196456. lajstromszámú szabadalom • Eljárás permanens állati és humán sejtvonalak előállítására
18 196456 19 héttől kezdve voltak láthatók limfoid sejtek kolóniái, amelyek nagysága folytonosan nőtt. Humán immunglobulin termelése: A fúzió utáni 21. napon a tenyészetfelülúszókat (a 19. napon teljes táptalaj-cserét hajtottunk végre) 5 megvizsgáltuk emberi immunglobulin-tartalomra. Az' eredményeket a 2.a és 2.b táblázatok mutatják. 2.a táblázat 10 1 2 3 4 5 6 B 103 264 229 253 271 260 C 045 343 370 128 150 126 D 171 173 141 116 218 699 II-HAT ELISA-teszt humán-immunglobulin kimutatására tenyészet-felülúszókban (karioplaszt-fúzió, 21 nappal fúzió után). I + HAT 1 2 3 4 5 6 A 029 147 286 147 228 270 B 171 086 050 144 846 121 C 118 156 250 082 179 059 D 120 1148 024 096 023 151 II + HAT 1 2 3 4 5 6 A 135 290 107 279 530 674 B 116 500 469 315 315 627 C 120 050 068 159 226 145 D . 191 078 686 110 242 561 I-HAT 1 2 3 4 5 6 A 660 233 175 270 410 322 1 2 3 4 5 6 A 381 235 489 514 608 217 B 348 239 214 158 367 163 C 185 275 235 234 322 316 D 219 202 292 283 220 052 25 2.b táblázat. Citoplaszt-fúzió, 21 nappal fúzió után. 1 2 3 4 5 6 A 052 627 917 B 041 326 715 C 071 400 826 0889 D 079 917 494 1016 40 t 'T T 12 3 1 = mag-kontroli tenyészet 2 = HAT-tal 3 = HAT nélkül. Ha a 0-tól 99-ig terjedő extinkcióértéke^ két negatívnak illetve kétségesnek tekintjük, a 100-200-ig terjedő értékeket pozitívnak, a >20C értékeket erősen pozitívnak, akkor a magfúzióval nyert tenyészetekre a kővetkező megoszlást kapjuk: Mag-limfocita-hibridek. Tenyésztve ELISA-teszt humán-immunglobulinra negatív pozitív erős pozitív n 11 18 19 HAT-tal (n = 48) (%) (23) (37) (40) -n 2 12 34 HAT-nélkül (n = 48) (%) (4) (25) (71) 11
