196613. lajstromszámú szabadalom • Eljárás előnyösen színes-poliakrilamidgélgyöngyök mikroszuszpenziós polimerizációs úton történő előállítására
7 196 613 8 gél+5 ml puffer), hozzámérjük az anti-T4 immunszérumot, keverés után 1 órát inkubáljuk +4 °C-on. (Az immunszérum mennyisége a titertől függ.) Ezután l-3-(3-dimeti!-amino-propiI)-karbodiimid HC1 megfelelő mennyiségét mérjük a reakcióelegyhez és egy éjszakán át inkubáljuk +4 °C-on. Másnap reggel centrifugáljuk, majd a gélt intenzíven mossuk fiziológiás konyhasó-oldattal (5 6-szor 10-szercs térfogatú oldattal). Végül 0,5 % humán szérum albumin tartalmú barbitál pufferrel mossuk át a gélt, majd barbitál pufferben szuszpendáljuk. (1 g nedves gélt 10 miben). A standard sor és a vizsgálandó szérumminták mérését a következőképpen végezzük: A standardoldatokból (1—6) és a mintákból 20— 20 /ul-t, a tracerből 200 pl-t, a fentiek szerint előkészített inrmunoszorbensből 20—20 jul-t mérünk a csövekbe. Vortex segítségével homogenizáljuk, majd 1 órát inkubáljuk 37 °C-on. Inkubálás után 20 percig centrifugáljuk a csöveket 2000-3000 g-n. A csapadékról a felülúszót leszívjuk és megmérjük az egyes csövek radioaktivitását. Az eredmények értékelését úgy végezzük, hogy a 6 standard oldat beütésszámát ábrázoljuk a standardok T4 koncentrációjának (pg/dl) függvény éhen, s az egyes mintáknál mért cpni értékhez tartozó T4 koncentrációt olvassuk le a görbéről. Szabadalmi igénypont Eljárás — előnyösen színes — 20—200 térhálósítási fokú poliakrilamid kopolimer gélgyöngy mikroszuszpenziós polimerizációs úton történő előállításába, azzal jellemezve, hogy valamely v/o típusú emulziók stabilitására szolgáló emulgeátor apoláris, vízzel nem elegyedő közömbös szerves oldószerrel vagy oldószereleggyel készített 2X10-3 — 3X10-i mol/dm3 koncentrációjú vizes oldatában iniciátorként 0,5 2,0 pmol/100 cm3 vizes fázis N.N.N'.N'-tetrametil-elilén-diamin (TEMED)-oldatol, 0,3—2,0 nmol/ 100 cm3 vizes fázis amnlónium-perszulfát (NH4)2S2 08 oldatot, 1,0-10,0 mol/100 cm3 vizes fázis N,N-metilén-biszakrilamid (BISZ) térhálósítót, valamint a 0,2—0,4 mol/100 cm3 vizes fázis akrilamid mellett 2 15 mól %-ban akrilsavat és adott esetbe a kívánt színerősségtől függően 0,005 —0,0500 g/100 cm3 vizes fázis tisztított vizes színezőanyagokat, előnyösen berilini-kék szolt tartalmazó polimerizálandó elegyet, továbbá pH: 7—9-et biztosító vizes puffer-oldatot, mimellett az apoláris vízzel nem elegyedő közömbös szerves oldószer és a víz aránya 5:1-10:1 — 0 25 °C hőmérsékleten, valamilyen inert gázatmoszférában 1000—1800 fordulat/perc fordulatszámon diszpergálunk, majd 0—50 °C hőmérsékleten 5—10 percig 1000—1800 fordulat/perc, majd 15— 16 percen át 600—1400 fordulat/perc fordulatszámon polimerizálunk, a kapott szerves oldószeres közegfl gélgyöngy diszperziói 80 I00°('-os, adott esetben elektrolitot tartalmazó, vízre öntjük, a kapott vizes közegű gélgyöngy diszerpziót elkülönítjük, vízzel mossuk, majd ismert módon frakcionált ülepítést végzünk és a 3—50 pm tartományba eső éles frakciót elkülönítjük, kívánt esetben töményítjük és adott esetben a kapott színtelen gélgyöngyök belsejében a színezést in situ előállított színezőanyaggal, előnyösen berlini-kékkel, elvégezzük. 5 10 15 20 25 30 35 i nélki 5
