196792. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3,3-diszubsztituált indolin-származékok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 x szignifikánsan különbözik a kontrolitól = P K 0,05 (Student-féle t-teszt) Hasonló körülmények között vizsgálva megállapítható, hogy a 2. és 4. példák szerinti vegyületek fokozzák az acetilkolin felszabadulását hippcampusszeletekből, továbbá az acetilkolin és a dopamin felszabadulását caudális mag (nusleus candosis) metszetekből in vitro. A 4. példa szerinti vegyület ráadásul képes a szerotonin felszabadulását is növelni kéregszeletekből. Magatartási változások vizsgálata A vizsgált hatóanyagnak aktív elhárító (rúd-mászás) tanulási teljesítményére gyakorolt hatását a következőképpen vizsgáltuk. 150-200 g közötti testtömegű him Sprague-Dawley (Charles River) patkányokat alkalmaztunk, amelyek naponta kétszer (éjjel 1 órakor, délután 1 órakor) kapták az 5-5 társításból álló kísérleti blokkokat. Egy társítás a patánynak a kondicionáló ketrecbe (E 10-10 Coulbourn Model, áthelyezhető sokkoló rácspadlózattal) való helyezéséről a rúd (fából készült, a ketrec plafonrészéből kiemelkedő, párhuzamosan elhelyezett átlós bevésésekkel) eléréséig tartott. A társítás a ketrec ajtajának bezárásával és a ketrecvilágítás bekapcsolásával kezdődött. 10 szekundum elteltével 10 szekundum időtartamú elektromos sokkot alkalmaztunk a rácspadlózaton keresztül Colbourn EL3-08 Model sokkoló segítségével. A lábra adott sokk intenzitása 0,6 és 1,2 mA közötti volt. A társítás végén a fényt és sokkot kikapcsoltuk és az állatot kivettük a kondicionáló ketrecből. Ha a patkány a sokk bekapcsolását megelőzően felugrott a rúdra, a választ elhárítónak, ha csak a sokk bekapcsolását követően ugrott fel, a választ menekülőnek tekintettük. 6-9 patkányból álló csoportokat szubkután adott, különböző dózisú hatóanyaggal kezeltük 30 perccel mindegyik kísérleti blokk első társítását megelőzően. Az aktív elhárító tanulási teljesítmény elemzését regresszió analízis (lásd Snedecor és Cochran, Statisztikai Módszerek, 6. kiadás. 432 oldal) segítségével végeztük el az elhárításuk kumulatív száma versus a társítási blokkok görbe alapján. A görbe száma versus a társítási blokkkok görbe alapján. A görbe SEM (az átlagtól való sztenderd eltérés) értékét és átlag meredekségét mindegyik kezelt csoportban kiszámítottuk és mint az aktív elhárító tanulási teljesítmény mértékét használtuk. A gyógyszerhatást a meredekség százalékos változásában fejeztük ki a kontroll görbe meredekségéhez hasonlítva. Az eredményeket a 3. táblázatban összesítettük. 3. táblázat Az aktív elhárító tanulási teljesítmény %-ban kifejezett növekedése patkányokon Hatóanyag dózis (mgíkg szubkután) Példa 0.1 0,3 1 3 5 10 20 2 _ _- 54x 53x 21 4 +59x +91x +84X +57 -— X A kontrolitól P <( 0,05 szinten szignifikánsan eltér a Student-féle t-teszt alapján. A fentiekben ismertetett kísérleti eredmények alapján megállapítható, hogy a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek felhasználhatók a kognitív funkciók zavarának és/vagy neurológiai funkciókieséseknek és/vagy a kedélybeli és mentális zavaroknak a kezelésére olyan betegeknél, akik idegrendszeri megbetegedésekben, mint például Alzehimerkórban, Parkinson-kórban, szenil- vagy multi-infarktusos dementiában, Huntigton-kórban, mentális retardációban vagy myasthenis gravis-ban szenvednek. Bármely olyan módszerrel beadhatók, amely biztosítja, hogy a hatóanyag egy emlős testében érintkezésbe kerüljön, az inhibitálandó anyaggal. Beadhatók tehát bármely, gyógyszerek beadására szokásosan alkalmazott módszerrel és formában, vagy egyetlen terápiás anyagként vagy más terápiás anyagokkal kombinációban. Beadhatók ráadásul önmagukban is, legtöbbször azonban a beadás választott módjától és a szokásos gyógyszergyártási gyakorlattól függően megválasztott hordozóanyagokkal és/ vagy segédanyagokkal készített készítmények formájában történik beadásuk. Az alkalmazott dózis különböző ismert tényezőktől, így például az adott vegyület farmakodinamikai jellemzőitől, beadásának módjától és útjától, a recipiens korától, egészségétől, és súlyától, a szimptómák jellegétől, és mértékétől, az egyidejűleg végzett kezelés jellegétől, a kezelés gyakoriságától és az elérni kívánt hatástól függően változhat. Általában a hatóanyag napi dózisa testtömegkilogrammonként mintegy 0,001-100 mg. Rendszerint az elérni kívánt eredmények biztosítása céljából elegendő testtömcgkilogrammonként napi 0,01 10 mg beadása napi 14 alkalommal vagy késleltetett hatóanyagleadású készítmény formájában. Az internális beadásra alkalmas készítmények (kompozíciók) egységenként mintegy 1-100 mg hatóanyagot tartalmaznak. Ezekben a gyógyászati készítményekben a hatóanyag a készítmény össztömegére vonatkoztatva mintegy 0,5-95 tömeg% mennyiségben jelen lehet. A hatóanyagot beadhatjuk orálisan szilárd készítmények. például kapszulák, tabletták és porok, vagy folyékony készítmények, például elixirek, szirupok és szuszpenziók formájában. Beadható továbbá parenterálisan steril folyékony készítmény formájában, inhalálással nazális spray vagy tüdőinhaláló formájában vagy topikálisan kenőcs, krém vagy borogatóvíz formájában alkalmazható. A zselatinkapszulák a hatóanyag mellett poralakú hordozóanyagokat, például Iaktózt, szacharózt, mannitot, keményítőt, cellulóz-származékokat, magnézium-sztearátot vagy sztearinsavat tartalmaznak. Hasonló hígítóanyagokat használtunk. A sajtolt tabletták előállításához. Mind a tabletták, mind a kapszulák elkészíthetők késleltetett hatóanyagleadású termékekként, hogy biztosítani lehessen több órán át a hatóanyag folyamatos leadását. A sajtolt tabletták cukorral vagy filmmel lehetnek bevonva kellemetlen íz elfedése, illetve a tablettának a légkörtől való megvédése céljából. El lehetnek a tabletták látva úgynevezett enterális bevonattal is, amely a gasztroin-tesztinális traktusban szelektív szétesést tesz lehetővé. Az orális beadásra alkalmas folyékony készítmények a kedvezőbb bevehetőség biztosítása céljából színező és ízesítő komponenseket tartalmazhatnak. A parepterális készítményekhez használható hordozóanyagokra például a vizet, alkalmas olajfélcsége-196 752 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 10
