197030. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új hexapeptidek és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
5 197 050 6 1. példa H-G/y-Gly-Plie-Met-D-Lys-Phe-OH szintézise (1) Boc-Gly-Gly-Phe-Met-OH Ezt a pepiidet a Rec. Trav. Chim. Pays-Bas 99, 63 (1980) szerint állítottuk elő. (2) H- Gly- Gly-Phe-Met-D-Lys-Phe- OH A Z-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu védőcsoporttal védett dipeptidről a Z védőcsoportot eltávolítjuk, mielőtt az l(l)-ben kapott pepiiddel reagáltatnánk. Ezért a dipeptidet DMF-ben oldjuk, ezután palládiurn-csontszén katalizátor segítségével addig hidrogénezzük, amíg továbbiakban szén-dioxid nem szabadul fel. Ezután a katalizátort leszűrjük. Az 1(1) szerint kapott pepiidet és 1,1 mól ekvivalens mennyiségű DCC-t és 2 mól ekvivalens mennyiségű HOBt-t adunk az így felszabadított I I-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu peptidliez, ezután két órán keresztül 0 “C-on, majd 12 óráig szobahőmérsékleten keverjük. A kivált DCU-t leszűrjük, a szűríetet bepároljuk és a maradékot EtOH/EtOAc 1:2 arányú elegyéből átkristályosítjuk. Az így kapott védett peptid R< értéke To/EtOH 4:1 arányi! elegyében 0,73. A pepiidről a védőcsoportokat 90% TFA és anizo! keverékében nitrogén-gáz átáramoltatása közben távolítjuk el, ezután étert adunk hozzá, és a csapadékot leszűrjük és ismét feloldjuk t-BuOH/ Wa 1:1 arányú keverékében. Acetát fázisban levő Levvatit ioncserélő gyantát adunk hozzá, és az elegyet 40 percig keverjük. Ezután az ioncserélőt leszűrjük, és a szürletet BuOH/HOAc/Wa 4:1:5 arányú keverékével ellenáramban áramoltatva tisztítjuk. A kapott, acetátsó formájú peptid F, értéke BuOH/Py/HÓAc/Wa 8:3:1:4 arányú elegyében 0,64. Hozam: 71,4%. 2. példa H- Gly- Gly-Phe-Met-D-A rg-Phe-OH szintézise (1) BocGly-Gly-Phe-Mct-OH A vegyLilét előállítását az 1. példában írtuk le. (2) Z-D Arg(N02)-Phe-OtBu Z-D-Arg(N02)-OH és H-Phe-OtBu ekvimoláris mennyiségét DMF-ben oldjuk, és a2 1(2) példa szerinti módon DCC és HOB hozzáadásával kapcsoljuk. A DCU-t leszűtjük, a szűrlet szerves etilacetátos fázisát egymást követően savval, bázissal és vízzel mossuk, szárítjuk és etil-acetát/hexán keverékéből átkristályosítjuk. A pepiidet szilícium-dioxid oszlopon tisztítva az R, értéke To/EtOH 4:1 arányú keverékét használva eluensként 0,52. (3) H-Gly-Giy-Phe-Met-D-Arg-Phe-OH A 2(2) példa szerint kapott pepiidet hidrogénezzük és a 2(1) példában kapott peptiddel kapcsoljuk, a termékről a védőcsoportokat az 1(2) példa szerinti módon eltávolítjuk. Az így kapott hexapeptidet szilfetum-dioxid oszlopon tisztítjuk BuOH/Py/HOAc/Wa 20:3:1:4 arányú elegyét használva eluensként. R, értéke 0,46 BuOH/Py/HOAc/Wa 8:3:1:4 arányú elegyét eluensként használva. Hozam: 52,4%. 3. példa H-Gly-Gly-Phe-Met-Lys-D-Phe-OH szintézise (1) Z-Lys/Bod-D-Phc-OíBu Ezt a pepiidet Z-Lys/Boc/-OH és H-D-Phe- Olüu kapcsolásával állítjuk elő DCC/HOBt keverékének jelenlétében az 1(2) példa szerinti módon és éter/petroléter 1:3 arányú keverékéből kristályosítjuk át. To/éter 4:1 arányú keverékét hasz nálva eluensként R, értéke 0,60. (2) H-Gly-Gly-Phe-Met-Lys-D-Phe-OH Az (1) lépcsőben kapott pepiidet hidrogénezzük és Boc - Gly - Gly - Phe - Met - OH - val kapcsoljuk, eltávolítjuk róla a védócsoportokat és az 1(2) példa szerinti módon tisztítjuk. Az így kapott hexapeptid R< érétke 0,40 (eluens: BuOH/Py/HOAc/Wa 8:3:1:4 arányú elegye). Hozam: 61,5%. 4. példa H-Gly-Gly-Phe-Met(0)-D-Lys-Phe-OH szintézise 1,0 g (1,34 millimöl) H - Gly - Gly - Phe - Met - D - Lys - Phe - OH-t oldottunk 80 ml ecetsavban, ezután 10 mólekvivalens (13,4 miliimól) hidrogénperoxidot adunk hozzá 30%-os vizes oldat formájában. Miután a reakcióelegyet 30 percig kevertük szobahőmérsékleten, frissen készített platina-katalizátort adtunk hozzá. A platina katalizátor készítéséhez 5,4 g plntinn-dioxidot szuszpcndállunk ecetsavban és hidrogént és nitrogént vezettünk át a szuszpenzión 30 percen keresztül. 15 perc kevertetés után a reakcióelegyet leszűrök és a szűrletet bepároljuk. A maradékot BuOH/ HOAc/Wa 4:1:5 arányú keverékével ellenáram ban tisztítjuk. Kitermelés: 600 mg. Rf = 0,26 (elucns: BuOH/Py/HOAc/Wa 8:3:1:4 arányú elejiye). 5. példa H-Gly-Gly-rhe-McllOJ-n-l.ys-Phe-OH szintézise 1,0 g (1,34 miliimól) H - Gly - Gly - Phe - Met(O) - D - Lys - Phe - OH-t 10 ml vízben és 0,14 ml 70%-os HCLO„-ben feloldottunk. 2,2 mólekvivalens hidrogán-peroxidot és 10 mg (i4H4)6Mo7024.4H20-t adtunk hozzá. Miután a keveréket két napig kevertük, a hidrogén-peroxid íe-5 10 15 20 25 30 3b 40 45 50 55 60 65 4
