196461. lajstromszámú szabadalom • Eljárás immun interferon előállítására és tisztítására, valamint ezt tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
24 196461 25 5. Wolfe, R.A. and Stein, S., Modern Methods in Pharmacology, pp. 55-77 (1982), Alan R, Liss, Inc. New York, NY. 6. Stein, S. and Brink, L. Methods in Enzymology, 79, 2U-25 (1981) 7. llewick, R.M., Hunkapillar, M.W., Hodd, L.E. and Dreyer, W.I., J. Biol. Chem. 256, 7990-7997 (1981) SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás Cys Tyr Cys Gin Asp Pro Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Val Ala Asp Asn Gly Thr Lys Asn Trp Lys Glu Glu Gin Ser Gin Ile Val Ser Lys Asn Phe Lys Asp Asp Val Glu Thr Ile Lys Glu Phe Asn Ser Asn Lys Lys Lys Leu Thr Asn Tyr Ser Gin Arg Lys Ala Ile His Alá Glu Leu Sex-Pro Ala Lys Arg Ser Gin Met Leu Ser Gin aminosav-szekvenciéjú - amely szekvencia az amino-végcsoporton adott esetben további metionin-maradékot tartalmazhat -, proteolitikus fragmentjeitől mentes intakt rekombináns humán immun interferon előállítására a fenti fehérjét tartalmazó transzformált mikroorganizmusokból, azzal jellemezve, hogy az intakt rekombináns humán immun interferont a transzformált mikroorganizmusokból valamely proteáz-inhibitorral extraháljuk és a kapott extrahált interferont monoklonális anti-test felhasználásával tisztítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy proteáz-inhibitorként valamely guanidinium-sót alkalmazunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy proteáz-inhibitorként guanidin-hidrokloridot alkalmazunk. Cys Tyr Cys Gin Asp Pro Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Val Ala Asp Asn Gly Thr Lys Asn Trp Lys Glu Glu Gin Ser Gin Ile Val Ser Lys Asn Phe Lys Asp Asp Val Glu Thr Ile Lys Glu Phe Asn Ser Asn Lys Lys Lys Leu Thr Asn Tyr Ser Gin Arg Lys Ala Ile His Ala Glu Leu Ser Pro Ala Lys Arg Ser Gin Met Leu Ser Gin 8. Hawke, D., Yuan, P-M., and Shively, J.E. Anal. Biochem. 120, 302-311 (1982) 9. Laeinmli, U.K., Nature 227, 680-685 (1970) 10. Rubinstein, S., Familletti, P.C. and l'est-ka, S., J. Virol. 27, 755-758 (1981). 10 Tyr Val Lys Glu Ala Glu Asn Ala Gly His Ser Asp Leu Phe Leu Gly Ile Leu Ser Asp Arg Lys Ile Met Phe Tyr Phe Lys Leu Phe Gin Ser Ile Gin Lys Ser Asp Met Asn Val Lys Phe Lys Arg Asp Asp Phe Glu Val Thr Asp Leu Asn Val Glu Leu Ile Gin Val Met Ala Lys Thr Gly Lys Arg Phe Arg Gly Arg Arg Ala 4. A 2. vagy 3. igénypont szerinti eljá-ras, azzal jellemezve, hogy a guanidinium-só oldatát alkalmazzuk. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a transzformált mikroorganizmust guanidin-hidrokiorid oldatában szuszpendáljuk. 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy legalább 4 mól/liter koncentrációjú guanidin-hidroklorid-oldatot alkalmazunk. 7. Az 5. vagy 6. igénypont szerinti eljárés, azzal jellemezve, hogy 1 g transzformált mikroorganizmusra vonatkoztatva legalább 3 térfogat guanidiniumsó-oldatot alkalmazunk. 8. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti eljárással előállított Tyr Val Lys Glu Ala Glu Asn Ala Gly His Ser Asp Leu Phe Leu Gly Ile Leu Ser Asp Arg Lys Ile Met Phe Tyr Phe Lys Leu Phe Gin Ser Ile Gin Lys Ser Asp Met Asn Val Lys Phe Lys Arg Asp Asp Phe Glu Val Thr Asp Leu Asn Val Glu Leu Ile Gin Val Met Ala Lys Thr Gly Lys Arg Phe Arg Gly Arg Arg Ala 14