196462. lajstromszámú szabadalom • Eljárás imun interferon előállítására
22 196462 23 fi. táblázat. A 15K és 18K CNBr C-terminális peptidjei 15K 18K Thr 0.9 (1) Ser 1.1 (1) 0.84 (1) Glu 1.1 (1) 1.1 (1) Pro * (1) Gly 1.5 (1) 1.3 (1) Alá 2.4 (3) 1.1 (1) Leu 1.0 (1) 1.1 (1) Phe 1.0 (1) Lys 1.9 (2) 2.8 (3) Helyzetek a szekvenciában 121-131 138-146 A zárójelben levő számok a DNS szekvencia várható maradékok számát jelentik. * az értékeket nem határoztuk meg. A leírásban szereplő irodalmi utalásokat az alábbiakban részletezzük: 1. Gray, P. W., et al., Nature 295, 503-508 (1982) 2. Stahelin, T., et ah, J. Bioi. Chem. 256, 9750-9754 (1981) 3V Allan, G., Sequencing of Protein and Peptides, pp. 30-31 (1981), North-Holland Publishing Co., Amsterdam, New York 4. Amber, R. P., Methods in Enzymology 11, 436-445 (1967) 5. Wolfe, R. A. and Stein, S., Modern Methods in Pharmacology, pp. 55-77 (1982, Alan R, Liss, Inc. New York, NY.) 6. Stein, S. and Brink, L. Methods in Enzymology, 79, 20-25 (1981) 7. Hewick, R. M., Hunkapillar, M. W., Hodd, L. E. and Dreyer, W. I. J. Bioi. Chem. 256, 7990- -7997 (1981) 8. Hawke, D., Yuan, P-M., and Shively, J. E. Anal. Biochem. 120, 302-311 (1982) 9. Laemmli, U. K., Nature 227, 680-685 (1970) 10. Rubinstein, S., Familletti, P. C. and Pestka, S., J. Virol. 37, 755-758 (1981). SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás Cys Tyr Cys Gin Asp Pro Tyr Val Lys Glu Ala Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Alá Gly His Ser Asp Val Alá Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile Leu Lys Asn Trp Lys Glu Glu Ser Asp Arg Lys He Met Gin Ser Gin Ile Val Ser Phe Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gin Ser Ile Gin Lys Ser Val Glu Thr lie Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gin Arg Lys Ala He His Glu Leu Ile Gin Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Ala Lys Thr Gly Lys Arg Lys Arg Ser Gin Met Leu Phe Arg Gly Arg Arg Ala Ser Gin szekvenciájú intakt rekcmbináns humán immun interferon extrakciójára a fenti fehérjét tartalmazó transzformált mikroorganizmusokból, azzal jellemezve, hogy a transzformált mikroorganizmust valamely proteáz inhibitorral extraháljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy proteáz-inhibitorként guanidin-hidrokloridot alkalmazunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a . transzformált mikroorganizmust a guanidin-hidroklorid oldatában szuszpendáljuk. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy legalább 4 mól/liter koncentrációjú guanidin-hidroklorid-oldatot algg halmazunk. 5. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a transzformált mikroorganizmus preparátumot a proteáz inhibitorral történő kezelés után felülúszó gg frakcióra és sejtmaradvány frakcióra választjuk szét, és a felülüszó frakcióból nyerjük ki a humán immun interferont. 3 rajz A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 89.1253.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkő István vezérigazgató 13
