196511. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antigénspecifikus sejtek elválasztására és kimutatására
6 196511 7 ve2ésű sejtvonal, amely kínai hörcsög embrionális vesesejtjeinek tenyészete, valamint a HeLa, amely egy emberi porció epithelból származó sejtvonal, adherencia-jelenséget nem mutat a találmány szerinti módszerben. A 2. ábra az adheráló sejtek számának és az inkubálási idő hosszának összefüggését szemlélteti. Az ábrán az MBP-vel szemben ellenanyagot termelő sejtvonal adherencia-értékeit ábrázoljuk antigénjével (sötét körök), és BSA-val érzékenyitett (üres körök) mikrotitráló lemezekhez az inkubálási idő függvényében, Megállapítható, hogy az antigén-specifikus sejtadherencia időbeli kialakulása az adott körülmények között 20 perc eltelte után maximumot mutat, mig ezt a nem specifikus adherencia nem mutatja. Az ábrán feltüntettük az adatok szórását is. A vizsgálat paraméterei megegyeznek az I. táblázatnál megadottakkal. Az 3. ábra az antigénhez kitapadó sejtek számét szemlélteti, az érzékenyítéshez használt antigén mennyiségének függvényében. Az inkubálást 10 percig végeztük. A kísérlethez MBP-t és vele szemben ellenanyagot termelő sejtvonalat használtunk. A függőleges tengelyen az adheráló sejtek számát, a vízszintes tengelyen az egy mélyületre az érzékenyítés sorén felvitt antigén mennyiségét ábrázoljuk. A kísérlet többi paramétere megegyezik az I, táblázatnál leírtakkal. Látható, hogy a kitapadó sejtek száma arányos a felületre felvitt antigén menynyisé gével. A fentiekből megállapítható, hogy a találmány szerinti antigén-specifikus adherencién alapuló módszer ellenanyag-termelő sej- 5 tek esetén alkalmazható, specifikus antigénjük jelenlétében. Így a módszer alkalmas a specifikus ellenanyag-termelő sejtek kimutatáséra és a specifikus ellenanyagot termelő sejtek elválasztására, a specifikus ellenanya-10 got egyáltalán nem termelő, vagy a nem specifikus ellenanyagot termelő sejtektől. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 15 1. Eljárás antigénspecifikus sejtek elválasztására és kimutatáséra műanyag-felületen végzett antigén-antitest reakcióval, azzal jellemezve, hogy a szeparálandó, specifikus el-2Ű lenanyagot termelő sejteket tartalmazó elegyet a megfelelő műanyag lemezre felvitt antigénnel hozzuk érintkezésbe. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az antigént tartalmazó, és 2® indifferens fehérjével telített műanyag lemezt alkalmazunk. 3. Eljárás monoklonélis antitestet termelő sejtek előállítására immunizált állat lépéből vagy nyirokcsomóiból nyert sejtek és tumor-2® sejt-vonal fúziójával, azzal jellemezve, hogy a fúzió során a lépből vagy nyirokcsomóból származó sejtekből műanyag-lemezre felvitt antigénnel szeparált, a specifikus ellenanyagot termelő sejteket alkalmazunk. 35 5 ábraoldal A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 89.1258.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkö István vezérigazgató 5
