196455. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyhatású peptideket adó transzformánsok előállítására
2 196455 3 A találmány tárgya eljárás új, fiziológiailag aktív peptidek előállítására, amelyek kiváló fiziológiás aktivitása vírusellenes hatásban, sejtburjánzást gátló hatásban és az NK (természetes .gyilkos”) sejt aktivitást fokozó hatásban nyilvánul meg. A jelen találmány tárgya eljárás olyan transzformánsok előállítására, amelyek (1) általános képletű új, fiziológiailag aktiv peptideket termelnek: JX3 (I)- ahol a JXa (I) általános képletben J jelentése metionil ciszteinil izoleucil valil leucil glicil szeril leucil glicil ciszteinil tirozil cisztein csoport, ciszteinil izoleucil valil leucil glicil szeril leucil glicil ciszteinil tirozil cisztein csoport, ciszteinil tirozil cisztein csoport vagy hidrogénatom, Xs jelentése (II) képletű csoport, amelynek összetétele Gin Asp Pro Tyr Val Lys Glu Alá Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Alá Gly His Ser Asp Val Ala Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile Leu Lys Asn Trp Lys Glu Glu Ser Asp Arg Lys lie Met Gin Ser Gin He Val Ser Phe Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gin Ser Ile Gin Lys Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gin Arg Lys Ala Ile His Glu Leu Ile Gin Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Alá Lys Thr Gly Lys Arg Lys Arg Ser Gin Met Leu Phe Arg Gin Arg Arg Ala Ser Gin, ahol Gin jelentése glutamin-csoport, Asp jelentése aszparaginsav-csoport, Pro jelentése prolin-csoport, Tyr jelentése tirozin-csoport, Val jelentése valin-csoport, Lys jelentése lizin-csoport, Glu jelentése glutaminsav-csoport, Alá jelentése alanin-csoport, Asn jelentése aszparagin-csoport, Leu jelentése leucin-csoport, Phe jelentése fenilalanin-csoport, Gly jelentése glicin-csoport, His jelentése hisztidin-csoport, Ser jelentése szerin-csoport, Thr jelentése treonin-csoport, Ile jelentése izoleucin-csoport, Trp jelentése triptofán-csoport, Arg jelentése arginin-csoport és Met jelentése metiönin-csoport, vagy olyan (I) általános képletű peptidek előállítására, amelyekben a karboxil-végtől számított 121., 126., 127., 133., 150. vagy 151. aminosavak közül legalább kettő hiányzik, vagy a karboxil-végtől számított 121., 126., 127., 133., 136., 150. vagy 151. aminosavak közül legalább kettőhöz glicin kapcsolódik. Jelenleg antimetabolitokat, alkilezó ágenseket, antibiotikumokat és hasonlókat alkalmaznak virus-ellenes vagy sejtburjánzást gátló ágensként, de ezeknek az a hátránya, hogy toxicitásuk nagy. Következésképpen kis toxicitású vírus-ellenes vagy sejtburjánzást gátló ágensek kifejlesztésére igen nagy az igény. A közelmúlban az oC-interferonnal (IFN-oC) és ß-interferonnal (IFN-ß) végzett kutatások segítségével jelentős haladást értek el, mivel ezek kis toxicitású vírusellenes ágensként hatásosak. Az IFN-oC és IFN-ß sejtburjánzást gátló hatása azonban nem kielégítő. Másrészt a ^-interferonnal (IFN-'x) végzett kutatások nem haladtak előre olyan jelentősen, mint az IFN-c<-val és az IFN-/3-val végzett kutatások. Az Interferon-kutatás II. Évenként Nemzetközi Kongresszusán (Second Annual International Congress for Interferon Research) (1981 október, San Francisco, Egyesült Államok) David V. Goeddel (Genentech Inc., Kalifornia, Egyesült Államok), bár az IFN-^-t nem izolálta, beszámolt a pro-IFN-2, az IFN-í és az IFN-í-szerű peptidek mindegyikének aminosav-szekvenciá járói, amelyet az IFN-^ hírvivő (messenger) RNS (.niRNS”) komplementer DNS-ének (.cDNS”) dezoxinukleotid-szekvenciájából következtetett ki. A pro-IFN-í, IFN-^ és IFN-^-szerü peptid mindegyikének aminosav-szekvenciáját ismertetjük később. A fentemlített kongreszszuson arról is beszámoltak, hogy az IFN-í-szerű peptidet kódoló génnel rendelkező sejt tenyészete vírus ellenes hatást mutat, a prc-IFN- <-t kódolo génnel rendelkező sejt tenyészetének előállítását viszont eddig még nem sikerült megoldani. A fentebb vázolt helyzet ismeretében extenzív és intenzív kutatásokat folytattunk olyan fiziológiailag aktív ágensek kifejlesztésére, amelyeknek nem csupán kiváló vírusellenes aktivitásuk van, de kiváló hatást mutatnak a sejtburjánzás ellen, valamint növelik az NK-sejtek aktivitását is. A kutatások eredményeként meglepő módon azt tapasztaltuk, hogy az (I) általános képlettel jellemezhető peptidek nemcsak a fentemlitett fiziológiai aktivitásokban kiválóak, hanem toxicitásuk is kicsi. A jelen találmány ezen az új tapasztalaton alapszik. A jelen találmány tárgya tehát eljárás új, fiziológiailag aktív ágensek előállítására, amely ágensek nemcsak kiváló vírusellenes hatással, hanem sejtburjánzást gátló hatással és NK sejt aktivitást növelő hatással is rendelkeznek. A jelen találmány egyéb tárgyai és előnyei az ezt követő részletes leírásból és az ezekkel összhangban levő igénypontokból lesznek nyilvánvalóak. A jelen találmánnyal összhangban eljárást ismertetünk transzformánsok előállítására, amelyek (I) általános képletű peptideket állítanak elő: JX3 (I)- ahol a helyettesitők jelenlese a korábban megadott -5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
