198019. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dihidropiridin-származékok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 2 198 019 dául az alább leírt módszerekkel alakíthatjuk gyógyászati alkalmazásra szolgáló készítményekké: a) Intravénás injekció-oldat Hatóanyag 0,01 g propilén-glikol 20,0 g polietilén-glikol 400 20,0 g tween 80 1,0 g 0,9%-os nátrium-klorid-oldat qs. 100,0 ml A hatóanyagot feloldjuk a propilén-glikol, poli etilén-glikol és tween 80 elegyében. Az oldathoz hozzáadjuk a szükséges mennyiségű 0,9%-os nátrium-klorid-oldatot, keverés után a kapott 100 ml oldatot 0,2 mikronos membránszűrőn keresztül leszűrjük és steril körülmények között csomagoljuk. b) Tabletták előállítása Hatóanyag 5,0 súlyrész magnézium-sztearát 0,75 súlyrcsz keményítő 0,75 súlyrész tejcukor _ 29,0 súlyrész polivinil-pirrolidon 0,75 súlyrész. A fenti anyagokat összekeverjük és a por keveréket metanol oldószerként való alkalmazásával granulál juk. A kapott szemcséket megszárítjuk és megfelelő tablettázógéppel tablettánként 2 mg hatóanyagot tartalmazó tablettákká sajtoljuk. 4. példa Aktivitás-vizsgálat spontán hipertenziós patkányon 24 előzetesen gyakoroltatott felnőtt hím spontán hipertenziós patkányt 6 csoportba osztottunk (csoportonként 4 állat), oly módon, hogy az. egyes csoportokba megközelítőleg egyenlő átlagos szisztolés vémyomású patkányok kerüljenek. A 6 csoportot azután párhuzamosan vizsgáltuk 2 napon át tartó szkrin-eljárással. A vizsgálandó vegyületeket találomra osztottuk szét az egyes csoportokhoz. 5 csoport állatai feltételezett antihipertenzív hatóanyagokat, 1 csoport állatai pedig csupán vivőanyagot (víz és tween) kaptak. A szerek adagolásának megkezdése előtt körülbelül 17 órával a táplálékot eltávolítottuk a patkányok ketreceiből. Az első kísérleti nap reggelén egy 4 patkányból álló csoport állatait orális úton, gyomorszonda útján 12,5 mg/kg, illetőleg 25 mg/kg (1) általános képletű vegyülettel kezeltük, 2-3 csepp tween 5 10 15 20 25 30 35 40 80-at tartalmazó vízzel készített oldat vagy szuszpenzió alakjában, az oldatot, illetőleg szuszpenziót homogenizáló segítségével készítettük olyan koncentrációban, hogy az állatok 10 g testsúlyra számítva 0,1 ml térfogatot kapjanak. A beadás után 4,5 órával a táplálékot visszahelyeztük a ketrecekbe és a patkányokat 2,5 óra hosszat hagytuk enni, majd ismét eltávolítottuk a táplálékot. A második kísérleti nap reggelén az állatokat ismét orálisan kezeltük a fent leírt módon Közvetlenül a kezelés után az állatokat a szabad mozgást gátló ketrecekbe helyeztük és 4 óra hosszat egy 30±1,0 °C hőmérsékletre melegített kamrában tartottuk őket. Ezután az állatok normális táplálását tovább folytattuk a vizsgálatnak a 2. nap végén történt befejezéséig. A szisztolés vérnyomást (vagyis az első pulzis megjelenésénél mért vérnyomást) fotoelektromos berendezéssel regisztráltuk 3 patkány farkcsonti artériáját egyidejűleg elzártuk egy pumpával felfújható farok gallér segítségével, amelyet automatikusan fúvattunk fel 40 kPa-ig, majd a nyomást ismét leeresztettük A nyomás-gorbéí és a farok-érverést egyidejűleg figyeltük egy MFE regisztrálókészülék segítségével. Mindegyik patkánynál 4 egymásutáni megfigyelést végeztünk, 30 másodperces időközökkel, 1, 2, 3 és 4 órával a hatóanyag beadása után. A további csoportok állatait ugyanilyen módon vizsgáltuk. Minden egyes vizsgálatnál kiszámítottuk minden patkány átlagos szisztolés vérnyomását. Az egyes adagolási csoportok szisztolés vérnyomás-átlagát öszszchasonlítottuk a csupán vivőanyaggal kezelt kontroli-csoportbeli állatokéval, mindegyik megfigyelési időpontban, egyirányú variancia analízis alkalmazásával. Szignifikáns antihipertenzív aktivitásúnak azokat a vegyületeket tekintettük, amelyeknél bármelyik megfigyelési időpontban p < 0,05 értéket kaptunk További vizsgálati érdemeseknek azokat a vegyületeket tekintettük, amelyek a kontroll-ért ékekhez képest legalább 2,66 kPa vérnyomáscsökkenést okoztak mind a négy megfigyelési időpontban. Ezekben az esetekben meghatároztuk a szívfrekvenciát és annak a kontroli-értékekkel szembeni változását is. A vérnyomást mindkét kísérleti napon 1,2, 3 és 4 órával a kezelés után mértük A találmány szerinti eljárással előállított és a fent leírt módon vizsgált valamennyi vegyület számottevő antihipertenzív (vérnyomáscsökkentő) aktivitást mutatott, amint ez. az. alábbi 1. táblázat adataiból látható. 1. táblázat Az (1) általános képletű vegyületek vérnyomás csökkentő aktivitása patkányon Az (1) általános képletben Vérnyomásosokéi Y R* Rs n mg/kg kenés, % 12 3 4 órával a kezelés után CH(CH2 OH^ O nr-NOj CH3 1 12,5 39 27 25 18 (CH2)2 OH (HCl-só) NH m-N02 CH, 2 12,5 38 26 31 25-CH2-CH(OH)-CH2OH O m-N02 CH2 2 10 41 16 27 26 13
