196354. lajstromszámú szabadalom • Eljárás protozoa-ellenes hatású vegyületek és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
13 '96 354 14 6. példa 2-Hidmxi-3-{4'-tacicr-peniii-eiklohcxil)-1,4-naJiokimm előállítása Az 1. példában ismertetett módon 2-hidroxi-3-(4'-tercier-pentil-ciklohexil)-l ,4-naftokinont állítottunk elő, op.79—81 °C. Az NMR-spcktroszkópíás vizsgálat alapján a cisz- és a transz-izomer aránya 2:3 volt. A 2-klór-3-(4’-tercier-pentil-ciklohexil)-I,4-na(tokinon közbenső termék viszkózus olaj volt. Hozam: 17 %. elpárologtatjuk és a kapott narancsbama színű terméket szilikagclen történő kromatografálással tisztítjuk Ily módon 0,9 cím szerinti vegyületet (az elméleti hozam 45 %-n) kapunk, sárga színű szilárd termék alakjában; op. 180-181 °C. 9. példa 2-(Helyettesílell-ciklohexil)-3-hidroxi-naftokinonszármazékok aktivitása Plasmodium falciparummal szemben 7, példa A cisz-2-(4'-terder-butU-ciklohexil)-3-hidroxi-l,4- -najtokinon epimerízálása 10 g 2-(4'-tercier-butil-ciklohexil)-3-hidroxt-l,4-naftokinont (a cisz- és a transz-izomer mintegy 1:1 arányú elegye, amelyet az 1. példa szerint állítottunk elő) MM) ml tömény kensavban oldottunk, cs az oldatot az egyes párhuzamos kísérleteknél az alábbiakban megadott különböző hőmérsékleten tartottuk különböző ideig. A reagáltatás befejezése után az elegyet iehűtöttük, s jég és víz keverékébe csepegtettük. A kivált nyers terméket átkristályosítással és/vagy oszlopon végzett kromatografálással tisztítottuk a fentebb ismertetett módon. A termékben jelenlevő izomerek arányát NMR-spektroszkópiás vizsgálattal és gáz—folyadékkromatográfiával határoztuk meg. A kapott eredményeket az alábbiakban mutatjuk be. Hőmérséklet Idő A transz/cisz-izomerek (°C) aránya Hőmérséklet (°C) Idő A transz/cisz-izomerek aránya 50 96 óra 93:7 56 24 óra 96,5:3,5 56 24 óra 97,7:2,3 (átkristályosítva) 70 4 óra 92,0:8,0 70 6 óra 97,8:2,2 70 6 óra 99,2:0,8 (átkristályosítva) 70 21 óra 99,4:0.6 70 % 21 óra 99,9:0,1 (átkristályosítva) 8. példa 2-{transz-4-terc-bitlil-cikloliexil-mciil)-3-hidroxi-1,4-naftokinon előállítása 15 20 25 30 35 40 Megvizsgáltuk a (Vili) általános képletű vegyületeknek a Plasmodium falcipariumra gyakorolt gátló hatását [a vizsgált (VIH) általános képletű vegyületek (I) általános képletű vegyiileteket is magukba foglaltak]. A vizsgálathoz alkalmazott módszer Desjardins és munkatársai eljárásának módosítása volt [Antimicrob. Agents and Chemotherapy, 16 710-718 (1979)]. A vegyületeket etanolban oldottuk 100 mg/liter koncentrációban, és hígításokat készítettünk egészen 1 mg/liter koncentrációig. Az oldatokat sorozatban hígítottuk RPMI 1640 táptalaj és 10 % emberi plazma alkalmazásával mikrotitráló lemezeken. A hígított oldatokhoz a parazitákkal megfertőzött és friss vörösvérsejteket adtunk G3H-hipoxantinnal együtt, 10 % emberi plazmát tartalmazó RPMI 1640 táptalajban, és a tenyészeteket 36 órán át ínkubáiluk. A képződött tenyészeteket összegyűjtöttük, a szilárd részecskéket üvegszálas szűrőpapíron szűrtük és vízzel alaposan mostuk. A szűrőpapírokat megszárítottuk, és megmértük a radioaktivitásukat szcintillációs számláló segítségével. Kontrollként a vegyületekkel nem kezelt, de megfertőzött, valamint a vegyületekkcl nem kezelt cs nem is fertőzött tenyészeteket használtuk. összefüggést állítottunk fel a gátiás százalékos érteke és a dózis között, s ilyen módon meghatároztuk az F,D50 értékét. A kapott eredményeket az 1. táblázatban mutatjuk be. /. táblázat 45 50 55 Ra EDS0 (M) 4'-ciklohexil- (100 % transz-izomer) 4'-rnctil- (100% transz-izomer) 3'-lcrciei-bulil- (80 % transz-izomer) 4'-tcrcier-butil- (50 % transz-izomer) 4’-tercier-butil- (75 % transz-izomer) 4'-tercier-butil- (80 % transz-izomer) 4'-tercier-butil- (100 % transz-izomer) 4'-tercier-butíl- (100 % cisz-izomer) 4'-tercier-pentil- (60 % transz-izomer) 4'-tercicr-butil- (100 % cisz-izomer) 4,05 xlO“9 9,2 x 10~9 3.0 x I0~7 5,99 xlO~10 5,63x10-" 3,75x10“" 5,71x10-" 1.08 xlCT9 6.0 xl(T" 1.08 xl (r9 2,0 g 2-(transz-4-terc-butil-cikIohexii-metil)-l,4- -naftokinon-2,3-oxidot 100 ml metanollal denaturált ipari szeszben visszafolyatással történő forralással ölelünk cs 5 ml tömény sósavat adunk hozzá. Az oldat eközben megsárgul; a reakció előrehaladását vékonyréteg-kromatográfiai vizsgálattal (szilikagélen, toluollal) ellenőrizzük. Három óra elteltével az oldószert Az: tapasztaltuk, hogy a menokton [2-(8-ciklohexíl~oktíI)-3-hidroxi-l,4-naftokinon] EDS0-értéke 2,55 X 60 x 10~7. A kapott eredmények azt mutatják, hogy az (1) általános képletű új vegyületek lényegesen hatékonyabbak az emberen élősködő Plasmodium falciparummal szemben, mint a többi vizsgált vegyület. 65 8
