198040. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kondenzált policiklusos imidszármazékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 2 Az eredmények mutatják, hogy a fenti vizsgálati módszer alkalmazása során a találmány szerinti vegyületek orális adagolással jelentős hatást fejtettek ki. 33. példa A találmány szerinti vegyületek feltételezett antipszichotikus hatásának a megállapítására egy másik kondicionált elhárítás vizsgálatot is alkalmaztunk: ez a polcra-ugrási válasz (shelf-jump response). Ezt a vizsgálatot a következőképpen végeztük. Körülbelül 400 450 g testtömegű hím Charles Kiver (CD) patkányokat alkalmaztunk előzetes trenirozás után. A patkányokat két részre osztott, plexiüvegből készült kísérleti kamrákba helyeztük :az alapkamra mérete: 10,5 ’ x 6,75” alapterület 7/8” magassággal, és e felett vagy egy másik kamra vagy egy polc (mérete: 5 7/8 x 6 7/8 x 5,75”). Egy motorral elmozdítható fal szabályozza, hogy a patkány a kísérlet bármely időpontjában elérheti-e a polcot. A kísérleti kamrát hangjelzéssel szereltük fel, és természetes fényt alkalmaztunk. Az alapkamra padlózatát acélrácsból készítettük az elektromos áramütés közvetítésére. Minden egyes próbát úgy végeztünk, hogy 15 másodpercen át figyelmeztető hangjelzést adtunk (ez a kondicionáló stimulus), majd a hangjelzést 15 másodpercen át tartó elektromos áramütéssel (ez a nem-kondicionált stimulus) együttesen folytattuk. Elhárítási válasznak (az állat a felső kamra kiemelkedő polcára ugrik) tekintettük a kezdő 15 másodperces figyelmeztető hangjelzés során adott választ, viszont az áramütés során adott választ menekülési válaszként értékeltük. A próbákat időrend szerint I perces időközökkel végeztük, minden egyes kísérleti periódus 36 próbából állt. Az állatokat hetente kétszer ellenőrző periódusoknak vetettük alá, minden esetben hatóanyaggal történő vizsgálat előtt, és az ellenőr, és és a kísérlet között legalább egy nap telt el. A vegyületeket az előkezelés megfelelő időpontjaiban több dózisszinten, dózisszintenként legalább 5 patkánynak i.p. vagy p.o. úton adagoltuk. A következő kísérleti paramétereket tápláltuk számítógépbe: (1) az elhárítási válaszok számát, (2) a menekülési választok számát, és (3) azoknak a próbáknak a számát, amelyek során nem kaptunk választ. Ezeket az adatokat használtuk fel arra, hogy az előzőleg meghatározott kontrollértékektől való különbségek százalékos értékét kiszámítsuk, s ezt a vizuális szemléltetés céljából grafikusan ábrázoltuk. A válaszok számát egy adott dózisszinten az összes állategyedek esetében összegeztük. Minden egyes dózisszint esetében meghatároztuk azoknak a próbáknak a számát, amelyek során a patkányok nem adtak elhárítási választ (ez az elhárítás-gátlás, rövidítése AB — avoidance bock). Ezt a számot a próbák összes számának százalékában fejeztük ki. A kontrollállatok teljesítményét önkényesen 100%-os elhárításnak tekintettük, és a legkisebb négyzetek módszerével kapott dózis-hatás regressziós egyenesből állapítottuk meg azt a dózist, amely az elhárítási választ 50%-ban gátolta (ez az ABj o-érték). A feltételezhetően antipszichotlkus hatású vegyületek gátolják (elnyomják) az elhárítási választ, és fokozzák a menekülési választ. Standard Vegyületek esetében a következő eredményeket kaptuk: Standard (összehasonlítá- ABJ0 mg/kg, i.p. si) vegyületek Haloperidol 0,19 klórpromazin 3,69 Kiozapln 6,94 B ispiron 9,94 A találmány szerinti vegyületek ugyanilyen módszerre! végzett vizsgálata a 3. táblázatban feltüntetett eredményekhez vezetett. 3. táblázat A vegyületet leíró példa sorszáma Az alábbi mg/kg mennyiségben hatásos I 40 fi.p.)x 2 40 (i.p.) 3 40 (i.p.) 4 40 (i.p.) 5 40 (i.p.) 6 40 (i.p.) 7 40 (i.p.) 8 40 (i.p.) 9 40 (i.p.) 10 40 (i.p.) ll 40 (i.p.) 12 40 (i.p.) 13 40 (i.p.) 14 40 (i.p.) 15 40 (i.p.) 16 40 (i.p.) 17 40 (i.p.) 18 40 (i.p.) 19 40 (i.p.) 20 40 (i.p.) 21 40 (i.p.) 22 40 (i.p.) 23 40 (i.p.) 24 40 (i.p.) 25 40 (i.p.) 26 40 (i.p.) 27 40 (i.p.) 28 40 (i.p.) 29 40 (i.p.) 30 40 (i.p.) > (i.p.) = intraperitoneálisan adagolt hatóanyag Az eredmények azt mutatják, hogy a találmány szerinti vegyületek e vizsgálatban i.p. adagolással hatásosak. 34. példa Az 5-HT-1A szerotonin-receptorhoz való kötődése ex vivo kísérletben mért gátlását alkalmaztuk annak eldöntésére, hogy a vizsgálati vegyületek képesek-e áthatolni a vér-agy-gáton, és befolyásolják-e a kérdéses receptort, ami a busplron-szerű szorongásoldó hatás jele. E vizsgálatot a következőképpen végeztük. Több patkánycsoportnak (csoportonként 4-6 állatnak) fecskendeztük be a vizsgálati vegyületet vagy a megfelelő vivőanyagot, majd 30 perc elteltével — 198.040 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 9
