197357. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kicsapott heterológ fehérjék tisztítására és reaktiválására
57 197357 58 kulaszitával érintkeztetjük és/vag nagy fordulatszámú centrífugálásnak vetjük alá és így a nagyobb molekulatömegül komponenseket eltávolítjuk az oldatból. 24. Az elózó igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy gyengén denaturáló oldatként egy nem-ionos denaturálószer oldatát alkalmazzuk, és a fehérje gyengén denaturáló oldatát további tisztítás végett ioncserélő kromatográfiának vetjük alá. 25. A 24. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy gyenge denaturálószerként karbamidot alkalmazunk. 26. Az elózó igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a fénytörő fehérjét oly módon választjuk el a nem-fénytörö anyagtól, hogy a sejteket egy ionos pufferoldatban elroncsoljuk és kis fordulatszámú centrífugálásnak vetjük alá, amikor is a fénytörő fehérje a csapadékba kerül, míg a sejt-törmelékek a pufferoldatban maradnak; és adott esetben a centrifugált csapadéknak az ionos pufferoldatban való szuszpendálását, az elroncsolást és a kis fordulatszámú centrifugálást egyszer vagy többször megismételjük és ezzel a fénytórö fehérjét kísérő sejt-anyag mennyiségét to- 5 vább csökkentjük. 27. A 26. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 4 és 10 közötti pH-értékű és 0,01-2 mól/1 ion-erősségű puffert alkalmazunk. 10 28. A 27. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 6-9 pH-értékű és 0,4- -0,6 mol/l ion-erősségű puffert alkalmazunk. 29. Az előző igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a 15 gazdasejt-kultúrát a sejteket megölő kezelésnek vetjük alá és ezzel növeljük a fénytörő feliérje mennyiségi arányét, majd a fénytörő fehérjéket a sejtek elroncsolásával extraháljuk. 20 30. A 29. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a sejtek megölését savas kezeléssel, hőkezeléssel, vagy valamely nem poláros szerves oldószerrel való kezeléssel végezzük. 25 6 ábraoldal A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 90.2044.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkő István vezérigazgató 30
