196450. lajstromszámú szabadalom • Textíliák érdes tapintását csökkentő detergens adalék és detergens készítmény
4 196450 5 Az Agric. Bioi. Chem., 44 (3), 481-487, 1980. közleményben, és ugyanitt a 44 (8), 1721-1728, 1980. közleményben olvashatjuk, hogy a Humicola insolens cellulázt termelő termofil gomba. Ugyancsak olvashatjuk, hogy a Humicola insolens által termelt celluláz pH-optimuma 5,3, illetve egy másik enzimé 5,0. Ezek szerint e celluláz enzimek az 1 368 599 számú brit szabadalmi leírásban ismertetett cellulázok csoportjába tartoznak, és igy nem lennének alkalmasak a találmány céljára történő alkalmazásra. Ennek ellenére úgy találtuk azonban, hogy a Humicola insolens meglepő módon a találmány céljának megfelelő cellulázt termel. A találmány szerinti Humicola insolens a termofil Humicola nemhez tartozik, a nemhez tartozik a Humicola insolens és a Humicola var. thermoidea, a két faj között a taxonómiai távolság igen kétséges. A Cx celluláz-aktivitást azon az alapon határozzuk meg, hogy a celluláz hidrolizálja a karboxi-metil-cellulózt, a hidrolízist követően szénhidrátok keletkeznek; a redukálóképességet kolorimetrikusan határozzuk meg a ferri-cianid reakció segítségével (lásd Hoffman, J. Bioi. Chem., 120, 51, 1937). A Cx celluláz-aktivitást karboxi-metil-cellulóz szubsztráttal szemben mérjük (CMC Hercules, 4 M6F). A mérési körülmények a következők: pH 9,50; pufferként 0,1 mólos trisz-(hidroxi-metil)-amino-metánt (triszt) használunk; a szubsztrát 4 g CMC/liter, az oldatot a fenti pufferrel készítjük; az inkubációs hőmérséklet 50 °C, az inkubációs idő 20 perc. Egy Cx celluláz-aktivitás egységet reprezentál az a celluláz mennyiség, amely a fenti körülmények között percenként 1 ekvivalens redukáló cukortól 1 jumól glukózig terjedő mennyiségű monoszacharidot képes előállítani. A találmány szerinti eljárás egy előnyös kivitelezési változata szerint az érdes tapintást csökkentő szer cellulázának előállítására a Humicola DSM 1800 törzset használjuk. Úgy találtuk, hogy ez a törzs alkalikus cellulázt termel, ennek Cx-aktivitása alkalikus pH-értékeken magas. Az új Humicola törzset a Commonwealth Mycological Institute, Kew, Anglia szakemberei határozták meg Humicola insolens-ként. Az új törzset 1981. 10. 01-én letétbe helyeztük a German Collection of Microorganisms (DSM, Deutsche Sammlung von Mikroorganismen) törzsgyűjteményében, Göttingen, Németország, ahol a törzs a DSM 1800 sorszámot kapta. Az alábbiakban megadjuk az új Humicola törzs (DSM 1800) morfológiai és élettani tulajdonságait. Pázsit: rövid; a micélium kezdetben fehér, később sötétszürkévé vélik, a sötétszürke felületen fehér foltok láthatók; a hifa színtelen, sima, körülbelül 2,8 ju átmérőjű szeptumok láthatók rajta. Esetenként színtelen vizcseppek figyelhetők meg. Hátoldal: sárga színű, ez a szín a tenyészet öregedésekor barna: sötétszürkévé válik. Aleurióspórák: simák; színük barna; egyesével állnak az egyszerű vagy több részből álló terminális konidiumtartókban; alakjuk: globóz, méretük 12,6-16,8 p; időnként alakjuk szubglobóz, méretük ekkor 7 x 11,2-14 x 16,8 p. Apikulusz jelen van. Klamidóspórák: egyesével vagy láncokban állnak; felületük sima; szinük barna, és méretük 11,2-16,8 p. Fialókonidiák: nem figyelhetők meg. Hőmérséklet-limit: 26 °C hőmérsékleten nem növekszik; jól növekszik 37-50 °C-on. A telepek 37 °C-on növesztve 5 nap múlva 8 cm átmérőjüek. A fenti megfigyeléseket 37 °C-on való, 5 napon ét tartó növesztést kővetően végeztük, a növesztés YPSS agaron történt. Ennek összetétele a következő: Élesztőkivonat (Difco) 4,0 g Dikálium-hidrogén-foszfát 1.0 S Magnézium-szulfát . 7 viz 0,5 g Oldható keményítő 15,0 g Desztillált viz 1000 : ml agar 15,0 g Meglepő módon úgy találtuk, hogy a Humicola insolens DSM 1800 törzzsel termelt celluláz lágyító hatása mellett erőteljes szennylazitó és újraszennyezést-gátló hatással rendelkezik. Ezt a hatást különböző módon figyelhetjük meg a gyapottartalmú szál természetétől függően. Fehér szál esetén elsődlegesen az figyelhető meg, hogy a színes szennyezés, például az olívaolajban oldott koromszemcsék lényegesen nagyobb mértékben távolíthatók el, ha a celluláz-terméket alkalmazzuk. Ez a fényvisszaverés növekedésével mérhető (.whiteness'). Fekete vagy sötétszinű szálak esetén elsődlegesen az figyelhető meg, hogy a színek élénkebbek és kevésbé szürke tónusúak lesznek, ha a cellulázterméket használjuk. Ez annak következménye, hogy az anyag felületén elhelyezkedő gyapotbolyhok fizikai szerkezetében kisebb mértékű változás következik be. Ez a szürke árnyalatot csökkentő hatás pl. sötét anyag esetén, a fényvisszaverés csökkenésével mérhető (whiteness). A találmány szerinti eljárás egyik előnyős kivitelezési változata szerint a gombából nyert cellulázzal kiváltható érdes tapintást csökkentő hatást fokozzuk azzal, hogy olyan celluláz-frakciót használunk, amely maga nem kötődik 6,5 és 7,5 közötti pH-értéken anioncserélóhöz. Ahogy azt a későbbiekben részletesen ismertetjük (1., 6. példák), úgy találtuk, hogy az a celluláz frakció rendelkezik a legerőteljesebb, durva tapintást csökkentő képességgel, amely 6,5 és 7,5 közötti pH-értéken nem kötődik anioncserélóhöz (a rövidség kedvéért a következőkben ezt a 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
