198102. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antraciklin származékok és hatóanyagként ezen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
5 198 102 o 2. táblázat (folytatás) I II ír Hr b) rosszul oldódik VÍZ, VÍZ, víz, VÍZ, hexán, hexán, hexán, hexán, petroléter petrrléter petroléter petroléter *: futtatóelegy: kloroform—metanol—ecetsav—víz (60:10:1 :1). **: oszlop: Nuclcosil5Cig (4,6X250 mm) (M-Nagel terméke), eluens: acetonitril-0,2 %-os vizes foszforsav (40 : (.0), átfolyási sebesség: 1,5 ml/perc. 3. táblázat Barminomicin I és II1II NMR -spektruma [400 MIIz, d-CHCl3 - d-McOII (2:!)] Barminomicin I Barminomicin II 5 (ppm) Integráció Jelalak S (ppm) Integráció Jelalak 1,21 3H d 1,23 3H d 1,18-1,33 9H dX3 1,27 3H d 1,72 2H m 1,75-1,98 4H m 1,89 2H m 2,15 1H dd 2,13 1H dd 2,37 1H ddd 2,38 1H ddd 2,43 3H s 2,43 3H s 3,07 1H d 3,05 1H d 3,18 1H m 3,15 1H m 3,23 1H dd 3,21 1H dd 3,53 1H m 3,47 1H m 3,60 1H széles s 3,57 . 1H széles s 4,03 1H m 3,96 1H ni 4,17 1H dq 4,20 1H dq 5,24 1H dd 5,23 1H dd 5,47 1H dd 5,47 1H dd 7,35 1H dd 7,33 1H dd 7,76 1H dd 7,75 1H dd 7,91 1H dd 7,90 1H dd Az antraciklin-származékokat — a barminomicin I és 11-t — mint már említettük, jelenleg kizárólag mikroorganizmusok fermentálásával állítjuk elő. A fenti vegyületeket azonban előállíthatjuk analóg vegyületek szintetikus kémiai vagy mikrobiológiai módosításával, vagy teljes egészében kémiai szintetikus úton is. A találmány értelmében az (I) általános képletű vegyületeket egy, az Actinomadura nemzetségbe tartozó, barminomicin I vagy II termelésére képes mikroorganizmus fermentálásával állítjuk elő. Vizsgálataink szerint az általunk izolált MG— 463—yF4 törzs képes barminomicin I és Il-t termelni, megjegyezzük azonban, hogy más erre alkalmas törzset is lehet az antibiotikum-termelő mikroorganizmusok izolálására szokásosan alkalmazott eljárásokkal izolálni természetes forrásokból. Az MG463—yF4 vagy más barminomicin I és/vagy II termelésére képes törzs barminomicin I és/vagy II termelőképességét is fokozhatjuk, ha a fenti törzseket besugározzuk, vagy más szokásos kezelésnek vetjük alá. Barmino- 20 micin I vagy II termelőtörzseket génsebészeti eljárással is előállíthatunk oly módon, hogy a barminomicin tennelésére vonatkozó genetikus információt tartalmazó DNS-gént transzformálással, sejtfúzióval, vagy más szokásos eljárással hevisszük a gazdasejtbe. 25 A barminomicin Ir t és llr-t a barminomicin I, illetve II redukálásával állítjuk elő, kémiái eljárások segítségével. Az antraciklin-származék barminomicin termelésére képes mikroorganizmusként azonosított MG463—yF4 ?0 törzs jellemzőit az alábbiakban foglaljuk össze. (A) Eredet és letétbe helyezés Az actinomycesek közé tartozó MG463—yF4 05 törzset az Institute of Microbial Chemistry izolálta 1982. októberében Japánban (Nagoku-shi, Kochi). A törzset a Fermentation Research Institute, the Agency of Industrial Science and Technology-nál helyeztük letétbe 1983. november 24-én, FERM—P 40 7352 szám alatt, amely később a FÉM BP—1044 letéti számot kapta. (B) Mikológiái tulajdonságok ^5 (1) Morfológia Az MG463—yF4 törzs mikroszkópos képe alapján meglehetősen hosszú micéliummal rendelkezik, amely elágazó lég-hifából ered. A lég-micéliumon hajlott spóralánc van, és a 10 végén egy 2-4 gin átmérőjű pscudo-sporangium, 10 vagy' több spórából álló lánccal, amely tömör spirális tekercset alkot. A spórák felülete sima. (2) Szaporodás különféle tápközegekben f.5 A zárójelben levő szín—jelöléseket a Color Harmony Manual of Container Corporation of America szerint adjuk meg. (a) Szaccharóz-nitrát-agar tápközeg pp . (inkubálás 27 cC-on). Narancsszínű [5g, Peach Tan] — halványvörös [6— l/2ic, Coral Rose] tenyészethez tapadó fehér — hnlványró/.saszín [5ba, Shell Pink] légmieéliumok. Enyhén biborba játszó oldható 65 pigment képződik. 4
