197766. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szérumtól független sejtvonalak előállítására
197766 600 ul 2,5%-os agar izotóniás sóoldatban, és 800 pl RPMI-1640 tápközeg. Lízis-területek fejlődnek ki a TPA-t termelő kiónok közül és a lízis legnagyobb területei azok közül a kiónok körül látszanak, amelyek a legtöbb TPA-t termelik. A TPA-t legmagasabb szinten termelő mutáns kiónt izoláljuk és Petri-csészén elterjesztjük. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás szérumtól független humán sejtvonal vagy ebből származó, szérumtól független mutáns sejtvonal előállítására, azzal jellemezve, hogy 1. egy szérum-függő humán sejtvonal tenyészetéből a szérumot tartalmazó tápközeget eltávolítjuk és szérum-mentes tápközeggel helyettesítjük, II. a tapadó vagy nem tapadó sejteket szérum-mentes tápközeggel tápláljuk, és III. a sejteket addig hagyjuk növekedni, amíg szérumtól független sejtvonal alakul ki, és kívánt esetben a szérumtól független sejtvonalból egy szérumtól független mutáns sejtvonalat kapunk. (Elsőbbsége: 1983.12.29.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szérum-mentes tápközegként kondicionált tápközeget alkalmazunk, és a sejteket addig hagyjuk nőni, amíg a kondicionált tápközeg tovább már nem szükségrgg (Elsőbbsége: 1982.12.30.) 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szérum-mentes kondicionált tápközegként olyan tápközeget alkalmazunk, amelyet a társ szérum-függő sejt-tenyészetből gyűjtöttünk. (Elsőbbsége: 1982.12.30.) 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a sejteket mintegy 30%-os 13 vagy nagyobb összefolyásig növesztjük kondicionált tápközeg nélkül. (Elsőbbsége: 1983.06.22.) 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szérummentes tápközegként olyan tápközeget alkalmazunk, amelyet a nem -tapadó sejteket tartalmazó közeg izolálásával, a nem-tapadó sejteknek a tápközegtől való elkülönítésével és ezeknek a tapadó sejtekhez az új, szérum-mentes tápközeggel együtt történő visszaadásával állítunk elő. (Elsőbbsége: 1983.06.22.) 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve., hogy szérum-mentes tápközegként olyan tápközeget alkalmazunk, amelyet a szérum-mentes tápközeg egy részének 24— 72 óránként friss szérum-mentes tápközeggel való helyettesítésével állítunk elő. (Elsőbbsége: 1983.06.22.) 7. Az 1—6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szérum-függő sejtvonalként humán melanoma sejtvonalat alkalmazunk. (Elsőbbsége: 1983.06.22.) 8. Az 1—6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szérum-függő sejtvonalként olyan sejtvonalat alkalmazunk, amely termel TPA-t és/vagy pro-TPA-t. (Elsőbbsége: 1983.12.29.) 9. Az 1—6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szérum-függő sejtvonalként Bowes I sejtvonalat alkalmazunk. (Elsőbbsége: 1982.12.30.) 10. Az 1. igénypont szerinti eljárás szérumtól független mutáns sejtvonal előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely kapott szérumtól független sejtvonalat valamely mutagénnel kezelünk vagy besugárzásnak teszünk ki, és a megfelelő szérumtól független mutáns sejtvonalat izoláljuk. (Elsőbbsége: 1983.12.29.) 14 5 10 15 20 25 30 35 4C Rajz nélkül Kiadja: Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető •N°8i36. Nyomdaipari vállalat, Ungvár