196845. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-21978C-származékok előállítására
1, 2 196 845 255 ( e 11,000), 262 (. e 10,500), 282 (e 4,950), 290 ( € 800), 365 («4,900 )nm. 3. példa A-21978Cg javított előállítása Az első fázisú, második fázisú és harmadik fázisú fermentációs lépéseket az 1. példa szerinti eljárással végeztük. A termelési fermentációs lépést az 1. példa szerinti eljárással végezzük, azzal a különbséggel, hogy a fermentáció 28. órájától kezdődően 25% térf. nonánsav és 75 térí% metil-oleát steril elegyét tápláljuk 0,13 ml/1 fermentlé/óra sebességgel a fermentféhez, és ezt a betáplálást a fermentáció befejeződéséig, a 144. óráig fenntartjuk. Az A-21978C komplex termelése 0,821 g/1 fermentlé, ami 293%-os növekedést jelent az 1. példa eredményéhez képest. Az A-21978Cg faktor (amelyben az (I) általános képletben R jelentése nonanoil-csoport) a teljes ilyen módszerrel előállított A-21978C komplex 10%-a, az 1. példa eljárása szerint előállított A-21978C komplex nem tartalmazott A-21978C0 faktort. Az n-nonaoil-származék (Cq) UV-spektruma: (H?0), A max: 220 (^ 46,000), 250(e 9,500), 255 ( 611,250), 261 (€ 10,750), 280 (6 4,975), 288 ( 4,250), és 364 (e 4,000) nm. 5 10 15 20 25 4. példa A-21978C jQ faktor (az (I) általános képletben R jelentése dekanoil-csoport) javított előállítása A vegetatív növekedés első fázisú és második 30 fázisú fermentációját az 1. példa eljárása szerint végezzük. A harmadik fermentációs fázisban 800 ml második fázisú inokulummal oltunk be 950 1 steril harmadik fázisú táptalajt, amelynek összetétele az alábbi: Alkotórész Dextróz Kálciumkarbonát Szójaliszt Élesztő extraktum KCla MgS04.7H20a' FeS04 - 7H2Oa Sag 471 (habzásgátló) Víz 35 Mennyiség (%) 2,0 0,2 2,0 0,1 40 0,02 0,02 0,0004 0,02 4c 95,6396 a Az ásványi nyomelemek oldatát az 1. példa eljárása szerint készítjük. Az inokulált táptalajt rozsdamentes acél edényben cq 30°C-on 24 óráig inkubáljuk. Az edényt 0,8 térf/térf/ perc sebességgel steril levegővel levegőztetjük és szokásos keverőkkel keverjük. Az így kapott harmadik fázisú tenyészet 1 1-vel inokulálunk 119 1 termelési táptalajt, amely az 1. példában megadott összetételű. A termelési fermentációt az 1. példa eljárása szerint 55 végezzük, azzal az eltéréssel, hogy a fermentáció 28. órájától kezdve 50% (térf/térf) dekánsav (kaprinsav) és 50% (térf/térf) metil-oleát elegyét tápláljuk a fermentlébe 0,26 ml/1 fermentlé/óra sebességgel. A betáplálást a fermentáció befejeződéséig, a 283. óráig, ezzel a sebességgel végezzük. Az A-21978C 60 komplex termelés 1.94 g/1 fermentlé, ez az 1. példa eredményéhez képest 687% növekedést jelent. Az A 21978Ciq faktor (az (I) általános képletben R jelentése dekanoil-csoport) termelés 1,63 g/1 fermentlé, vagy az A-21978 komplex 84%-a, ez az 1. példában előállított A-21978C,n faktorhoz képest 13583% növekedést jelent. 5. példa Más eljárás A-21978C,q javított előállítására Az első, második és narmadik fázisú inokulum kifejlesztését az 1. példa eljárása szerint végezzük. A termelési fázist az 1. példa eljárása szerint iniciáljuk, majd a 28. fermentációs órától kezdődően 25 térí% kaprinsav-etilészter (etil-kaprinát) és 75 térf% metil-oleát elegyét adagoljuk 0,13 ml 1 fermentlé óra sebességgel a fermentléhez és ezt ezzel a sebességgel fenntartjuk a fermentáció befejeződéséig, azaz a 144. óráig. A-21978C komplex termelés 1,022 g/1 fermentlé, ami 362% növekedést jelent az 1. példában kapott eredményhez képest. Az A-21978C,q faktor koncentrációja 0,20 g/liter fermentlé, illetve a teljes A-21978C komplex 20%-a. Ez 1683% növekedést jelent az 1. példában kapott A-21978Cjq faktor termeléshez képest. 6. példa Más eljárás az A-21978Cjq faktor javított előállítására Az első és második fázisú vegetatív növekedési fázisok tenyésztését az 1. példa eljárása szerint végezzük. A harmadik fázisú tenyésztést a 4. példa szerinti eljárással végezzük, azzal a különbséggel, hogy a táptalaj térfogata 1900 1 és a tenyésztés ideje 48 óra. A levegőztetés sebessége a 0-24 óra között 0,3 térf/ térf/perc, a 24-40 óra között 0,45 térf/térf/perc és a 40-48 óra között 0,90 térf/térf/perc. A termelési fermentációt az 1. példa eljárása szerint iniciáljuk. A tápoldat 3600 g gliceroint, 900 ml ionmentes vizet 1 1 kaprinsavat és 620 ml tömény ammóniumhidroxidot tartalmaz. A 23. fermentációs órában 0,0004% élesztő extraktum steril szuszpenzióját adjuk a fermentléhez. A 36. órától kezdve glicerin és ammónium-dekanoát oldatát adagoljuk 0,84 ml/1 fermentlé/óra sebességgel a fermentléhez. A betáplálást ugyanezzel a sebességgel végezzük a fermentáció befejeződéséig, azaz a 143. óráig. Az A-21978C komplex termelése 1,772 g/1 fermentlé, ami 628% növekedést jelent az 1. példa hozamához képest. Az A-21978C,n faktor koncentrációja 0,739 g/1 fermentlé, illetve a teljes A-21978C komplex 42%-a. Ez 6158% növekedést jelent az 1. példában kapott A-21978Cjq koncentrációhoz képest. A 4., 5. és 6. példában előállított n-dekanoil-származék fizikai állandói: Ms: M+ 1620, UV-spektrum: (EtOH): 223 ( e 53,819), 260 (e 9,531), 281 (66,029), 289(6 5,304), 365 (e5,219) nm. 7. példa Az A-21978Cj j javított előállítása Az első, második és harmadik inokulum fázis előállítását az 1. példa eljárása szerint végezzük. A termelési fermentációt az 1. példa eljárása szerint végezzük azzal az eltéréssel, hogy a 28. fermentációs órától kezdve 25térf% undekánsav és 75 tér% metil-oleát steril oldatát tápláljuk 0,13 ml/1 fermentlé/ 11
