196830. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új androsztadién-17-béta-karbonsav-észterek és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 196.830 Polioxietilén (20) szorbitán-monooleát 0,5 mg Ben/.ilalkohnl 8 mg Víz steril kiegészítve l.Oml-rc. 8. készítmény. Aerosol orron és szájon át való inhalálásra. Szteroid. mikronizált Szorbitán-trioleát Triklór-fluor-metán Diklór-te trafluor-e tán Diklór-difluor-metán 0,1 /súly/súIy/% 0,7 /súly/súly/% 24.8 /súly/súly/% 24.8 /súly/súly/% 49,6 /súly/súly/% 9. készítmény. Oldat porlasztásra. Szteorid Propilénglikol víz kiegészítve 7.0 mg 5.0 g 10,0 g-ra. 10. készítmény, inhalálásra szolgáló por. Zselatinkapszulát a következő keverékkel töltünk meg: Szteorid, mikronizált 0,1 mg Laktóz 20 mg A port inhalációs készülék segítségével inhaláljuk. Farmakológia Az új androsztán-17 ß -karbonsav-észterek affinitása a glükokkortikoid-receptorhoz: A jelen találmány szerinti összes szteroid fiziológiailag hatásos vegyület, Az új androsztán-17 ß -karbonsav-észtereknek a glükokortikoid-receptorhoz való affinitását használjuk modellként a gyulladásgátló hatás meghatározására. Receptoraffinitásukat a budesonidhoz (/22R/S/-16 a17a -butilidén-dioxi-11 ^3 ,-21 - dihldroxi-pregna-l,4-dién-3,20-dion), egy nagyon aktív glükokortikoidhoz viszonyítjuk, amelynek helyi és szisztematikus hatásai között kedvező az arány (Thalen and Brattsand, Arzneim. — Forsch. 29, 1687-90/1979/). Egy-két hónapos korú hím Sprague-Dawley patkányokat használunk a vizsgálathoz. A thymüst eltávolítjuk, és jéghideg sóoldatba rakjuk. A szövetet Potter Elvehjem homogenizátorban 20 mmól, 7,4 pH-jú triszt, 10 (súly/térf/%/glicerint, 1 mmól EDTA- t, 20 mmól nátrium-molibdenátot, 10 mmól merkapto-etanolt tartalmazó puffer 10 ml-ében homogenizáljuk. A homogenizátumot 15 percig 20000 g-nél centrifugáljuk. A 20000 g felülúszó 230 °l-cs adagjait ^°C-on körülbelül 24 óra hosszat inkubáljuk 100 °1 fenil-metil-szulfonil-fluoriddal (észteráz-inhibitor, végső koncentráció, 0,5 mmól) 20 °1 jelzetlen kompetitorral és 50 ől triciummal jelzett dexametazonnal (végső koncentráció 3 mmól). A kötött és szabad szteroidot az elegynek 60 °1 2,5 /súly/térf/ I% csontszenet és 0,25 /súly/térf/% dextrán T70 szuszpenziót, 1 mmól EDTA-t és 20 mmól nátrium-molibdenátot tartalmazó 20 mmólos 7,4 pH-jú trisz-pufferban 0°C-on 10 percig tartó inkubálásával választjuk szét. Ezt követően 500 g-nál 10 percig centrifugálunk, és 230 °1 felülúszót 10 ml Insta-Gelben Packard szcintillációs spektrofotométerrel mérünk. A felülúszókat a következőkkel inkubáljuk. a) csak tricum-jelzett dexametazonnal, b) tricium-jclzett dexametazonnal és 1000-szeres felöslegű jelzetlen dexametazonnal és c) tricium-jelzett dexamelazonnal és 0,03 —300-szoros „feleslegű” kompetitorral. A nemspecifikus kötést akkor határozzuk 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 meg amikor 100-szeres feleslegű jelzetlen dexametazont adunk tricium-jelzett dexametazonhoz. A kompetitor jelenlétében kötött radioaktív anyag mennyiségét elosztjuk a receptorhoz kompetitor távollétébe kötött radioaktív anyag mennyiségével és a hányadost százzal szorozva kapjuk a jelzett dexametazon specifikus kötésének százalékát. Mindenegyes kompetitor-koncentrációnál ábrázoljuk a specifikusan kötött radioaktivitás százalékát a kompetitor-koncentráció logaritmusának függvényében. A görbéket összehasonlítjuk az 50%-os specifikus kötési szintnél, és budesonidra vonatkoztatjuk, amelyet 1-es relatív kötési affinitásának (RBA) tekintünk. 4, táblázat Néhány vizsgált vegyület glükokortikoid-receptorhoz való relatív kötési affinitásának (RBA) táblázatos összegezése Vegyület példaszánta RBA Budesonid 1 4. B epimer 0,30 5 B epimer 0,17 27 0,50 38 0,04 55 0,20 64 0,05 67 0,04 69 0,44 84 1,03 87 0,63 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az (I) általános képletű androsztadién- 170 karbonsav-észterek — X] jelentése hidrogénatom, fluoratom, klóratom vagy brómatom, X2 jelentése hidrogénatom, fluoratom, klóratom vagy brómatom, R] jelentése hidrogénatom, vagy 1-4 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport, R2 jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport, R3 jelentése (a) vagy (b) általános képletű csoport, ahol R4 jelentése hidrogénatom, 1-5 szénatomot tartalmazó egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport vagy fenilcsoport Rs jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, és R6 jelentése hidrogénatom, adott esetben halogénatommal szubsztituált 1-8 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport, 2-5 szénatomos alkenilcsoport, 3-6 szénatomos cikloalkilcsoport, furil-metil-, fenil- vagy benzilcsoport. azzal a megszorítással, hogy ha Rj vagy R2 jelentése hidrogénatom, akkor a másik alkilcsoport — előállítására epimerkeverékek vagy tiszta alakjában azzal jellemezve, hogy egy (la), (tb) vagy (Ic) általános képletű vegyületet — amely képletekben Rí, R2, Xj és X2 jelentése az előbb megadottakkal azonos -vagy ezek valamilyen sóját egy (XVI) vagy (XVII) általános képletű vegyülettel -14
