198215. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a TAN-749 antibiotikummal rokon szerkezetű vegyületek előállítására
19 HU 198215 B 20 40 ml 150-290 pm szemcBeméretú Diaion HP-20 töltetű oszlopon ótfolyatunk. Az oszlopot frakcionélva eluáljuk. A kapott frakciókat nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással eluáljuk, mozgó fázisként 30% acetonitrilt tartalmazó 0,01 mól/1 oktánszulfonát-0,02 mól/1 foszforsav elegyet (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesitjük és koncentráljuk, a koncentrétumot liofilizáljuk. 118 mg 12. vegyületet kapunk, tri(hidrogén-klorid)-só formájában. Optikai forgatóképesség: [oCj^D = -7,6 o (c = 0,45, viz) Elemanalizis eredmények a C9H21N5O2 • 3HC1 ■ • 2HzO. összegképlet alapján: számított: C = 28.70X, H = 7,49%, N = 18,59%%, Cl = 28,23%; talált: C = 28,58%, H = 7,19%, N = 18,32%, Cl = 28,41%. 9. példa 10,0 g hidrogén-klorid-só formájában lévő 10. vegyületet 5,0 1 0,03 mól/1 koncentrációjú foszfát-puffe Toldatban (pH 7,0) oldunk. Az oldathoz 500 g Pseudomonas acidovorans baktériumsejtet adunk, és 37 °C-on 15 órán át rázzuk. A reakcióelegyet centrifugáljuk, a kapott felülúszó pH-ját 7,3-ra állítjuk, majd 1 liter IRC-50-nel (Na^-tipus) töltött oszlopon folyatjuk át. az oszlopot 4 1 vizzel mossuk, majd 8 1 0,5 mól/1 koncentrációjú sóoldattal, és utána 5 1 1,0 mól/1 koncentrációjú sóoldattal frakcionélva eluáljuk. A kapott frakciókat nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 15% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesitjük és 0,8 1 aktivszénnel töltött oszlopon átfolyatjuk. Az oszlopot 2 1 vizzel mossuk, majd 4 18% izobutanolt tartalmazó vizzel, és utána 3 18% izobutanolt tartalmazó 0,001 n sósavoldattal eluáljuk. Az eluétumot koncentráljuk, majd liofilizáljuk. 6,82 g 13. vegyületet kapunk, di(hidrogén-klorid)-só formájában. Optikai forgatóképesség: [oCJ^d = -1,6 0 (c = 0,90, viz) Elemanalízis eredmények a C14H29N5O4 • • 2HC1 • 0,5H20 összegképlet alapján: számított: C = 40,68%, H = 7,80%, N = 16,94%, Cl = 17,15%; talált: C a 40,62%, H = 8,40%, N = 17,04%, Cl = 17,76%. 10. példa 400 mg hidrogén-klorid-só formájában lévő 11. vegyületet 200 ml 0,03 mól/1 koncentrációjú foszfát-pufferoldatban (pH 7,0) oldunk. Az oldathoz 18 g Pseudomonas acidovorans baktériumsejtet adunk, és 37 °C-on 25 órán át rázzuk. A reakcióelegyet centrifugáljuk és a kapott felülúszót 30 ml IRC-50- -nel (NH4*-tlpus) töltött oszlopon folyatjuk át. Az eluálást 100 ml vízzel, 150 ml 0,5 mól/1 koncentrációjú sóoldattal, majd 100 ml I, 0 mól/1 koncentrációjú sóoldattal végezve az eluátumból 20 ml frakciókat szedünk. Minden frakciót nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizálunk, mozgó fázisként 15% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesítjük és koncentráljuk. A kapott koncentrátumot 20 ml aktívszénnel töltött oszlopon átfolyatjuk, és 100 ml vízzel, majd 100 ml 8% izobutanolt tartalmazó vizzel eluálva 20 ml-es frakciókra választjuk szét az eluétumot. A kapott frakciókat nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 15% metanol tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesítjük és koncentráljuk. A kapott koncentrátumot liofilizáljuk. 271 mg 14. vegyületet kapunk, di(hidrogén-klorid)-só formájában, fehér porként. Optikai forgatóképesség: [oC]21d = +4,0 0 (c = 0,55, víz) Elemanalizis eredmények a C15H31N5O4 • • 2HC1 • 0,5H2O összegképlet alapján: számított: C = 42,16%, H = 8,02%, N = 16,39%, Cl = 16,59%; talált: C = 42,23%, H = 8,61%, N = 16,33%, Cl = 16,8%. II. példa 50,2 g 83% tisztaságú, di(hidrogén-klorid)-sója formájában lévő 1. vegyület 500 ml 2 n sósavoldatban oldunk, és az oldatot olajfürdőn 130 °C-on 15 percen ét visszafolyató hűtő alatt melegítjük. Az oldatot ezután a hidrogén-klorid elpárologtatóséval koncentráljuk, majd 60 ml vízzel hígítjuk, és pH-jót 1 n vizes nótrium-hidroxid oldattal 6,8-ra állítjuk, majd koncentráljuk. A kapott koncentrátumot 10 1 150-290 pm szemcseméretű Diaion HP-20-szal töltött oszlopon átfolyatjuk, és 3 liter vízzel, majd 5 liter 10%-os vizes netanololdattal eluáljuk, az eluátumból 1 literes frakciókat szedünk. Az egyes frakciókat nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 20% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesítjük és koncentráljuk, majd a koncentrátumot liofilií-.áljuk. 1,79 g 15. vegyületet kapunk, por formájában. Optikai forgatóképesség: [dC]z1d = -22,3 0 (c - 0,52, víz) Elemanalízis eredmények a C12H20N2O4 • • 0,5H2O összegképlet alapján: számított: C = 54,33%, H = 7,98%, N = 10,56%; talált: C = 53,81%, H = 8,11%, N = 10,46%. .12. példa 1,25 g 86%-os tisztaságú, di(hidrogén-klorid)-só formájában lévő 2. vegyületet Í25 ml 2 n hidrogén-klorid oldatban oldunk, 5 .10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
