197904. lajstromszámú szabadalom • Eljárás karbapeném antibiotikumok előállítására
zist elválasztottuk és vákuumban bepároltuk. A kapott oldatot fordított fázisú (C,g Bonda- Pak) oszlopra vittük fel, és az oszlopot vízzel eluáltuk. A megfelelő frakciók liofilizálásával 1,2 g sárga, szilárd anyagot kaptunk. Ezt ismét kromatografáltuk, az elúciót vízzel, majd 4%-ig megnövelt ecetonitril-tartalmú vízzel végezve. Liofilizálás után 0,250 g (28%) tiszta cirri szerinti vegyületet kaptunk sárga, szilárd anyag alakjában. ‘HMMR spektrum (deutériumoxid) delta-értékck’ 8,53 (szingulett, 1H), 8,49, 7,81 (AB kvartett, J = 6,2 Hz, 2H), 4,38—3,98 (multiple», 4H), 4,27 (szingulett, 3H), 3,49—3,18 (multiple», 2H), 2,51 (szingulett, 3H), 1,25 (düble», J = = 6,7 Hz, 3H), 1,16 (düble», J = 7,6 Hz, 3H). Infravörös spektrum (káliumbromid pasztilla): 1750, 1595 cm-1. Ultraibolya spektrum (foszfát puffer, pH = = 7): ^moi = 292 nm (e = 7930 nm). 2. példa (5R,6S)-3- [(l,6-dimetil-piridínium-2-il)-metiltio] -6- [I- (R)-hidroxi-etil] -4R-metil-7-oxo-1 -azabiciklo [3.2.0] hept-2-én-2-karboxilát — (XXIV) képletü vegyület A. (1,6-Dimetil-piridínium-2-il)-metiltiol- (trifluor-metán-szulfonát) -só (Az eljárást a H. reakcióvázlat mutatja be). 1,0 g (5,52 mmól) (6-meti!-piridin-2-i!)metiltio-acetát 5 m! vízmentes éterrel készült, nitrogén atmoszférában tartott oldatát 0,74 ml (6,5 mmól) trifluor-metán szulfonsav-metilészterrel kezeltük és a reakcióelegyet 23°C-on kevertük 4 órán át. Az étert dekantáltuk, a fehér, szilárd anyagot 2 ml éterrel kétszer mostuk, és 15 ml (90,0 mmól) 6n sósav-oldatban oldottuk. A kapott oldatot 4 órán át 70°C-on tartottuk nitrogén atmoszférában, majd csökkentett nyomáson bepároltuk. A visszamaradó sárga, szirupszerű anyagból a sósav nyomait 2x10 ml vízzel iörténő desztillálással távolítottuk el, a nyers terméket 2,2X 13,0 cm méretű, fordított fázisú oszlopon (PrepPak C-18) történő kromatografálással távolítottuk el, eluáló oldószerként vizet használva. A megfelelő frakciókat egyesítettük és liofilizáltuk. Ilyen módon 1,43 g (85,4%) cím szerinti vegyületet kaptunk fehér por alakjában. Infravörös spektrum (káliumbromid pasztilla) A-majrértékek: 2565 (SH), 1626 (piridínium), 1585 (piridínium) cm-1 Ultraibolya spektrum (víz): Lax = 278 nm (e = 7355). Analízis a C9H|2N03S2F3 képlet alapján: számított: C 35,64%, H 3,99%, N 4,62%, S 21 14% ■ talált: C 35,49%, H 4,05%, N 4,56%, S 20,99%. B. (5R,6S)-3- [(1,6-Dimetil-piridínium-2-il)-metiltio] -6- [ 1 - (R) - hidroxi-etil] -4R-metii-7- -oxo-1-azabiciklo [3.2.0] hept-2-én-2-karboxilát (Az eljárást az I. reakcióvázlat mutatja be). 15 1,11 g (3,06 mmól) (5R,6S)-3,7-dioxo-6- - [ 1 - (R) -hidroxi-etil] -4RS-metil-l-azabiciklo-[3.2.0] heptán-2R-karbonsav-(p-nitro-benzil)-észter (R)S izomerarány 86(14) 90 ml vízmentes acetonitríllel készült, 5°C hőmérsékletű, nitrogén alatt tartott oldatához 10 perc alatt egyidejűleg hozzáadtunk 0,68 ml (3,3 mmól) klór-foszforsav-difenilésztertés0,57ml (3,3 mmól) diizopropil-etil-amint. -A hideg (5°C hőmérsékletű) elegyet 1 órán át kevertük, —30°C-ra hűtöttük, és 15 perc alatt egyidejűleg hozzáadtuk 1,03 (3,4 mmól) (1,6-dimetil-piridínium-2-il) -metiltiol- (trifuor-metán-szulfonát) -só 2 ml vízmentes acetonitrillel készült oldatát és 0,59 ml (3,4 mmól) diizopropil-etil-amint. A reakcióelegyet —30°C-on kevertük 0,5 órán át, 0°C-ra melegítettük fel és 1 órán át kevertük, majd 35 ml hideg vízzel hígítottuk. A kapott emulziót 2,5x18 cm méretű, fordított fázisú oszlop (PrepPak C-18) tetejére öntöttük, és az oszlopot 25—50% acetonitrilt tartalmazó vízzel eluáltuk. A megfelelő frakciók liofilizálásával 1,69 g ragacsos, sárga, szilárd anyagot kaptunk, amelyet 40 ml nedves tetrahidrofuránban oldottunk. A kapott oldathoz 70 ml étert, 50 ml 0,2 M kálium-dihidrogén-foszfát/nátriumhidroxid puffert (pH= = 7,0) és 1,69 g 10%-os palládium/szén katalizátort adtunk, 2 órán át 23°C-on és 42 psi nyomáson hidrogéneztük, majd Celite szűrési segédanyagon keresztül szűrtük. A két fázist elválasztottuk, a vizes fázist 2x20 ml éterrel mostuk, és nagy vákuumban, 23°C alatti hőmérsékleten 15 ml térfogatra pároltuk be. A maradékot fordított fázisú oszlop (PrepPak C-18) tetejére vittük fel, és 4% acetonitrilt tartalmazó vízzel eluáltuk. A megfelelő frakciók liofilizálásával 0,23 g cím szerinti vegyületet kaptunk, amelyet 24 mól% kálium-nátrium-difenil-foszfáttal kevertünk össze. 2,5X14 cm méretű fordított fázisú oszlopon (PrepPak C -18) tovább tisztítottuk, eluálós^erként 400 ml vizet, majd 200 ml, 10% acetonitrilt tartalmazó vizet használva. A megfelelő frakciók lio-filizálásával 0,17 g (15,3%) cím szerinti vegyületet kaptunk sárga por alakjában. Infravörös spektrum (káliumbromid pasztilla) A.ma;rértékek: 1750 (béta-laktám C=0), 1625 (piridínium), 1600 (karboxilát C=0) cm“1. 'HMMR spektrum (deutériumoxid) delta-értékek: 1,12 (dublett, J = 7,2 Hz, 4-es szénatomhoz kapcsolódó CH3), 1,24 (dublett, J = 6,4 Hz, CH3CHOH), 2,80 (szingulett, a piridíniumcsoport 6-os szénatomjához kapcsolódó CH3), 4,18 (a piridíniumcsoport nitrogénatomjához kapcsolódó CH3), 4,41 (AB kvartett közepe, CH2S), 7,5—8,4 (piridíniumcsoport protonjai) Ultraibolya spektrum (0,05 M puffer, pH = = 7,0): kmax = 278 nm (e = 11504). [a]£3 = —256,4° (c = 0,22; víz). T,/2 = 20,8 óra, 37°C-on 10“4 M koncentrációnál mérve pH = 7,4 értékű pufferoldatban. 16 9 197904 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
