198101. lajstromszámú szabadalom • Eljárás xanthomonas-heteropoliszacharid előállítására
5 198 lOi 6 IV. táblázat (folytatása) C) 15 tömeg % NaCl+1,5 tömeg% CaCl2 tartalmú oldatban 30 °C-on, 10s Pa túlnyomáson Törzs Minta 200 ml oldat szűrési ideje (sec) 5 /i+P/F* 1,2 p** g száraz poliiner/1 NCIB Fermentlé 14,5 330 0,58 11854 Enzimmel . , *** kezelve 22,1 101 0,56 NRRL Fermentlé 30,8 81,7 0,61 B-1459 Enzimmel kezelve > 1000 > 1000 0,63 D) 15 tömeg % NaCl +1,5 tömeg % CaCl2 tartalmú oldatban 70 Cont 10s Pa tiílnyomásott NCIB Fermentlé 17,0 299 0,58 11854 Enzimmel - - *** kezelve > 1000 > 1000 0,56 NRRL Fermentlé > 1000 > 1000 0,61 tí—1459 Enzimmel ** * kezelve > 1000 > 1000 0,63 *P/F = előszűrés a durva anyag eltávolítására. * = előszűrés nélkül, de az oldat előzetes áteresztése 5 p + P/F kezelésen. *** = alkáiikus prokázzal 60 °C-on, 8,5 pK-nál, 3 óra hosszat. A szűrést 47 mm átmérőjű Millipor szűrőkön végeztük. 5 p és 1,2 p ezeknek a szűrőknek a pórusmérete. A fenti táblázatból nyilvánvalóan látszik, hogy a Xanthomonas campestris NCIB 11854 fermentlevének szűrhetősége mind enzimes kezelés előtt, mind azután lényegesen jobb, mint a Xanthomonas campestris NRRL B-1459 törzsé. A Xanthomonas campestris NCIB 11854 és, Xanthomonas campestris NCIB 11803 azaz NRRL B—1459 (a továbbiakban NCIB 11854 és NCIB 11803) National Collection of industrial Bacteria által végzett jellemzése: Az eredmények az NCIB 11803 és NCIB i 1854 esetén azonosak voltak, kivéve, ahol külön jelöltük. Sejtmorfológia A) Oxolid CMI tápközeg + 0,75 tömeg%-os Difco agarlcmczcket „fiatal” tenyészettel oltottuk be, és inkubáltunk 7,5 óra hosszat 25 °C-on. A kb. 0,2 mm-es tenyészetek széléről származó foltokat vizsgáltunk, és fedőlemez alatt lefényképeztük fáziskontraszt mikroszkóppal. A mozgékonyságot, és a többi tulajdonságot 0,1 mm-es, a többi tenyészetre szórt üveggyöngyszemet körülvevő mélyedésben vizsgáltuk. A tenyészet szélén levő sejtek egyesével vagy párosával fordultak elő, méretük az NCIB 11803 esetén: szélesség 0,4-0,5 fim, hosszúság 1,2-2,5 pm, NCIB 11854 esetén: szélesség 0,5-0,6 /um, hosszúság 1,2-2,5 jum. 4 A tenyészet szélénél beljebb a mélyedésben az NCIB 11803 esetén 100-tói néhány 1000 sejlet luilalmiizó aggregátumok, míg az NCIB 11854 esetén lényegesen kevesebb sejtet tartalmazó aggregátumok láthatók. Mobilitás pozitív. B) Az A) bekezdésben ismertetettel azonos körülmények között, de a tápközeghez 0,5 tömeg% glükózt adva, és 7 óra hosszat inkubálva hasonló eredményeket kapunk, azzal a különbséggel, hogy a sejtek 0,1 jum-rel szélesebbek voltak, és az NCIB 11854 esetén nem voltak aggregátumok. Telepmorfológia A) 30 °C-on 48 óra hosszat Oxoid CM3 tartalmú agarlemezen végzett tenyésztésnél a növekedés jó, az elkülönülő telepek sárgák, koraiaknak, épek, nyálkásak, simák, szalagosak és domborúak. A telep átmérője 1 — 1,5 mm a 11803 esetén, és 1,5 mm a 11854 esetén. B) 30 °C-on 72 óra hosszat az A) bekezdésben ismertetett, de 1 tömeg % glükózt tartalmazó tápközegen a növekedés jó, az elkülönülő telepek halvány krémszínűek, kerekek, épek, erősen nyálkásak, simák és domborúak, míg az egybefolyó telepek halvány sárgás-krémszínűek. A telepek átmérője az NCIB 11803 esetén 2 mm, az NCIB J1854 esetén 2—2,5 mm. Kiválasztási morfológia Ásványi alapú módosított Pallérom 6 Doudoroff 1972(PD) (A. Rév. Phytophetol. 10, 73) Na2HP04-121I2) 6,0 g kh2fo4 2,4 g NH.,CI L0 g MgS04•7H20 0,5 g FcCN-6U20 0,01 g CaCIjóiljO 0,0! 8 Ionmentes víz 1 liter pH = 6,8. Ásványi alapú PD + 0,1 tömeg% sterilre szűrt glükóz (I'ÜGj Zselatin rudak tömeg % Oxoid Nr. 2 tápközeg 2,5 Zselatin (Difco) 12,0 Zselatin lemezek Oxoid CM3 tápagar 2,8 Zselatin 1,0 Tej lemezek tömeg % Fölözött tej (Difco) külön sterilezve 3 Pepton (Difco) 0,1 Láb—Lemco marhahús kivonat 0,1 NaCl 0,5 Agár 1,5 pH = 7,4 sterilezés előtt. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
