197940. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fehérje-termékek előállítására transzformált baktériumok segítségével
197940 19 1. táblázat 20 Beoltás után eltelt idő A42o mg/nl sejtfehérje Mg/ml ltb Összes LT az B összes sejtfehérj e %-aban 4 óra üledékben 0,58 0,734 0,41 4 óra felülúszóban 6 óra üledék-0,06 0,07 % ben 1,1 6 óra felülúszóban 1,8 1,19 0, 11 0,1% 43°C-ra 8 óra üledék. .. . / /t torteno ben 4,8 1,24 3,9 átvaltas 8 óra felülúszoban 10 óra üledék-0,29 0,3% ben 6,2 0,646 1,2 10 óra felülni szóban 10,6 óra üle-14,8 2,55 % dékben 5,0 10,6 óra fe-0,652 1,8 lülúszóban 14 óra üledeác-39,38 6,3% ben 14 óra felül-1,8 úszóban 4,2 0,652 53,83 8,5% SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás hőmérsékletérzékeny baktériumok előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely baktériumtörzset olyan DNS fragmens. sei transzformálunk, amely a következő elemeket tartalmazza: i) szelektáló marker, ii) olyan lambda profág DNS szekvencia, amely egy hőmérsékletérzékeny cl represszor gént és funkcionális lizozim-kódoló géneket tartalmaz úgy, hogy a lizozim-kódoló géneket permisszív hőmérsékleti körülmények között gátolva vannak, míg restriktiv hőmérsékleti körülmények között kifejeződnek, és funkcionális N, Q, S és R géneket is tartalmaz, és amelyből a kromoszómatérkép 3. és 71. helyei közötti, de legalább az 58. és 71. helyei közötti gének delécióval kiestek, és az O és P génekben történt mutációk következtében az O és P génfunkciókat elvesztette, és iíi) a fragmens és gazdasejt kromoszómája között rekombinációt lehetővé tevő, a baktérium gazdasejt kromoszómájában közvetlenül szomszédos szekvenciával homológ, szomszédos DNS szekvenciák. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan DNS fragmenst alkalmazunk, amely cl génként cI857 gént, O és P mutánsként 029 és P3 mutánst és szelektálható markerként tnlO átvihető tetraciklint rezisztencia elemet tartalmaz. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal 50 jellemezve, hogy olyan lambda profág DNS fragmenst alkalmazunk, amelyből a kromoszómatérkép 3. és 71. helyei közötti gének delécióval kiestek. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike sze- 55 rinti eljárás, azzal jellemezve, hogy baktériumként valamely E. coli törzset alkalmazunk. 5. Eljárás valamely fehérjetermék előállítására baktérium segítségével, azzal jellemezve, hogy valamely, az 1. igénypont szerinti eljárással előállított hőmérsékletérzékeny baktériumtörzset, amely a tárgyi kör szerinti fehérje-terméket intracellulárisan fejezi ki, és a profág DNS-szekvencián belül egv hőmérsékletérzékeny fág represszor gént 65 és funkcionális lizozim-kódoló fág géneket 11
