198091. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gangliczidszármazékok és az azokat hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
13 14 san 50 mg/kg dózisban (dózistérfogat 0,2 ml/egér) ciklofoszfanndot adunk; a 3. csoportot a fertőzés előtt 96 órával intravénásán 50 mg/kg dózisban (0,2 ml/egér) ciklofoszfamiddal, és 96 és 24 órával szubkután 10 mg/kg dózisban (0,25 ml/10 kg)GMiP- vel kezeljük; a 4. csoport a fertőzés előtt 96 és 24 órával szubkután 10 mg/kg dózisban (0,25 ml/10 g) GMiP-t kap. Az egereket intravénásán 0,225 ml/egér dózisban 18 órás Sabouraud-glükóz-táptalajon tenyésztett 1.20X103 scjt/ml koncentrációjú Candida albicans (CN7996 törzs) tenyészettel fertőzzük. Az alábbi eredményeket kapjuk: Csoport Átlagos túlélési idő Élő állatok száma a 23.napon 1. 8,00 0 2. 1,21 0 3. 6,28 0 4. 12,06 3 A fenti eredmények alapján megállapíthatjuk, hogy a G^iP-nek antifungális hatása van, és bizonyos mértékben felfüggeszti a ciklofoszfamid immunszupresszív hatását is. 5) Toxicitás A 2. példa szerint előállított GmiP gangliozidot intraperitoneálisan injektáltuk az egereknek, a maximális dózis 30 mg/kg volt. Nem észleltünk toxikus hatást. -SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás GmiP monoszialo-gangliozid-származékok előállítására, amelyek a) vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatban (i) kénsav-reagenssel (tömény kénsav és víz 1:1 arányú elegye), rezorcinol-reagenssel, orcinol/FeCl3 reagenssel és más jellegzetes gangliczid-reagenssel pozitív reakciót adnak, (ü) ninhidrin-reagcnsscl (0,2% ninhidrin etanolban) gyengén reagálnak, b) vizes oldatban felvett 13 C-NMR -spektrumuk lényegében a 2. ábra szerinti, c) egereken végzett in vivo vizsgálatban Klebsiella pneumoniae elleni hatással rendelkeznek, és d) egereken végzett in vivo vizsgálatban Herpes HSV—1 (F-törzs) elleni hatást mutatnak, azzal jellemezve, hogy (1) monoszialo-gangliozidot és kálcium-kationokat tartalmazó vizes oldatot vákuumban, 40 °C és 80 °C közötti hőmérsékleten koncentrálunk, (2) a pH-értéket pH 2 és pH 3 közötti értékre állítjuk, majd az oldatot dializáljuk, és (3) a víz oldószert elpárologtatjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként olyan (1) általános képletü monoszialo-gangliozidot használunk, amelynek képletében 8 R1 jelentése egy (a) általános képletü csoport, az utóbbi képletben n értéke 12 vagy 14, és R4 jelentése 15—23 szénatomos alifás csoport, és R2 és R3 jelentése a következő kombinációk egyike: R2 = -OR5 (Rs jelentése N-acetil-neuraminsav-csoport); és R3 = galaktozil-csoport (az 1-es helyzetben kötődik) (GMi gangliozid); R2 = -OR5 és R3 = H (GM2 gangliozid); R2 = —OR5 és R3 = fukozil-csoport; R2 = —OR6 (R6 jelentése N-glikolil-neuraminsav); és R3 = H, galaktozíl- vagy fukozil-csoport; R2 = —OH; és R3 = galaktozil-csoport (Gmi aszialogangliozid); vagy R1 jelentése H, R2 jelentése a fenti és R3 jelentése egy (b) általános képletü csoport, az utóbbi képletben R4 és n jelentése a fenti (Gmi gangliozid). 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként olyan (I) általános képletű monoszialo-gangliozidot használunk, amelynek képletében R2 jelentése -OR5 vagy -OR6 csoport, ahol R5 jelentése N-acctil-ncuraminsav-csoport, és R6 jelentése N-glikolil-neuraminsav- csoport. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 1—10 mmól/1 kálciumionkoncentrációt használunk. 5. Az 1—4. igénypontok bánnelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként olyan gangliozidot és kálciumionokat tartalmazó vizes oldatot alkalmazunk, amelyet egy kálcium-kationokat tartalmazó oldatnak egy gangliozid-oldattal szembeni dializálásával állítunk elő. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a koncentrálást 2.58X103—6,45 X103 Pa • nyomáson végezzük. 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a dialízist desztillált vízzel, vagy híg savoldattal szemben végezzük. 8. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1—7. igénypontok bárme-198 091 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
