198089. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a gonadotropint felszabadító hormon antagonista dekapeptid származékok előállítására
5 198 089 6 szereplő egyes aminosavakat egymás után (stepwise) kapcsoljuk össze, amint ezt a 4 211 693. számú amerikai szabadalmi leírás részletesen ismerteti. Az adott esetben jelenlevő szerin, tirozin és arginin, valamint bizonyos más aminosavak megfelelő csoportjait előnyösen önmagában ismert védőcsoportokkal megvédjük, a triptofán megfelelő csoportjait pedig adott esetben ugyancsak önmagában ismert csoportokkal védjük, és így kapcsoljuk a gyantához kötött állapotban kiépített peptidlánchoz. Ezzel a módszerrel a gyantához kötött pepiidet mint köztiterméket teljesen védett formában állítjuk elő. A jelen találmány szerinti peptidek előállításához használt köztitermékeket az X1-R1-(4W)D-Phe-R3(X2)-Sav(X3)-R5(X4) vagy (Xs)-R6(Xs)-R7(X6)-Arg(X5)-Pro-X7 általános képlettel jellemezhetjük, ahol X2 jelentése hidrogénatom vagy a triptofán indolgyűrűje nitrogénatomjának védésére szolgáló védőcsoport, például benzilcsoport; sok esetben azonban nem szükséges a triptofánt megvédenünk. A köztitermékek fenti általános képletében X3 jelentése hidrogénatom vagy a szerin alkoholos hidroxilesoportjának védésére szolgáló védőcsoport, például acetilcsoport, benzoilcsoport, tetrahidro-piranilcsoport, tercier-butilcsoport, tritilcsoport, benzilcsoport vagy 2,6-diklór-benzilcsoport, és előnyösen benzilcsoport. A köztitermékek fenti általános képletében X4 jelentése hidrogénatom, vagy ha tirozin van jelen a molekulában, akkor a tirozin fenolos hidroxilesoportjának védésére szolgáló védőcsoport, például tclrahidro-piranilcsoport, tercier-butilcsoport, tritilcsoport, benzilcsoport, benzilcxi-karbo.oilcsoport,4-bróm-benziJ- oxi-karbonilcsoport vagy 2,6-diklórbcnzilcsoporl, és előnyösen 2,6-cliklór-bcnzilcsoport. A köztitermékek fenti általános képletében Xs jelentése az arginin oldalláncában szereplő aminocsoport, továbbá az imidazolgyűrű védésére szolgáló védőcsoport, például nitrocsoport, p-toluol-szulfonilcsoport, tritilcsoport, benziloxikarbonilcsoport, adamantiloxi-karbonilcsoport, benziloxi-karbonilcsoport vagy tercier-butoxi-karbonilcsoport, továbbá a tirozin védőcsoportja, például X4 csoport, Xs jelentése lehet hidrogénatom is, ami azt jelenti, hogy az oldallánc atomjai nem viselnek védőcsoportot. Általában előnyösen p-toluol-szulfonilcsoportot használunk. A köztitermékek fenti általános képletében X6 jelentése hidrogénatom, a tirozin védőcsoportja, például X4 csoport vagy a cisztein védőcsoportja, például előnyösen pmetoxi-benzilcsoport, p-mctil-benzilcsoport, acctamido-metilcsoport, tritil-csoport vagy benzilcsoport. Legelőnyösebben p-metoxi-bcnzilcsoportot használunk. A köztitermékek fenti általános képletében X7 jelentése Gly-NH-(gyanta) vagy D-Ala-NH(gyanla) általános képletű csoport, vagy pedig lehet a glicin vagy a D- alanin amidja. Az oldalláncokban szereplő reakcióképes csoportok védésére szolgáló X2 —X6 védőcsoportokat úgy kell megválasztanunk, hogy e védőcsoportok a szintézis egyes lépéseiben az alfa-aminocsoport védőcsoportjának lehasítása során alkalmazott reakciókörülmények és reagensek hatására ne hasadjanak le. Szükséges továbbá, hogy e védőcsoportok a kapcsolási reakció körülményei között ne hasadjanak le, valamint, hogy a kívánt peptidlánc felépítése után a védőcsoportokat olyan körülmények között lehessen lehasítani, amelyek nem változtatják meg a pepiidláncot. Ha X7 jelentése Gly-NH-(gyanta) vagy D-Ala-NH(gyanta) általános képletű csoport, akkor ez azt jelenti, hogy a glicint vagy D-alanint egy amidkötés kapcsolja a metil-benzhidril-amin típusú vagy benzhidril-amin típusú gyantához. Ha a végtermékben X jelentése például acetilcsoport, akkor e csoportot alkalmazhatjuk a D-(naftil)alanin vagy a peptidlánc 1-es helyzetében levő bármely más aminosav alfa-aminocsoportja X1 védőcsoportjaként, oly módon, hogy először ezt az acilcsoportot hozzákapcsoljuk az aminosavhoz, majd ezután az így acilezctt aminosavat utolsóként kapcsoljuk a peptidlánchoz. Ezt az acilczési reakciót azonban előnyösen a gyantához kötött peptiddcl végezzük el (miután az alfa-aminocsoport védőcsoportját eltávolítottuk, és eközben az oldalláncokban szereplő funkciós csoportok továbbra is védett állapotban maradnak), például oly módon, hogy a gyantához kötött pcptidláncot dlciklohcxii-karbodiimid jelenlétében ecetsavval vagy előnyösen ccetsav-anhidriddel reagál tatjuk, vagy pedig valamely más, önmagában ismert reakció útján. Egy klór-metilezett gyantáról a hozzákapcsolt, teljesen védett pepiidet önmagában ismert módon, ainmonoiízisscl hasíthatjuk le. és így a teljesen védett amid-köztitermékhez jutunk. A peptid védőcsoportjainak eltávolítását, valamint egy benzhidrilamin típusú gyantáról való lehasítását 0 °C hőmérsékleten fluor-hidrogénsavval végezhetjük. A fluór-hidrogénsavval végzett kezelés előtt a pepiidhez előnyösen anizolt adunk. A reakció lejátszódása után a fiuorhidrogénsavat csökkentett nyomáson ledcsztilláljuk, a lehasított, és védőcsoportokai már nem viselő pepiidet célszerűen dietíl-étcncl kezeljük, az oldószert leöntjük, majd a terméket feloldjuk híg ecetsavban, és az oldatot fagyasztva szárítjuk. 5 0 15 20 25 .30 35 40 45 50 55 00 55 4
