196464. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás 1,2-dehidro-szteroidok előállítására
14 196464 15-béta,ll-béta-epoxi-16-alfa,21-dihidroxi-pregn-l,4-dién-3,20-dion 9. 21-acetoxi-9-béta,ll-béta-epoxi-16-al- • fa,17-dihidroxi-pregn-l,4-dién-3,20-dion-16,17-acetonid. 5 7. példa ll-béta-Hidroxi-androszta-4-én-3,l 7-dion io biokon verziója A 2. példában leirt módon elkészített szárított A. simplex sejt 1 grammját 100 ml 50 mmól-os, pH = 7,5-ös foszfát pufferben 15 szuszpendáljuk, majd 3A etanolban (2-3% metanollal denaturált etanolban) oldott menadiont adtunk hozzá 86 mg/1 végső koncentráció eléréséig. Fél gramm 11-béta-hidroxi-androsztén-diont adtunk ezután az elegyhez, 20 majd forgó keverőben 31 °C hőmérsékleten inkubáltuk. Egy napi inkubálás után vékonyrétegkromatográfiásan vizsgálva az elegy metilén-kloridos extraktumát, két terméket figyeltünk meg. A szteroidnak kb. 95%-a 11- 25 -béta-hidroxi-androszta-l,4-dién-3,17-dion formájában volt jelen. A maradék átalakulatlan szubsztrát volt. 30 8. példa > A 7. példa szerinti módon eljárva a következő androsztén-dion származékokból kiindulva az alábbi 1-dehidrogénezett terméket 35 kaptuk: Szubsztrátum -----5- Termék 1. H-béta-hidroxi-16-béta-metil-androszta- 40-4-én-3,17-dion-----ll-béta-hidroxi-16-béta-metil-androszta-ll4-dién-3,17-dion 2. ll-béta-hidroxi-16-alfa-metil-androszta-4-én-3,17-dion------y 45 ll-béta-hidroxi-16-alfa-metil-androszta-l,4-dién-3,17-dion 3. 6-alfa-fluor-ll-béta-hidroxi-androszta-4-én-3,17-dion-----y 6-alfa-fluor-ll-béta-hidroxi-androszta- 50 -l,4-dién-3,17-dion 4. 6-alfa-metil-ll-béta-hidroxi-androszta-4--én-3,17-dion-----y 6-alfa-metil-ll-béta-hidroxi-androszta-l,4-dién-3,17-dion • 5. ll-alfa-hidroxi-androszta-4-én-3,17--dion----->-ll-alfa-hidroxi-androszta-l,4-dién-3,17- • -dión 6. androszta-4-én-3,ll,17-trion---androszta-lI4-dién-3,ll,17-trion. Az 1,2-dihidro-szteroidok felhasználása jól ismert. Például a 3 284 447 számú USA- beli szabadalmi leírás szerint az aM.9<iO-pregnén-triének a 16. szénatomon helyettesített diuretikus kortikoszteroidok szintéziséhez használhatók fel. A 4 041 055 számú USA-beli szabadalmi leírás kortikoszteroidok szintézisét írja le ali4-androsztén-dion származékból, ezáltal bizonyítva azt, hogy az 1,2- -dihidro-androsztének fontos intermedierek gyógyászatilag hasznos szteroidok előállításában. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás pregnán- vagy androsztánvázas l,2-telitett-3-keto-szteroidok 1,2-dehidro-szteroidokká való átalakítására, azzal jellemezve, hogy az 1,2-telített szteroidokat legalább 40 °C hőmérsékleten hővel szárított, Arthrobacter vagy Bacillus nemzetségbe tartozó 1-dehidrogénezö mikroorganizmus sejtekkel alakitjuk át. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hővel szárított mikrobiális sejtek 1-10% nedvességet tartalmaznak. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 1-dehidrogénezó mikroorganizmusként Arthrobacter simplext vagy Bacterium cyclooxydans-t alkalmazunk. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az 1,2-telitett szteroidokat a hővel szárított 1-dehidrogénezö mikroorganizmusok bakteriális sejtjeivel egy exogén elektron átvivő anyag jelenlétében alakitjuk át. 5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy exogén elektron átvivő anyagként 2-metil-l,4-naftokinont, fenazin-metoszulfátot, diklór-fenol-indofenolt, 1,4- -naftokinont, 2-metil-l,4-naftokinon-biszulfitot, ubikinonokat (Koenzim Q) vagy K-vitamin típusú vegyületeket alkalmazunk. 1 rajz A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 89.1253.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkő István vezérigazgató 9
