197561. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-acetil-D(L)alfa-amino-karbonsavak racemizálására
197561 sel ellátott extruderben 45 másodperc tartózkodási időn belül megolvasztunk. Az olvadékot 0,1 g ecetsavanhidriddel elegyítjük és ezt követően még 55 másodpercen át utánkapcsolt reakciócsőben 170°C-on tartjuk, majd 90 ml 4 t%-os nátrium-hidroxidoldattal lehűtjük. Az oldat pH-ját nátrium-hidroxid további adagolásával 7-re és víz hozzáadásával az enzimatikus hasításhoz alkalmazandó szubsztrátkoncentrációra (0,4 mólos) állítjuk. A nagynyomású folyadékkromatográfiával meghatározott N-acetil-D,L-fenil-alanin tartalom az elméleti érték 99%-a. [a]p°a racemizálás előtt: 46,85° (c=2etanolban) [a] p° a racemizálás után: 0° (c=2 etanolban) 9. példa Megismételjük a 8. példa szerinti eljárást, azzal a különbséggel, hogy a 175°C-on kapott olvadékot 0,2 g ecetsavanhidriddel elegyítjük, majd még 50 másodpercen át 175°C-on hevítjük. A nagynyomású folyadékkromatográfiával meghatározott N-acetil-D,L-fenil-alanin tartalom az elméleti érték 98,5%-a. [a] p° a racemizálás előtt: 46,85° (c=2 etanolban) [a]p° a racemizálás után: 0° (c=2 etanolban) 10. példa Megismételjük a 8. példa szerinti eljárást, azzal a különbséggel, hogy a 175°C-on kapott olvadékot 0,4 g ecetsavanhidriddel elegyítjük, majd még 50 másodpercen át 170°C-on tartjuk. A nagynyomású folyadékkromatográfiával meghatározott N-acetil-D,L-fenil-alanin tartalom az elméleti 97,5%-a. [a] p° a racemizálás előtt:—46,85° (c=2 etanolban) [a] p° a racemizálás után: 0° (c=2 etanolban) 3. Összehasonlító kísérlet Megismételjük a 10. példa szerinti eljárást, azzal a különbséggel, hogy az olvadékot 1,0 g ecetsavanhidriddel elegyítjük. A nagynyomású folyadékkromatográfiával meghatározott N-acetil-D,L-fenil-alanin tartalom az elméleti 92,2%-a. [a] p° a racemizálás előtt:—46,85° (c=2 etanolban) [a] a racemizálás után: 0° (c=2 etanolban) 11. példa 10 g (0,041 mól) N-acetil-D(L)-triptofánt (olvadási hőmérséklet 193°) 205°C-on, nitrogén-atmoszférában, kiegészítő fűtéssel ellátott extruderben 45 másodperc tartózkodási időn belül megolvasztunk. Az olvadékot 0,05 g ecetsavanhidriddel elegyítjük és ezt követően még 12 másodpercen át utánkapcsolt reakciócsőben 205°C-on tartjuk, majd 150 ml 1 t%-os nátronlúgba 5 öntve lehűtjük és az enzimes hasításnál alkalmazandó szubsztrátkoncentrációra (0,2 mólos) állítjuk. Az NMR-spektrum azonos a kiindulási anyagéval, ami legkevesebb az elméleti 95%ának megfelelő N-acetil-D,L-triptofán tartalmat jelent. [a] p a racemizálás előtt: —23,0° (c=5 metanolban) [a]20 a racemizálás után: —0,02° (c=5 metanolban). 12. példa 10 g (0,063 mól) N-acetil-D(L)-valint (olvadási hőmérséklet 162°C) 170°C-on nitrogén-atmoszférában kiegészítő fűtéssel ellátott extruderben 40 másodperc tartózkodási időn belül megolvasztunk. Az olvadékot 0:05 g ecetsavanhidriddel elegyítjük és ezt követően még 55 másodpercen át utánkapcsolt reakciócsőben 170°C-on tartjuk, majd 50 ml 4 t%-os nátrium-hidroxiddal lehűtjük. A további feldolgozást az 1. példával analóg módon végezzük. A nagynyomású folyadékkromatográfiával meghatározott N-acetil-D,L-valin tartalom az elméleti 99,1%-a. [a]£° a racemizálás előtt: + 17,7° (c=4 vízben) [a]p° a racemizálás után: +0,6 (c=4 vízben). Összefoglalás: N-acetil-D (L) -a-amino-karbonsavakat termikusán racemizálunk oly módon, hogy azokat megolvasztjuk, az olvadékhoz kis mennyiségű ecetsavanhidridet adunk és azt a gyakorlatilag teljes racemizáiásig az olvadási hőmérséklet és 210°C közötti hőmérsékleten hevítjük, majd az olvadékot vizes alkálifém-hídroxid- vagy ammónium-hidroxid-oldattal lehűtjük. A teljes racemizáláshoz szükséges tartózkodási idő oly módon függ az olvadék hőmérsékletétől, hogy annál rövidebb, minél magasabb az olvadék hőmérséklete. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás N-acetil-D (L)-a-amino-karbonsavak racemizálására ecetsavanhidrid jelenlétében, azzal jellemezve, hogy a racemizálást az N-acetil-D (L)-o:-amino-karbonsav olvadékában, az N-acetil-D(L)-a-amino-karbonsavra vonatkoztatva 0,1—2 tömeg% ecetsavanhidrid jelenlétében végezzük, x (percekben) tartózkodási időn keresztül 115—210°C hőmérsékleten és a T (°C-ban) racemizálási hőmérséklet és a T tartozkódási idő között a T=1 n (e_50T+2,5+eíT+155) összefüggés áll fenn, azzal a megkötésse-1, hogy T alsó határértéke az N-acetil-D (L)-a-amino-karbonsav olvadáspontja és az olvadékot a tartózkodási idő elteltével vizes alkálifém-hidroxid- vagy ammónium-hidroxid-oldattal lehűtjük. 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 30 65
