197353. lajstromszámú szabadalom • Eljárás heterológ gének kifejezésének megkönnyítésére E. coliban szintetikus regulációs terület segítségével
10 197353 11 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás heterológ gének kifejezésének megkönnyítésére E. coliban, azzal jellemezve, hogy a heterológ gén elé leolvasási irányban egy szintetikus regulációs területet építünk, amely promotort, módosított lac-operátort és riboszóma kötőhelyet tartalmaz, és a regulációs terület a következő jellemzőkkel jellemezhető: a) a promotorban a -35-terület nukleotid-szekvenciája (kódoló ág) TTGACA, és kívánt esetben még egy vagy két nukleotid ennek a szekvenciának bármelyik végén, b) a promotorban a -10-terület nukleotid-szekvenciája (kódoló ég) TATAAT, és kívánt esetben még egy vagy két nukleotid ennek a szekvenciának bármelyik végén, c) a -35- és -10-terület között 14-17 bázispárból álló térköz-csoport található, d) a riboszóma kötőhely és az ATG-starkodon között 6-14 bázispárból álló térköz-csoport található. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a -35-területben TTGACAT szekvenciával rendelkező regulációs területet használunk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a -10-területben GTATAAT szekvenciával rendelkező regulációs területet használunk. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a -35-területben CTTGACAT 5 szekvenciával rendelkező regulációs területet használunk. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a -10 és -35-terület között 15 bázispárból állá térköz-10 csoportot tartalmazó regulációs területet használunk. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a -35 és -10-terület közötti térköz-csoportként, 50X-15 -nál több adenozint és timidint tartalmazó csoportot használunk. 7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a riboszóma kötőhely és a startkodon között 10 20 bázispárból álló térköz-csoportot tartalmazó regulációs területet használunk. 8. Az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a riboszóma kötőhely és a startkodon közötti ±ér-25 köz-csoportként 50X-nát több adenozint és tim dint tartalmazó csoportot használunk. 9. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy purinban gazdag riboszóma kötőhelyet tartalmazó re-30 gulácíós területet használunk. 10. Az 1-9. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy I. DNS-szekvenciával rendelkező módosított lac-operátort tartalmazó regulációs területet 35 használunk. 11. Az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy lia, DNS-szekvenciával rendelkező módosított lac-operátort tartalmazó regulációs területet 40 használunk. 2 ébraoldal A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 90.2044.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkő István vezérigazgató
