197352. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pHJL 210 plazmid és más, ezzel összefüggő kétfunkciós klónozó vektorok előállítására Streptomycetesben való alkalmazáshoz
8 197352 9 bosidificus (SF-733 antibiotikum), S. flavopersicus (spektinomicin), S. spectabilis (aktinospektacin), S. rimosus, paromomycinus forma (paramomicinek, katenulin), S. fradiae var. italicus (aminosidin), S. bluensis var. bluensis (bluensomicin), S. catenulae (katenulin), S. olivoreticuli var. cellulophilus (desztomicin A), S. tenebrarius (tobramicin, apramicin), S. lavendulae (neomicin), S. albogriseoluB (neomicinek), S. albus var. metamycinus (metamicin), S. hygroscopicus var. sagamiensis (spektinomicin), S. bikiniensis (sztretomicin), S. griseus (sztreptomicin), S. erithrochromogenes var. narutoensis (sztreptomicin), S. pooliensis (sztreptomicin), S. galbus (sztreptomicin), S. rameus (sztreptomicin), S. olivaceus (sztreptomicin), S. mashuensis (sztreptomicin), S. hygroscopicus var. limoneus (validamicinek), S. rimofaciens (desztomicinek), S. hygroscopicus, glebosus forma (glebomicin), S. fradiae (hibrimicinek, neomicinek), S. eurocidicus (A 16316-C antibiotikum), S. aquacanus (N-metil higromicin B), S. crystallinus (higromicin A), S noboritoensis (higromicin), S. hygroscopicus (higromicinek), S. atrofaciens (higromicin), S. kasugaspinus (kasugamicinek), S. kasugaensis (kasugamicinek), S. netropsis (LL-AM 31 antibiotikum). S. lividus (lividomicinek). S. hofuensis (seldomicin komplex), és S. canus (ribosil-paromamin). Szintén előnyös gazdasejtek és Streptomycetes fajok restrikció nélküli törzseiből azok, amelyek makrolid antibiotikumokat termelnek és amelyekben a jelen vektorok különösen hasznosak és transzformálhatok. Ilyen restrikció nélküli sejtek lehetnek pl. a következő fajokból: Streptomyces caelestis (M- 188 antibiotikum), S. platensis (platenomicin), S. rochei var. volubilis (T-2636 antibiotikum), S. venezuelae (metimicinek), S. griseofuscus (bundlin), S. narbonensis (joszamicin), narbomicin), S. fungicidicus (NA-181 antibiotikum), S. griseofaciens (PA-133 A, B antibiotikumok), S. roseocitreus (albociklin), S. bruneogriseus (albociklin), S. roseochromogenes (albociklin), S. cinerochromogenes (cineromicin B), S. albus (albomicetin), S. felleus (agromicin, pikromicin), S. rochei (lankacidin, borrelidin), S. violaceoniger (lankacidin), S. griseus (borrelidin), S. maizeus (ingramicin), S. albus var. coilmyceticus (koleimicin), S. mycazofaciens (acetil-leukomicin, espinomicin), S. hygroscopicus (turimicin, relomicin, maridomicin, tilozin, karbomicin), S. griseospiralis (relomicin), S. lavendulae (aldgamicin), S. rimosus (neutramicin), S. deltae (deltamicinek), S. fungicidicus var. e8pinomyceticus (espinomicinek), S. furdicidicus (midekamicin), S. ambofaciens (foromacidin D), S. eurocidicus (metimicin), S. griseolus (griseomicin), S. flavochromogenes (amaromicin, sinkomicinek), S. fimbriatus (amaromicin), S, fasciculus (amaromicin), S. erythreus (eritromicinek), S. antibioticus (oleando- 6 micin), S. olivochromogenes (oleandromicin), S. spinichromogenes var. suragaoensis (kujimicinek), S. kitasatoensis (leukomicinek), S. narbonensis var. josamyceticus (leukomicin A 3, joszamicin), S. albogriseolus (mikonomicin), S. bikiniensis (kalkomicin), S. cirratus (cirramicin), S. djakartensis (niddamicin), S. eurythermus (angolamicin), S. fradiae (tilozin, laktenocin, makróéin), S. goshikiensis (bandamicin), S. griseoflavus (akumicin), S. halstedii (karbomicin), S. tendae (karbomicin), S. macrosporeus (karbomicin), S. thermotolerans (karbomicin) és S. albireticuli (karbomicin). Szintén előnyös gazdasejtek a Streptomycetes fajok restikció nélküli törzseiből azok, amelyek /3-laktám antibiotikumokat termelnek és amelyekben a jelen vektorok különösen hasznosak és transzformálhatók. Ilyen restrikció nélküli sejtek lehetnek pl. a következő fajokból: Streptomyces lipmanii (A- 16 884, MM-4550, MM-13 902), S. clavuligerus (A-16 886 B, klavulánsav), S. lactam dur ans (cefamicin C), S. griseus (cefamicin A, B), S. hygroscopicus (deacetoxi-cefalosporin C), S. wadayamensis (WS-3442-D), S. chartreusis (SF-1623), S. heteromorphus és S. panayensis (C-2081X); S. cinnamonensis, S. fimbriatus, S. halstedii, S. rochei és S. viridochromogenes (cefamicin A, B); S. cattleya (tienamicin); és S olivaceus, S. flavovirens, S. flavus, S. fulvoviridis, S. argenteolus és S. sioyaensis (MM-4550 és MM 13 902). Szintén előnyös gazdasejtek a Streptomycetes fajok restrikció nélküli törzseiből azok, amelyek poliéter antibiotikumokat termelnek és amelyekben a jelen vektorok különösen hasznosak és tanszformálhatók. Ilyen restrikció nélküli sejtek lehetnek pl. a következő fajokból: Streptomyces albus (A-204, A-28 695A és B, szalinomicin), S. hygroscopicus (A-218, emericid, DE-3936, A-120, A--28 695A és B, eteromicin, dianemicin), S. griseus (griszorixin), S. conglobatus (ionomicin), S. eurocidicus var. asterocidicus (laidlomicin), S. lasaliensis (laszalocid), S. ribosidificus (lonomicin), S. cacaoi var. asoensis (lisocellin), S. cinnamonensis (monensin), S. aureofaciens (naraszin), S. gallinarium (RP-30 504), S. longwoodensis (lisocellin), S. flaveolus (CP-38 936), S. mutabilis (S-ll 743 a), és S. violaceoniger (nigericin). A Streptomycetes gazdasejtek fentebb leirt reprezentatív példáin kivül a jelen vektorok alakalmazhatók és transzformálhatók E. coliban is. így a jelen találmány szerinti vektorok széles körű alkalmazást nyerhetnek, és organizmusok széles választékából gazdasejteket képesek transzformálni, és azokban hasznos tevékenységet végezni. Bár a jelen találmány minden kiviteli módja alkalmazható, a jelen rekombináns DNS klónozó vektorból és transzformánsokból néhány előnyős. Előnyős plazmidok a kővetkezők: pHJL2200, pHJL2202, pHJL201, pHJL210 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65