196713. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyászati és kozmetikai célokra felhasználható állati eredetű szervkivonatok készítésére
1 2 A találmány olyan állati eredetű szervkivonatok készítésére vonatkozik, amelyek nagyobb - a szervezetre káros - fehérjemolekuláktól mentesek és így fehéijementesítés nélkül is közvetlenül felhasználhatók gyógyászati és kozmetikai célokra. Ismeretes a különböző friss vagy szárított állati mirigyek szervek (máj, placenta stb.) vizes kivonatainak felhasználása a gyógyászatban. Az ismeretes eljárások szerint a kivonatokból a nemkívánatos fehérjéket el kell távolítani, ami körülményes és munkaigényes folyamat. Erre a célra például alkoholt, nehézfémsókat, triklór-ecetsavat használnak. A kicsapás után még a kicsapószer feleslegét is el kell távolítani. Hőhatással (melegítés, forralás) való fehéijementesítés esetében pedig rendszerint a hatóanyag egyrésze is elbomlik, így a hatékonyság csökken. A 169 462. sz. magyar szabadalmi leírás szerint vizes mellékpajzsmirigy-kivonatból a fehérjéket triklór•ecetsav felesleg hozzáadásával csapják ki. A triklór-ecetsav feleslegét ezután többszörös éteres extrákdóval távolítják el. A triklór-ecetsav felesleg maradéktalan eltávolításához 17-18-szoros extrakció szükséges. Amennyiben viszont a szervkivonatok n nemkívánatos fehérjéket tartalmaznak, úgy felhasználáskor káros mellékhatások, sokk léphetnek fel. A lépkivonatok előállítása ismert a következő irodalmi közleményekből: Uros J. Ivanovic, Sexuale Reaktionen der Menschen in der Schlafperiode, 1972 Fred. Enke Verlag Stuttgart, 292 old., Solco M.közleménye 40412. Felograf készülék: Çonfon. Neurolog. 27. 1967b, 279-312 old., Anton Hittmair : Physiologie und Pathologie der Milz, 304 old., Anton Hittmair: Handbuch der gesamten Haemotologie V. kötet II. rész (1969 Urban und Schwarzenberg 41 28). Dr. Erdős J. közleményei: Intern. ZTR, Witaminforschung, Arzneimittelforschung, Science, Biochem ZTR. A találmány szerinti eljárás állati eredetű szervkivonatok előállítására gyógyászati és kozmetikai célokra az aprított szerves folyadékkal való extrakciója útján azzal jellemezhető, hogy a friss vagy szárított aprított állati eredetű szervet 0-80 °C közötti hőmérsékleten 2-9 közötti pH-értéken olyan vizes oldószereleggyel extraháljuk, amely egy vagy több hidroxil-csoportot tartalmazó egy vagy több szerves oldószerből áll, a kapott extraktumot szűrjük, adott esetben betöményítjük, majd csírátlanítjuk és/vagy steril szűrésnek vetjük alá. Állati eredetű szervként lépet, nyálkiválasztó mirigyet, májat vagy placentát alkalmazunk. Az elegy pH-értékét sósavval, ecetsawal vagy tejsavval, illetve alkálifém-hidroxid-, hidrogénkarbonát vagy -karbonát oldatul állítjuk be. Az extraháló oldószerelegy 1-25 t% vizet és 99-75 t% szerves oldószert, célszerűen etil-alkoholt, etilén-glikolt,- propilén-glikol, glicerint, szorbitolt vagy ezek elegyét tartalmazza. Az extráktűm csírátlanítására - a szűrt extraktum térfogatára számítva - 0,3-0,7 t% fenolt vagy 0,1-0,5 t% trikrezolt alkalmazunk. Felismertük azt, hogy fehérjementes, csak leépült fehérje fragmenseket tartalmazó szervkivonatok előállíthatók a fehérjék kicsapószerrel való eltávolítása nélkül. A szervkivonatok készítésének ezen új módszerét meglepő módon víz és poláros, illetve apoláros oldószerek kombinációjával sikerül megvalósítani. Az extraháláshoz használt ezen szerves oldószerek a molekulában egy vagy több hidroxil-csoportot tartalmaznak és a kivonatoláshoz ezek közül egy vagy több kombinációja használható fel. Az extrakciós művelet 10-80 °C hőmérsékletek között, hosszabb-rövidebb ideig tartó keverés közben, célszerűen 3-8 pH-értékek között végezhető el. Az extrakcióhoz natúr, friss vagy szárított állati szervek használhatók fel - a friss szerv kellő letisztítása után. Az extrakcióhoz nedves szerv felhasználása esetén 5-25-szőrös vízmennyiség szükséges és a víz mennyiségéhez viszonyítva 1-25 t% oldószer, illetve oldószerkombináció. Szárított szerv kivonatolása esetén (aprított állapotban) 10-25-szörös mennyiségű víz és ehhez viszonyítva 5-25 t% oldószer, illetve oldószerkombináció használandó fel. Az ilymódon kapott kivonatokra jellemző, hogy szulfo-szalicilsawal kicsapható fehérjéket nem tartalmaznak és az ecetsavas próba is negatív. A ninhidrin és biuret reakciók viszont pozitivek, annak jeleként, hogy az extraktumban csak részlegesen lebontott fehérjék vannak jelen. A találmány szerinti eljárással sikerült megoldani az állati eredetű máj,lép, nyálkiválasztó mirigyek, valamint placenta gyakorlatilag fehérjementes kivonatainak előállítását a fehérjék előzetes kicsapása nélkül. A kivonatok hatékonysága az alkalmazás során megfelelően bizonyult, mellékhatások nem mutatkoztak. Kivonatok készítésére alkalmasak az emlős állatok (szarvasmarha, sertés, birka, kecske, ló stb.) szervei friss vagy szárított állapotban. Kivonatolásra legalkalmasabbnak bizonyultak a szerves oldószerek, mint a mono- és polialkoholok (etil-alkohol, etilén-glikol, propilén-glikol, glicerin és szorbitol), illetve ezek elegyei megfelelő vizes hígítással. A nyert kivonatok 0,1-6,0% hatóanyagot tartalmaznak. Csíramentesítésre például fenol vagy trikrezol alkalmazható. Steril szűrés is szükségessé válhat például injekciós oldatok készítésénél. " Általában egyszeres extrakció elégséges a szerv hatóanyagainak kivonására. Bizonyos esetekben az extrahálási művelet megismétlendő azonos vagy csökkentett mennyiségű oldószereleggyel az első extraháláshoz hasonló körülmények között. Az extraháláshoz felhasznált vizes oldószerelegy pH-ja még extrakció előtt lesz beállítva sósavval, ecetsavval vagy tejsavval, illetve híg, körülbelül 5-10%-os alkáli-karbonát vagy -hidroxid oldatokkal. A beállí-. táshoz vegytiszta vegyszereket, illetve azokból készített hígított oldatokat használunk. Kellő koncentráció elérése céljából szükségessé válhat az extraktum térfogatának beszűkítése. Ezt a műveletet csökkentett nyomáson, így vákuumban végezzük. Továbbáfeldolgozási lehetőség a porlasztva szárítás, liofílizálás, dializálás, mindenkor a felhasználásra kerülő formának megfelelően. Az előállított kiszerelési forma lehet:- ampullázott kivonat,- kapszulázott, porlasztva szárított liofilizált kivonat,- mikrokapszulázott, kivonat (folyadék),- mikrokapszulázott, szárított vagy liofilizált kivonat,- injektálható steril készítmény. A fentiek szerint előállított fehérjementes kivonatok hatásterületek szerint várhatóan jó eredménnyel 196.71 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
