197210. lajstromszámú szabadalom • Eljárás transzdermális kezelésre alkalmas, hatóanyagként 2-amino--3-benzoil fenil-ecetsav származékokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
15 197210 16 Keverési mód: Desztillált vizet körülbelül 80 C°-ra melegítjük. A vizet gyorsan keverjük annak érdekében, hogy örvényt létesítsünk és csomómentes hidroxi-etil-cellulózt viszünk az 5 örvénybe, majd a keverést addig folytatjuk, ameddig sima, viszkózus gélt nem kapunk. A gélt lombikokba öntjük és ezeket 121 C°-on 1 atmoszféra túlnyomáson 15 percig autoklávban tartjuk. Hatóanyagot adunk a gélhez io és alaposan összekeverjük vele. Lábjegyzet a C összetételhez: a) Natrosolt, amelyet a Hercules, Inc. állít ]5 elő. Petrolátum-kenőcs előállítása - D összetétel 20 Ismert mennyiségű (I) általános képletű hatóanyagot alaposan összekeverünk ismert mennyiségű fehér petrolatummal, U.S.P. Kinetikai értékelés 25 A, B, C és D összetételű készítményekkel in vitro vizsgálatokat szörtelenitett egerek bőrének a felhasználásával végeztünk olyan diffúziós kísérletek során, amilyeneket 30 Holland, J. M. et al. írtak el a Toxicology and Applied Pharmacology 72: 272-280 (1984) irodalmi helyen. Ezeknél a kísérleteknél a transzdermális áramlást mértük a 74. példa szerinti vegyület 1 tömeg%-os koncentrációi- 35 nak az alkalmazása mellett a kővetkező sorrendben: A összetétel (pH = 7,0)>B összetétel (pH = 3,5)>C összetétel (hidrogél)>D összetétel (petrolátum). Ezek közül az A összetétel adta a legreprodukálhatóbb áramlást. 40 A kinetikai értékelési módnál az A, B, C és D összetételű készítményeket használtuk elkülönített vizsgálatokban egy perfúziós cellára szerelt kivágott egérbőr epidermális oldalán, míg egy tápközeget [Hank-féle 45 egyensúlyban tartott 50 mM HEPES pufferrel 7,40 pH-ra állított sóoldatokat (Flow Laboratories, Dublin Va) 95% 02/5% C02 gázeleggyel 37 O'-on kezelve és antibiotikumokkal védve] szivattyúztunk át a perfúziós kamrán a bőr 50 dermális oldalával szemben 2 ml/óra sebességgel. Perfuzátum-mintákat vettünk 18 órán keresztül. A perfuzátumba átvitt (74. példa szerinti) vegyület netto pg mennyiségét az idő függvényében ábrázoltuk és így egy 55 szigmoid (S-alakú) görbét kaptunk. A görbe lineáris szakaszát szemrevételezéssel meghatároztuk és e vonalszakasz lejtését és az ordináta-különbségeket lineáris regressziós elemzéssel számítottuk. Ebből és a bőr ismert felületéből kiszámítottuk a hatóanyagáramlást. Az eredményeket a 2. táblázatban adjuk meg. 2. táblázat A 34. példa szerinti vegyület transzdermális áramlása szörtelenitett egérbör használata esetén Összetétel Áramlás, /u/cm2 (a) A összetétel (pH=7,0) B összetétel (pH=3,5) C összetétel (hidrogél) D összetétel (petrolátum) 0.52±0.01 0.37±0.20 0.18+0.02 0.07+0.02 (a) lineáris áteresztési idő átlagos ± szabványos eltérés, n=2 Gyulladásgátló hatás vizsgálata - Kar ragen in által okozott patkányláb ödéma Vizsgálat előtt egy nappal mindegyik patkánynak közvetlenül a farok felett lévő alsó hétrészének 2,5 x 2,5 cm méretű felületét leborotváltuk és kereskedelmi forgalomban lévő .Nair' szőrei távoli tó készítménnyel szőrtelenítettük. A patkányokat visszavittük a telephelyükre, ahol táplálékkal és vízzel láttuk el azokat. A következő napon mindegyik patkányt megmértük és a bal hátulsó végtag térfogatát feljegyeztük. Ezután a krémeket a következő módon alkalmaztuk: a 0,2 ml krém-vivőanyagot (kontroll hatóanyag nélkül) vagy hatóanyagot tartalmazó készítményt 10-15 másodperc alatt alaposan bedörzsöltük a patkány hátának a szörtelenitett részébe. Közvetlenül ezután a patkányokat plexi-üvegből készült megfigyelő hengerekbe vittük annak érdekében, hogy korlátozzuk mozgásukat és így meggátoljuk a krémnek orális úton történő véletlen bejutását. A patkányokat ezt kővetően tágas térben tartottuk 4 óra hosszat. Az adagolás után 4 órával 0,1 ml 1%-os karragenint fecskendeztünk be mindegyik patkány bal hátulsó végtagjába, majd az állatokat visszavittük a megfigyelő ketreceikbe és a tágas térbe további 3 órára, majd meghatároztuk a bal hátulsó végtag térfogatét. Az ödéma mértékét úgy határoztuk meg, hogy a végtag 0 időnél mért térfogatát kivontuk a karragenin injekció beadása után 3 órával meghatározott térfogatból. Két Dunnet-féle farok kísérletet végeztünk annak érdekében, hogy összehasonlítsuk a kezelt csoportok ödémáját a megfelelő kontroll csoportok ödémájával [Dunnett, C. W. (1955); J. AM. STAT. ASSOC. 5Ö. 1096-1121]. Gyulladásgátló vizsgálati eredmények - -Dermális alkalmazás Néhány (I) általános képletnek megfelelő vegyületet hozzákevertünk a krémhez annak érdekében, hogy 3,2 tőmeg% hatóanyagtartal-9
