198102. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antraciklin származékok és hatóanyagként ezen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
13 98 102 14 használva, és az adszorbcáit antibiotikumot megfelelő oldószerrel eluáljuk. Az chiátumot ezután vákuumban szárazra párolva nyerstermékként barminomicin I-et és/vagy II-t kapunk, vörös por formájában. A nyerstermék barminomicin I-et és/vagy II-t megfelelő számú, fent említett extrakciós és adszorpciós eljárással, vagy azok kombinálásával tisztíthatjuk, kívánt esetben átkristályosítással kiegészítve. Tisztítási eljárásként célszerűen adszorbensen vagy gélszűrő anyagokon, például szilikagélen, enyhén savas ioncserélő gyantán, például Sepliadex LH20-on vagy Dia-Ion HP20-on végzett oszlopkromatográfiát, megfelelő oldószerrel végzett folyadék-kromatográfiát, ellenáramú megoszlást, és vékonyréteg-kromatográfiát használhatunk, külön-külön, vagy egymással kombinálva. A tisztítást közelebbről például az alábbiak szerint végezhetjük. A nyerstermék barminomicin I-et vagy II-t kevés kloroformban oldjuk; az oldatot szilikagél-oszlopra visszük, és az oszlopot megfelelő oldószerrel eluáljuk; a kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és vákuumban koncentráljuk; a koncentrátumot vékonyréteg-kromatográfiás elválasztásnak vetjük alá, és a kívánt terméket lényegében homogén formában kinyerjük. A kapott terméket nagynyomású folyadék-kromatográfiás eljárással tovább tisztíthatjuk. A barminomicin Ir-t vagy Ilr-t a találmány értelmében úgy állíthatjuk elő, hogy a megfelelő barminomicin I-et vagy II-t szintetikus kémiai eljárásokkal redukáljuk. A redukálást a szerves kémia területén szokásosan alkalmazott eljárásokkal végezhetjük; például a barminomicin I-et és/vagy II-t metanolban oldjuk, és NaBHaCN-del redukáljuk. A kapott barminomidin Ir-t és/vagy Ilr-t megfelelő eljárásokkal — például az antraciklin glikozidok területén szokásos szilikagélen végzett kromatográfiás eljárással — izolálhatjuk és tisztíthatjuk. A találmány szerinti eljárással előállított barminomicin-származékok rákellenes hatással, és igen erős mikróbaellenes hatással rendelkeznek, fenti Íratásuk következtében gyógyszerkészítmények hatóanyagaként használhatók. Biológiai tulajdonságaikat az alábbiakban ismertetjük. (1) Citotoxikus hatás (szövettenyészetben) A találmány szerinti eljárással előállított barminomicin-származékok igen alacsony koncentrációban gátolják a tenyésztett P388 leukémia-sejtek szaporodását. A fenti vegyületek citotoxicitása 1 — 100-szor nagyobb, mint az adriamiciné vagy a karminomicinsorozatba tartozó egyéb antracíklin-származékoké. Az eredményeket részletesen az 5. táblázatban ismertetjük. A vizsgálatot a J. Antibiotics 38, 1171 — 1181 (1985) irodalmi helyen ismertetett módon végezzük. 5. táblázat Antraciklin-származékok citotoxikus hatása __________Vegyüiet _ _ ICS0 (jug/ml) Találmány szerinti vegyületek barminomicin I ~0,00001 barminomicin II ~0,00002 J. táblázat (folytatás) Vegyüiet ICso (pg/ml) barminomicin ír 0,0015 barminomicin lir 0,002 Kontrol! vegyületek kanninomicin I 0,002 karminomicin 11 0,010 kanninomicin 111 0,006 adriamicin 0,0013 (2) Tumorellenes aktivitás CDF! egerekbe intrapcriloncálisan egerenként 1X105 L1210 leukémia-sejtet transzplantálunk. A transzplantálás után azonnal 0,25 ml vizsgálandó vegyületet tartalmazó oldattal kezeljük intraperitoneálisan az állatot, a 6. táblázatban feltüntetett kísérleti elrendezés szerint. A vizsgált vegyületek tumorellenes aktivitását - melyet a túlélési idő %-os meghosszabbodásával fejezünk ki (T/C%) — szintén a 6. táblázatban adjuk meg. 100%-mik vesszük a kontrol! — vagyis a csak fiziológiás sócidattal kezelt — állatok napokban mért túlélési idejét (a 0. nap az L1210 transzplantálás napját jelenti). [J. Antibiotics 36, 1080—1083 (1983); és Biomedicine and Pharmacotherapy 41, 227-232 (1987)]. 6. táblázat Tumorellenes aktivitás Dózis* (üg/egér/nap) Barminomicin I Barminomicin il 0,25 pusztulást okozó pusztulást okozó mérgezés a mérgezés a 4. és 4. napon, 120% 5.napon 0,125 mérgezési tünet, mérgezési tünet, 147% 173% 0,0625 mérgezési tünet, mérgezési tünet, 213%, 147% >500%, 173% 0,0313 mérgezési tünet, mérgezési tünet, >500%, 147% 140% 0,0157 mérgezési tünet, mérgezési tünet, 187%, 120% 120% 0,0078 mérgezési tünet, mérgezési tünet, 160% >500%, >500% *: adagolás: 0-10. napon (naponta) Dózis** (pg/egár/nap) Barminomicin ír Barminomicin Hr 40 mérgezés, 25% mérgezés, 37% 20 mérgezés, 37% mérgezés, 43 % 10 mérgezési tünet, mérgezési tünet, 49% 86% 5 141% 123% 2,5 129% 129% 1,25 97% 123% **: adagolás: 0—9. napon (naponta). 5 10 15 20 26 30 35 40 45 50 55 60 65 8
