197209. lajstromszámú szabadalom • Eljárás humán retrovírus elleni, 3'-azido-3'-dezoxi-timidint tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
6 197209 7 A 3’-azido-3’-dezoxitimidin emberi retrovirusokkal szembeni aktivitását különböző in vitro rendszerben vizsgáltuk. Például, H9 humán limfoblasztoid sejtvonal fertőzését AIDV-vel a 3’-azido-3’-dezoxitimidin 0,013 ug/ml alatti koncentrációban, a fertőzés után 20 órával is hatásosan gátolja. Az U937 humán limfoblasztoid sejt, a PHA-stimulált fehérvérsejt, és a tenyésztett perifériás vérlimfocita AIDV fertőzését hasonlóan alacsony koncentrációban szintén gátolja. Ezen túlmenően, 10 napos kísérletben egészen 5000 AIDV vírusig per sejt, és T4-klónozott, tetanuszspecifikus, T-helper limfocita alkalmazásával sejtcsökkenés nem mutatkozik 3'-azido-3'-dezoxitímidinnel kezelve, míg a nem kezelt sejtek ötszörös csökkenést mutatnak. HTLV-I-el transzformált, és AIDV-vel szuperfertőzött azonos sejtvonal citopatikus hatása szintén teljesen blokkolt. Klinikai vizsgálatok azt mutatják, hogy tisztított AIDV reverz-transzkriptáz enzim aktivitását a 3’-azido-3’-dezoxitimidin trifoszfátja kompetitiv gátló mechanizmussal blokkolja. Az I fázis klinikai vizsgálata szintén azt mutatja, hogy a 3’-azido-3’-dezoxitimidin képes a vér-agygótat áttörni klinikai hatásos mennyiségben. Ez a tulajdonság a humán retrovirus által okozott CNS fertőzés kezelésére és megelőzésére egyaránt szokatlan és értékes. A 3’-azido-3’-dezoxitimidin azon képességét, hogy a retrovirus előidézte rosszindulatúság befolyását módosítja, egér-modellel bizonyítottuk, melyben a 3’-azido-3’-dezoxitimidin adagolása az intravénásán adagolt Rauscher Murine Leukaemia Vírus, a HTLV-I murin ekvivalense, által előidézett spelnomegáliét gátolja. További kísérletekben a 3’-azido-3’-dezoxitimidin azt mutatta, hogy a HTLV-I ismétlődését 0,8 jug/ml alatti koncentrációban in vitro gátolja. Ezek szerint a jelen találmány további előnyös jellemzője: találmány szerinti vegyületek felhasználása gyógyszerek előállítására emberi retrovirus-fertőzések kezelésére vagy megelőzésére. Emberi retrovirus fertőzések, melyek a találmány szerint kezelhetők vagy meggátolhatók, például a T-sejt limfotropikus retrovírusos (HTLV), különösen a HTLV-I, a HTLV-II és az AIDV (HTLV-III) fertőzések. A klinikai állapotok, melyek a találmány szerint kezelhetők, vagy meggátolhatok, magukba foglalják az AIDS, az AIDS-rokon tünetcsoport és a HTLV-I pozitív leukémia és limfoma eseteket. A kezelésre alkalmas betegek azok is, akik az AIDV, AIDV CNS fertőzésekre, a PGL-re és az ARC-ra antitestekkel rendelkeznek. A kísérletek azt mutatják, hogy a 3’-azido-3'-dezoxitimidin sejtenzimek hatáséra in vivo 5’-monofoszfáttá alakítható. A monfoszfát ezután más enzimekkel, difoszfáton keresztül, trifoszfáttá tovább foszforilezhető, és mint ahogy más tanulmányok is tárgyalják, ez a 3’-azido-3'-dezoxitimidin trifoszfét formája, amely az AIDV fordított átíráséba hatásos láncvégzödés, mint ahogy ez a hatás madáx—mieloblasztózis víruson és Moloney murine leukaemia víruson megmutatkozik. Ez a forma az AIDV reverz transzkriptézt szintén gátolja, míg emberi DNS polimeráz aktivitásén elhanyagolható hatást mutat. A 3’-azido-3'-dezoxitimidint vagy az ezt tartalmazó gyógyszerkészítményeket retrovírusos fertőzések megelőzésére vagy kezelésére embernek bármely megfelelő módon adagolhatok, mint amilyen az orális, rektális, nazális, helyi (beleértve a száji és nyelvalatti), vagínális és parenterális (mint szubkután, intramuszkuláris, intravénás és intradermális) adagolás. Magától értetődő, hogy az előnyös adagolási mód a beteg állapota és kora, a fertőzés természete és a választott aktív alkotórész szerint véltozik. Általánosan alkalmazható dózis naponta 3,0 - 120 mg/kg testsúly, előnyösen 6 -90 mg/kg testsúly, és legelőnyösebben naponta 15 - 60 mg/kg testsúly között változhat. A kívánt dózis előnyösen naponta két, három, négy, öt, hat vagy ennél több részletben, megfelelő időközökben adagolható. Ezek a dózisok dózisegység formájában, például dózisegységenként 10 - 1500 mg, előnyösen 20 - 1000 mg, és legelőnyösebben 50 - 700 mg aktív alkotórészt tartalmazó formában adagolhatok. A 3’-azido-3’-dezoxitimidinnel lefolytatott kísérletek alapján az ajánlható, hogy a dózisok adagoláséval célszerű a sejtmagban az aktiv alkotórész maximális koncentrációját létrehozni, mely mintegy 1-75 pM, előnyösen mintegy 2 - 50 /uM és legelőnyösebben mintegy 3 - 30 pM lehet. Ez a feltétel például megvalósítható az aktiv alkotórész 0,1 - 5%-os oldatának intravénás injekcióval tetszés szerint sóoldatban, vagy mintegy 1 - 100 mg/kg aktív alkotórészt tartalmazó pirula formájában orálisan adagolva. A kívánt vérszint folyamatos infúzióval is tartható, mely mintegy 0,01 - 5,0 mg/kg/óra, vagy az infúzió közötti időben mintegy 0,4 - 15 mg//kg aktív alkotórészt adagol. Bár az aktív alkotórészt lehet önmagában is adagolni, azonban előnyösebb gyógyászati készítmények alkalmazása. A jelen találmány szerinti készítmények legalább egy, az előzőekben meghatározott aktiv alkotórészt tartalmaz egy vagy több elfogadható hordozóanyaggal, és tetszés szerint más gyógyhatású szerekkel kombinálva. Mindegyik hordozóanyagnak .elfogadható -nak kell lennie olyan értelemben, hogy a készítmény más alkotórészeivel összeférhető legyen, és a betegre ne legyen káros. A készítmények magukba foglalják azokat, melyek orális, rektális, nazális, helyi (beleértve a száji és nyelvalatti), vaginalis vagy párén-^ 5" 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
