196459. lajstromszámú szabadalom • Eljárás neomycin előállítására
10 196459 11 A beoltott főfermentációt 240-260 fordulat/perc sebességgel mozgó 3,2-3,4 cm kitérésű sikszita-elven működő rázóasztalon 500 ml-es Erlenmayer tenyésztő lombikokban, lombikonként 50 ml fermentlével 32 °C-on, 80% oldott oxigénszint mellett 160 óráig tenyésztjük. A neomicin képződése a következő volt: A fermentáció kora Neomicin (óra) (ug/ml) 96 96 9.600 120 ' 15.700 144 20.900 160 22.100 A fermentlé egy literére vonatkoztatva 14,2 g neomicin-szulfátot nyertünk ki, amelynek kémiai hatóanyagtartalma: 99% biológiai hatóanyagtartalma (NE/mg): 680 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás neomicin előállítására Streptomyces fradiae törzs süllyesztett fermentációjával, 0,2-0,5% össznitrogénnek megfelelő nitrogénforrást és 6,0-10,0% keményitőtartalomnak megfelelő szénforrást tartalmazó táptala- 30 jón, amelyben levegőztetéssel a telítési értékre számított 2-100% oldott oxigénszintet biztosítunk és a fermentációt 30-36 °C-on, előnyösen 32-34 °C-on, 120-160 óráig folytatjuk, majd a fermentléböl a neomicint ismert 35 módon kinyerjük, azzal jellemezve, hogy a fermentációhoz MNG-00313 szám alatt deponált Streptomyces fradiae NR-8/51 jelű mutáns vagy annak neomicint termelő valamely mutánsát vagy variánsét használjuK. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy 2-10%-os oldott oxigénszint mellett a táptalajban 0,20-0,35%, előnyösen 5 0,27% össznitrogénnek megfelelő nitrogénforrást és 6,0-8,0%, előnyösen 7,0% keményítőtartalomnak megfelelő szénhidrátforrást alkalmazunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal 10 jellemezve, hogy 100%-os oldott oxigénszint mellett a táptalajban 0,35-0,5%, előnyösen 0,43% össznitrogénnek megfelelő nitrogénforrést és 7,0-10,0%, előnyösen 8,0% keményítőtartalomnak megfelelő szénhidrátforrást al- 15 kalmazunk. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy nitrogénforrósként ammóniumsót és/vagy fehérjetartalmú magvak lisztjét, célszerűen szójalisztet 20 alkalmazunk. 5. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy szénforrásként keményítőt és/vagy keményitótartalmú magvak lisztjét, célszerűen kukoricalisz-25 tét és mono- vagy oligoszacharidot, célszerűen glükózt alkalmazunk. 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a szénforrásként alkalmazott keményítőt vagy keményítő tartalmú magvak lisztjét ásványi savakkal vagy amilolitikus enzimekkel részben hidrolizáljuk olyan mértékben, hogy a hidrolízis előtti redukálóérték legfeljebb 5-6-sz.orosára növekedjen. 7. Az 5-6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a szénforrásként használt glükózt és keményítőt 1 : 3,0-6,0 eí'nyösen 1 : 3,5-4,0 arányban alkalmazzuk. rajz nélkül A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 89.1252.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkó István vezérigazgató 7
