196833. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sztatint vagy származékait tartalmazó peptid származékok előállítására
1 2 20°C’ hőmérsékleten. A reakciókeverékből forgó bepárlóban eltávolítjuk a dimetoxi-etánt, etil-acetátot adunk hozzá, és a kémhatást 5%-os vizes sósavval pH = 2 értekre állítjuk be. A szerves fázist elválasztjuk, sóoldattal mossuk, szűrjük, vízmentes Mg-SO4 felett szárítjuk és bepárolva fehér szilárd anyagot kapunk, amit éterben eldörzsölve 35 ntg tisztított kívánt végtermékhez jutunk. 'h-NMRCCDCIj): S 1,5 (s, 9H, BÖK). 5. példa Az (N-/t-butil-oxi-karbonil/-Phe)-His-aminosztatin-Ile-Phe-diacelát előállítását a következő reakciólépéseken keresztül valósítjuk meg. A) Az etil-4(S)-/t-butil-oxi-karbonil-amino)-3(S)-azido-6-metiI-hetanoát és az etil-4(S)-(t-butil-oxi-karbonil-amíno)-6-metiI-transz-2-heptanoát előállításánál 7,6 g (25,05 mmól) 3-epi-N-/(t-butil-oxi-karbonil)-sztatin és 2.78 g (27,55 mmól) trietil-an^in 200 ml mctiién-kloridban készült oldatához 0 C hőmérsékleten 3,15 g (27,55 mmól) metán-szulfonil-kloridot adunk cseppcnként. A reakciókeveréket egy órán keresztül kevertetjük 0°C hőmérsékleten, hagyjuk, hogy egy óra alatt szobahőmérsékletűre melegedjenek, majd kétszer 200 ml 1 N vizes sósavval és 200 ml telített vizes NallC03 oldattal mossuk. A szerves fázist MgS04 felett szárítjuk és bcpárolva 9,75 g sárga olajat nyerünk. Az olaj 150 ml N,N-dimetil-formamidban készült oldatához 2,45 g (37,7 mmól) nátrium-azidot adunk és a reakciókeveréket négy órán üt melegítjük 60°C hőmérsékleten. Az oldószert erős vákuumban eltávolítjuk, a maradékot 500 ml vízben oldjuk, és kétszer 150 ml éterre] extraháljuk. Az egyesített éteres extraktumot 100 ml sóoldattal mossuk, MgS04 felett szárítjuk és bepároljuk, 6,6 g halványsárga olajat nyerve. Az olajat gyors-kromatográfiával szétválasztva, eluensként 25 -30% étert tartalmazó hexánt használva, egyrészt 334 mg etil-4(S)-(t-butiI-oxi-karbonil-amino)-3(S)-azido-6-metiI-heptanoátot kapunk olaj formájában (4% kinyerés) Rf = 0,62 (éter/hexán 1:1), ]H-NMR (CDCU): 5 0,95 (d, J = 6 6H), 1,30 (t, J = 7, 3H), 1,47s (s, 9H), 2,58 (d, J = 7, 2H), 4,17 (q, J = 7 2H), 4,53 (széles d, 1H), bc-NMR (CDCU): 1,42, 22,2, 23,0, 24,9, 28,4, 37,2.42,4, 51,6,61,1,62,8, 155,8, 171,0 IR(CHC13): 3473, 2102 cm-1. A polarosabb frakciókból 4,9 g átlátszó olajat nyerünk (Rp = 0,55, éter/hexán 1:1), ami állás közben kikristályosodik. Jéghideg hexánban eldörzsölve 3,78 g etil-4(S)-(t-butil-oxi-karbonil-amino)-6- -metil-transz-2-heptanoáthoz jutunk pelyhes, fehér anyag formájában (53%-os kinyerés). Op.:56 -58°C. 1H-NMR (CDCUv 5 °’93 (d> J = 6- 6H)> 1 >30 J = 7. 3H), 1.47;(s, 9H), 4,18 (q, J = 7, 2H), 5,9 (dd, J = 15,1, 1H), 6,83 (dd, J = 15,5,1H). IR (KBr): 3350, 3307, 1720, 1701, 1684, 1659 cm’ . B/l) Az etil-3-benzil-amino-4-(t-butil-oxi-karbonil-amino)-3.4(S,S)-6-metil-heptanoát előállításához a 3.52 g (12,35 mmól) etil-4(S)-(t-butil-oxi-karbonil-amino)-6-metil-transz.-2-heptanoátból, 3,97 g (37,0 mmól) benzil-aminból és 90 ml abszolút etanolból álló reakciókeveréket 58°C hőmérsékleten melegítjük 7 napon keresztül, majd bepároljuk és gyors-kromatográfiával szétválasztjuk, eluensként 10— 15% etil-acetátot tartalmazó hexánt használva. A kevésbé poláris frakciókból 963 mg olajos terméket nyerünk (20%-os kinyerés). Rj. - 0,32 (25% etil-acetát hexánban). ^-NMR (CDCU): 5 0,97 (d, J = 5, 6H), 1,25 (t, 3H, J = 7), 1,45 (s, 911), 2,43 (m, 2H), 3,32 (m, 111), 3.77 (s, 2H), 4,10 (q, 2H, J = 7), 4,65 (d, 1H, J = 9), 7,22 (s, 5H). , IR (CHCI3): 3433, 1720 (váll), 1709 cm'1. Tömegspektrum: m/e 393 (M+ ♦ 1), 319, 206 (alapcsúcs), 91. B/2) Az ctil-3-benzil-amino-4-(t-butil-oxi-karbonil-amino)-3,4(S,S)-6-metiI-heptanoát másik módon történő előállításához 120 mg (0,36 mmól) etil-4(S)-(t-butil-oxi-karbonil-amino)-3(S)-azido-6-metil-heptanoát 5 ml ecetsav/etanol 1 : 1 arányú elegyében készült oldatához 20 mg !0%-os Pd/C katalizátort adunk és 1 atm. nyomású hidrogéngáz alatt hidrogénezünk szobahőmérsékleten, három órán keresztül. Miután szűréssel eltávolítottuk a katalizátort, a reakciókeveréket csökkentett nyomáson etanolos azeotropként elpárolva olajos maradékot kapunk. Ezt a 136 mg olajat 3 ml metanolban oldjuk, majd egymást követően szobahőmérsékleten 37 mikrolitert (38,2 mg, 0,36 mmól) benzaldehidet és 0°C hőmérsékleten 34 mg (54 mmól) NaCNBH3-t adunk hozzá. A reakciókeveréket fél órán keresztül kevertetjük 0 C hőmérsékleten, majd mielőtt vízzel és telített vizes NallCOj oldattal hígítanánk, hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Olajos csapadék keletkezik, amit metilén-kloriddal extrahálunk. A szerves fázist MgS04-tal szárítjuk, olajos maradékig bcpárolva. Az olajos maradék vékonyrétegkromatogramján csak egyetlen epimer az etil-3-benzil-amino-4-(t-butil-oxi-karbonil-amino)-3,4-(S,S)-6- -metil-heptanoát látható. Az említett olajat gyorskromatografálással tisztítjuk, 10-15%' etil-acetátot tartalmazó hexánt használva eluensként. 68 mg tér-, méket kapunk, ami a vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatok és az NMR alapján azonos a B/l) lépésnél nyert anyaggal. C) A 3-benzil-oxi-karboníi-amino-4-(t-butiI-oxi-karbonil-amino)-3,4(S,S)-6-metil-heptánsav előállításához 530 mg (1,35 mmól), a B/l) lépesnél nyert etil-3-benzil-amino-4-(t-butil-oxi-karbonil-amino)-3,4- -(S,D)-6-metil-heptanoátot feloldunk 12 ml ecetsav/ etanol 1 : 1 elegyben, és 60 mg 10%-os Pd/C katalizátort adunk hozzá. 3,5 bar nyomású hidrogéngáz alatt hidrogénezünk szobahőmérsékleten 3 órán keresztül. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és a szürletet olajos maradékig pároljuk, amit 10 ml dioxán és 10 ml víz-elegyében veszünk fel. Szilárd NaHC03-t (pH = 7,8), majd 289 mikroliter (345 mg, 2,025 mmól) benzil-oxi-karbonil-kloridot (Chernalog) adunk hozzá. A reakciókeveréket másfél órán keresztül kevertetjük szobahőmérsékleten a hatást pH = 8 értéken tartva szilárd NaHC03 hozzáadásával. A kevertetést további 4 órán keresztül folytatjuk pH = 12,4 kénhatásnál, amit 4 ml vizes 1 N NaOH oldat hozzáadásával érünk el, ha csapadékkiválás történik, a csapadékot vizes dioxán adagolásával visszük oldatba. A reakciókeveréket 1 N vizes 196 833 5 10 '5 20 25 30 35 40 45 50 55 60 7
