197915. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorgátló hatású új BBM-1675 C és D antibiotikum és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
7 197915 8 A BBM-1675D fizikai-kémiai tulajdonságai Megjelenés: amorf szilárd anyag Ultraibolya abszorpciós spektrum:lásd2.ábra eszköz: Hawlett-Packard 8458 oldószer: metanol koncentráció: max.(nm) 214 274 325 0,01 g/1 abszorpciók 27 000 12 800 5 400 5 10 Sav vagy bázis hatására nincs szignifikáns változás: Infravörös abszorpciós spektrum:lásd4.ábra eszközök: Nicolet 5DX FT-IR Fő abszorpciós sávok (KBr, film): 735, 755, 910, 960, 1000, 1020, 1085, 1150, 1195, 1250, 1310, 1335, 1365, 1385, 1445, 1510, 1685, 1720, 1735, 2880, 2930, 2960, 3400 cm-' Tömegspektrum: lásd 6. ábra eszköz: Finigan 4500 TSQ módszer: gyors atom bombázás (FAB) ionizáció mátrix: molekuláris ion (m/z): relatív abundancia: eszköz: nagy feloldású FAB (m/z): [M+H] +=696,2794 molekulatömeg: vélhetően m.s. = 695 (a fenti tömegspektrum adatokra alapozva) Elemösszetétel: C29H49N30|2S2 (a fenti nagy feloldású adatára alapozva) tioglicerol [M+H]+=696 100% Kratos MS-50 15 20 25 30 Az [M+H] + és [(M+H)+2] + relatív 35 abudanciák korrelációja számított értékükkel igazolja a nagy feloldású-FAB mérésekből kapott elem-összetételt. Proton mágneses rezonancia spektrum: lásd 8. ábra 40 eszköz: WM 360 Bruker oldószer: CDC13+10% CD3OD 'H NMR 360 MHz 6 (ppm): 6,43 (1H, dd, J=4,4, 10,3); 6,13 (1H, s); 5,81 (1H, d, J= =8,8); 5,70 (1H, d, J=8,8); 5,48 (1H, 6 brs); 4,48 (1H, d, J=8,1); 4,02 (1H, d, J=2,0); 3,95—3,80 (oldószer háttér); 3,77 (1H, t, J=9,0); 3,70—3,40 (11H, brm); 3,35 (1H, m); 3,28 (3H, s); 3,22 (3H, brs); 2,66—2,55 (2H, m); 2,38 (3H, s); 2,23—2,12 (2H, m); 1,42 (1H, brdt); 1,22 (3H, d, J=5,9); 0,94 (3H, d, J=6,6); 0,87 (3H, d, J=5,9). 13C mágneses rezonancia spektrum: lásd 10A és 10B ábrák eszköz: WM 360 Bruker oldószer: CDCI3+10% CD3OD ,3C NMR 90,6 MHz ő (ppm): 17,5, 21,6, 22.2, 23,0, 33,4, 39,2, 46,4, 52,3, 55,8, 62,1, 67.8, 69,8, 70,1, 71,3, 75,8, 77,1, 78,1, 82,4, 83.3, 88,2, 97,4, 99,6, 122,6, 124,8, 130,1, 130.8, 134,3, 148,7, 192,8. A BBM-1675 anyagok biológiai tulajdonságai A BBM-1675 anyagok antimikrobiális hatását számos Gram-pozitív és Gram-negatív mikroorganizmussal szemben vizsgáltuk. Az I. táblázat egy olyan antimikrobiális szűrő eljárás eredményeit mutatja, amelyben a kiindulási BBM-1675A, komponens és a találmány szerinti BBM-1675C és BBM-1675D anyagok hatását vizsgáltuk. A vizsgálati eljárás során minden vizsgált anyag egységesen 10 pg/ml koncentrációjú oldatával átitattunk egy papír csíkot, majd ezt a növesztett tenyészetbe helyeztük, és az antibiotikus aktivitás mértékéül a papír csíkon megfigyelt gátlási zónát választottuk. Mint az I. táblázat adataiból látható, a BBM-1675C és D széles spektrumú antimikrobiális hatást mutatott, amely mértékében legalább megegyezett a BBM-1675A, komponens hatásával: sőt a BBM-1675C és D anyagok hatékonyabbnak bizonyultak a Gram-negatív mikroorganizmusok inhibitoraiként. I. táblázat Vizsgált mikroorganizmus a gátlás zónája (mm) BBM-1675Ai BBM-1675C BBM-1675D Escherichia col i AS 19 22 52 51 Escherichia col i K 12 13 36 35 Escherichia col i P 1373 12 34 33 Escherichia col i R Azaserine 14 35 34 Escherichia col i R Netropsin 1 1 32 32 Escherichia col i R Mitomycin C 12 35 34 Escherichia coli R Bleomycin 16 38 36 Escherichia col i R Daunomycin 19 45 44 Escherichia coli R Neomycin 24 53 52 Escherichia col i RSibiromycin 14 32 30 Escherichia col i R Hedamycin 14 30 25 Escherichia col i R. Aclacinomycin 15 41 40 Bacillus subtilis ATCC 6633 34 43 41 Klebsiella pneumoniae 17 35 35 5
