197915. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorgátló hatású új BBM-1675 C és D antibiotikum és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
A találmány tárgya eljárás új BBM-1675C és D tumor-ellenes antibiotikumok előállítására. A találmány szerinti antibiotikumok pontos szerkezetét eddig még nem határoztuk meg, egyedülálló fizikai, kémiai és biológiai tulajdonságaik alapján azonban úgy véljük, hogy a BBM-1675C és BBM-1675D antibiotikumok új anyagok. Az 1984. december 19-én közrebocsátott, 2 141 425 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás szerint az Actinomadura verrucosospora H964-92 (ATCC 39334) vagy az Actinomadura verrucosospora Á1327Y (ATCC 39638) mikroorganizmus törzs feYmentációja egy új tumor-ellenes antibiotikum komplexet eredményez, melyet BBM-1675-ként jelöltek. A BBM-1675-nek két, az említett szabadalmi bejelentésben leírt biológiailag aktív komponensét BBM-1675A,-nek és BBM-1675A2- nek nevezték. A másnéven esperamicin A,-ként illetve esperamicin A2-ként is ismert BBM-1675A, és BBM-1675A2 antibiotikumok szerkezetét még nem derítették fel, de mindkét komponens kiváló antimikrobális és tumorellenes hatást mutat. A 4 530 835 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás egy WP-44 jelű (ATCC 39363), Actinomyces-fajként nem azonosított Actinomycete izolátum fermentá cióját ismerteti, melynek során a CL-1577A és CL-I577B jelű tumor-ellenes antibiotikumok keletkeztek. A CL-1577 antibiotikumok szerkezete egyelőre ugyancsak ismeretlen, de jellemző tulajdonságaik arra utalnak, hogy szerkezetileg a CL-1577A és CL-1577B antibiotikumok hasonlóak a BBM-1675 antibiotikumokhoz, különösen a fentemlített, a 2 141 425. számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban szereplő BBM-1675A, és A2 antibiotikumokhoz. R.H. Bunge és munkatársai a J. Antibiotics, 37(12), 1566-1571 (1984) folyóiratban megjelent cikke az Actinomadura sp. (ATCC 39363) fermentációjával foglalkozik, mely két nagyobb komponenst, a PD 114 759 és a PD 115 028 komponenseket, eredményezte. A.J. Chem. Soc. Chem. Commun. 919—920 (1985) folyóiratban Wilton és munkatársai részben azonosították a PD 114 759 és a PD 155 028 antibiotikumok szerkezetét. A PD 114 759 és PD 115 028 antibiotikumok termelése, izolálása és jellemzői azonosnak tűnnek a fent említett CL-1577A, illetve CL-1577B antibiotikumok megfelelő paramétereivel. A 95 154 számon közrebocsátott európai szabalmi bejelentés szerint Actinomadura pulveraceus sp. nov. No.6049 (ATCC 39100) fermentációja a WS 6049-A és WS 6049-B jelű tumor-ellenes antibiotikumok keletkezéséhez vezet. A WS 6049 antibiotikumok szerkezetét még nem derítették fel, de megadott jellemző tulajdonságaik azt mutatják, hogy a WS 6049-A és WS 6049-B szerkezetileg rokon a 2 141 425 számú nagy-britanniai szabadalmi bejelentésben szereplő BBM-1675 1 2 antibiotikumokkal és a 4 530 835 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett CL-1577 antibiotikumokkal. A spektrális adatok azonban azt is világosan mutatják, hogy sem a WS 6049-A sem a WS 6049-B nem azonos egyik BBM-1675 komponenssel sem. Ezen kívül, a 95 154 számú európai szabadalmi bejelentésben szereplő termelő mikroorganizmus egyértelműen eltér a 2 141 425 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban használt Actinomadura verrucosospora mikroorganizmustól, a 2., 3. és 4. számú ISP táptalajokon nőtt légmicélium színében, pozitív tej peptonizációjában és pozitív D-fruktóz, D-mannit, trehalóz és cellulóz hasznosításában. A találmány olyan új tumor-ellenes, BBM-1675C-nek és BBM-1675D-nek (vagy másnéven BMY-27305-nek és BMY-27307- nek) nevezett antibiotikumok előállítására vonatkozik, amelyek a BBM-1675A, (esperamicin A,) vagy a BBM-1675A2 (esperamicin A2) szelektív kémiai hidrolízisével keletkeznek, míg az utóbbiakat az Actinomadura verrucosospora egy BBM-1675 termelő törzse termeli. A BBM-1675C és BBM-1675D bioaktiv anyagok, szokásos kromatográfiás eljárásokkal különíthetők el és tisztíthatok, és mindkét anyag kiváló antimikrobiális és tumor-ellenes hatást mutat. Rájzismertetés 1. ábra: a BBM-1675C ultraibolya abszorpciós spektruma 2. ábra: a BBM-1675D ultraibolya abszorpciós spektruma 3. ábra: a BBM-1675C infravörös abszorpciós spektruma (KBr, film) 4. ábra: a BBM-1675D infravörös abszorpciós spektruma (film) 5. ábra: a BBM-1675C relatív eloszlási tömegspektruma 5. ábra: a BBM-1675D relatív eloszlási tömegspektruma 7. ábra: a BBM-1675C CDC13 - ban (360 MHz) felvett proton mágneses rezonancia spektruma 8. ábra: a BBM - 1675D CDC13 -ben (360 MHz) felvett proton mágneses rezonancia spektruma 9. ábra: a BBM-1675C CDC1S - ban (90,6 MHz) felvett ,3C mágneses rezonancia spektruma 10a. ábra: a BBM-1675D CDC13 + 10% CD3OD-ben (90,6 MHz) felvett 13C mágneses rezonancia spektruma (110—200 ppm) 10b. ábra: a BBM-1675D CDC13 + 10% CD3OD (90,6 MHz) felvett I3C mágneses rezonancia spektruma (0—110 ppm) íla. á6ra: a 3A vegyület (alfa-anomer) proton mágneses rezonancia spektruma CDCl3-ban (360 MHz) Slb. ábra: a 3B vegyület (béta-anomer) proton mágneses rezonancia spektruma CDCl3-ban (360 MHz). 19791 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
