198069. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-(fenil-acetamido)- és 6(fenoxi-acetamido)-2,2-dimetil-penem-3-karbonsav-káliumsó előállítására fermentlevek extraktumaiból
1 2 hozzá az ecetsavat, majd a kálium-acetátot. Találmányunk szerint tehát úgy járunk el, hogy az aktív szénnel derített extrakturnhoz közvetlenül vagy az extraktumnak víz-alifás alkohol elcggyel történő mosása, a fázisok szétválasztása és az. oldószeres fázis aktív szenes derítése után - acetsavat adagolunk, majd kálium-acetáttal vagy annak alkoholos és/vagy vizes oldatával leválasztjuk a megfelelő penici Ilin-káliumsót . Tapasztalataink szerint ecetsav jelenlétében csökken a kristálygóc képződés sebessége, aminek következtében nagyobb szemcseméretű kristályok képződnek. Méréseink szerint a kristályméret növekedése az ecetsavtartalomtól függően 5 20-szoros mértékű is lehet, Az így keletkezett nagyobb méretű kristályok fajlagos felülete kisebb, ezért felületükön kevesebb szennyezést adszorbeálnak, mint a kisebb méretűek. Ugyanakkor a lassú kristálynövekedés megakadályozza az oldószerzárványok képződését is. Az ecetsav mennyiségének növelése azonban nemcsak a kristálygóc képződés sebességét befolyásolja, hanem hatással van a penicillinsav penicillin-káliumsó reakció konverziófokára is. Kísérleteink során a kihozatal és a termék minősége szempontjából az extraktuni térfogatára számított 1,5 t"-nyi ecetsav alkalmazását találtuk optimálisnak. A találmány szerinti eljárással előállított termék könnyen és gyorsan szűrhető, mosásához kevés oldószer szükséges. Ugyanakkor a terméket szennyező anyagok mennyisége minimálisra csökken,javul a termék színe. Különösen kedvező az ecetsav jelenléte szüretien fermentlevek extraktumaibó! végzett leválasztás során, mivel a ballasztanyagok vizes fázisba történő átoldódása mellett, a zsírsav - zsírsav-káliumsó reakció egyensúlya is eltolódik a sóképzéssel ellentétes irányba. Ily módon a zsírsavak az oldószeres fázisban maradnak és nem szennyezik a terméket. Találmányunk szerint a G- vagy V-penicillin tartalmú fermentlevet a micéliuin kiszűrése nélkül vagy a micélium kiszűrése után, alkalmas emulziótörő jelenlétében megfelelő gépi berendezésen alifás ecetsav-észterrel, pl. butil-acetáttal, etil-acetáttal, mctil-izobutil-kctonnal stb. extraháljuk. Az extraktumból a termék leválasztását kétféle módon végezhetjük el: a. ) Az extraktumot 0,3 t% aktív szénnel derítjük. A derített extrakturnhoz keverés közben 0,l 5,0 t%, előnyösen 1,5 t% mennyiségű ecetsavat, majd 2 tf% mennyiségű 1-4 szénatomszámú alifás alkoholt, pl. etanolt, 1-butanolt stb., és 5 tf% mennyiségű 65 t% szárazanyagot tartalmazó vizes káiium-acetát oldatot vagy 20 g/üter mennyiségű szilárd kálium-acetátot adagolunk egyszerre vagy részletekben. b. ) Az extraktumot először 10- 30 tf% (célszerűen 20 tf%) mennyiségű, 20 -80 tf%, előnyösen 50 tf% mennyiségű vizet tartalmazó 1 -4 szénatomszámú alifás alkohollal pl. ctanol, butanol stb. kevertetjük. A fázisok elválasztása után az oldószeres fázisra számított 0,3 tf% aktív szénnel derítjük. A derített extrakturnhoz keverés közben 0,5-5,0 tí% előnyösen 1,5 tf% mennyiségű ecetsavat, majd 4 tf% mennyiségű, 75 tiVe szárazanyagot tartalmazó vizes kálium•acetát oldatot, vagy az extraktum összpenicillin tartalmára számított kétszeres sztöchiometrikus mennyiségű szilárd kálium-acetátot adagolunk. 15-45 perc, múlva a kivált terméket megfelelő szűrőberendezésen kiszűrjük. A kiszűrt G- vagy V-penicillin-káliumsó kristályokat keverős készülékben, a termék tömegére számított 0,5 - 5-szőrös térfogatú 1 4 szénatomszámú alfiás alkohollá!, pl. etanollal, izobutanollal stb., vagy ketonnal pl. acetonnal ill. ennek elegyéve! felszuszpenádljuk, majd a kristályokat kiszűijük. A szuszpendálást a termék tisztaságától függően egyszer vagy többször megismételjük, majd a terméket megszárítjuk. Találmányunkat az alábbi példákban részletezzük, anélkül, hogy oltalmi igényünket azokra korlátoznánk. 1. példa G-penicillin tartalmú fermentlé izobutil-acetátos közvetlen extrakciójával kapott 500 cm3 extraktumhoz, melynek HPLC-s hatóanyag tartalma 44.600 NE/cm3, 1,5 g aktív szenet adunk, majd 5 perc kevertetés után a szenet kiszűrjük. A derített extrakturnhoz kevertetés közben hozzáadunk 7,5 cm3 tömény ecetsavat, majd 35 cm3 kicsapó elegyet, mely utóbbi 2 tfrész etanolból és 5 tfrész 65 t%-os káiium-acetát vizes oldatából áll. 30 perc kevertetés után a kivált fehér terméket vákuumszűrőn szűrjük. A 23,2 g nedves terméket először 30.2 cm3 majd 27,8 cnr vízmentes alkoholjai {elszuszpendálva mossuk, majd vákuumban 45 °C-bn szárítjuk. 13.2 g G-penicillin-káliumsót kapunk, összpcnicillin-káliumsó tartalom (jodometria): 99,8% G-penicillin-káliumsó tartalom (HPL.C): 86,3% Szín (Ph.HG.VI): 7, [aj2 = *290" (c = 0,5, víz) Kihozatal az extraktum G-penicillin tartalmára számít va: 91,! % 2. példa G-penicillin tartalmú fermentlé izobutil-acetátos közvetlen extrakciójával nyert 5 liter extraktumot, melynek HPLC-s hatóanyagtartalma 39.250 NE/cm3, 1 liter etanol-víz 1:1 arányú elegyéve! 15 percig kevertetjük, majd a fázisokat elválasztjuk. Az oldószeres fázishoz 16,5 g aktív szenet, adunk és 5 perc kevertetés után a szenet kiszűrjük. A mosott és derített extrakturnhoz. kevertetés közben 75 cm3 tömény ecetsavat és 200 cm3 75 t%-os káiium-acetát vizes oldatát adagoljuk. 30 perc kevertetés után a kivált fehér kristályokat leszűrjük. A 201,5 g nedves terméket 262 cm3 vízmentes etanollal mossuk, majd 242 ml vízmentes etanollal a mosást megismételjük. A terméket vákuum szárítószekrényben 45 °C-on szárítjuk. 117,45 g G-penicillin-káliumsót kapunk, összpenicillin-káliumsó tartalom (jodometria): 99,6% G-penicillin-káliumsó tartalom (HPLC): 96,2% Szín (Ph.Hg.VI.):Z, [a|2Q = +289° (c = 0,5, víz) Kihozatal az extraktum G-penicillin tartalmára számítva 92,0%. 3. példa G-penicillin tartalmú fermentlé izobutil-acetátos közvetlen extrakciójával nyert 1000 cm3 extraktumot, melynek HPLC-s hatóanyagtartalma 49.450 NE/cm3 az 1. példa tömény ecetsavat, majd 16,3 g szilárd kálium-acetátot adagolunk be. 30 perc kevertetés után a kivált terméket vákuum szűrőn szűrjük. 98.067 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
