély elleni hatás Sprague-Dawley törzsből származó 200-220 g testtömegű, hím patkányokat 24 órán át éheztetünk, majd 30 mg/kg, 1%-os CMC-ban szuszpendált indometacint adunk be szubkután az állatoknak. 5 óra múlva gyomrukat éteres anesztézia mellett eltávolítjuk, majd a 3. vizsgálati példában, az aszpirinnel kiváltott fekély elleni hatás vizsgáltánál leírt módon járunk el. Megmérjük a gyomor mirigyes részén keletkezett sérülések hosszát (mm), és az egy patkány gyomrán mért nyálkahártya sérülések hosszából meghatározzuk a sérülési indexet. A vizsgálandó szereket az indometadn adagolást megelőzően 30 perccel adjuk be. Az ED50 értéket az előbbiekben ismertetett módon határozzuk meg. 5. Vizsgálati példa Ghosh és Schild patkányok (módszerek) 200—250 g testtömegű hím, Sprague-Dawley törzsbe tartozó patkányokat 24 órán át a tápláléktól megfosztunk, de vízzel ad libitum ellátunk. Az állatok gyomrát ezután uretán anesztézia mellett (1,25 g/kg, i.p.) középvonali bemetszéssel kiemeljük, és a gyomorba (..forestomach”) pilietilén kanült helyezünk. Egy másik kanült a duodénumon keresztül helyezünk a gyomorba és a helyéhez a pilorus körüli kötéssel rögzítjük. Ügyelünk arra, hogy a kötés ne élje az ereket és az epe-, illetve hasnyálmirigy-vezetéket. A gyomrot perisztaltikus szivattyú segítségével 1 ml/perc sebességgel áramló fiziológiás sóoldattal öblítjük át. A gyomorhoz („forestomach”) és a pilorushoz erősített kanülökhöz kötött bevezető- és elvezetőcsöveket egy olyan tartályba helyezzük, amelybe üveg pH-elektródát helyezünk. A titrálást luminál jelenlétében pH 7,0-ig végezzük pH-stat módszerrel (comtite-8, Hiranuma), 0,1 n nátrium-hidroxidnak 100%-os oxigénatmoszférában a tartályba való adagolásával. A savtermelést a rekorderen folyamatosan nyomonkövetjük. A farok vénájába 2 ml/ /óra sebességgel hisztamin x 2 HG-t (5 mg/kg/óra) adunk be. A felfokozott savelválasztás stabilizálódása után (90 perc - 2 óra) a vizsgálandó anyagokat 0,5% CMC-ban vagy Tween 80-as sóoldatban felszuszpendáljuk és intraduodenálisan beadagoljuk. A savtermelést /zekvivalens/30 perc értékben adjuk meg a vizsgált szer (30 mg/kg i.d.) beadása előtt és azt követően, 90—120 perc, a maximálisan felfokozott kiválasztás alatt, és a kiválasztásnak a szer által való visszaszorítását a szer adagolást megelőző átlagos savtermelés %-ában adjuk meg. Az eredményeket az úgynevezett párosított Student t próbával elemeztük. 198.296 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 16
