196239. lajstromszámú szabadalom • Eljárás streptomyceshez és rokon mikroorganizmusokhoz használható klónozó vektorok előállítására
1 196239 2 cin), S. mashuensis (sztreptomicin), S. hygroscopicus var. limoneus (vajidamicinek), S. rimofaciens (desztomiciuek), S. hygroscopicus forma glebosus (glebomicin), S. fradiae (hibrimicinek, neomicinek), S. eurocidicus (A16316—C antibiotikum), S. aquacanus (N-metil-higromicin B), S. crystallinus (higromicin A), S. noboritoensis (higromicin), S. hygroscopicus (higromicinek), S. atrofaciens (higromicin), S. kasugaspinus (kasugamicinek), S. kasugaensis (kasugamicinek), S. netropsis (LL— AM31 antibiotikum), S. lividus (lividomicinek), S. hofuensis (szeldomicin-komplex). S. canus (riboziiparomamin). Az alábbi restrikció-mentes, makrolid antibiotikumokat termelő Streptomyces törzsekkel különösen előnyösen használhatjuk fel a találmány szerinti vektorokat, és különösen előnyösen transzformálhatiuk seitieiVm- s rael.estís (M188 antibiotikum), S. platensis jphjenomicind, S, ro-. chei var. volubilis (T2636 antibiotikum), S. venezuelae (metimicinek), S. griseofuscus (bundlin). S. narbonensis (josamicin, narbomicin). S. fungicidicus (NA—181 antibiotikum), S. griseofadens (PA133A és B antibiotikumok), S. roseocitreus (albociklin), S. bruneogriseus (albociklin), S. roseo chromogenes (albociklin), S. cinerochromogenes (cineromicin B), S. albus (albomicetin), S. felleus (argomicin, pikromicin), S. rochei (lankacidin, borrelidin), S. violaceoniger (lankacidin), S. griseus (borrelidin), S. maizeus (ingreumicin), S. albus var. coijmyceticus (coleimicin), S. mycarofaciens , (acetil-ieukomicin espinomicin), S. hygroscopicus (turimicin, relomicin, maridomicin, tilozin, karbomicin), S. griselospiralis (relomicin), S. lavendulac (aldgamicín), S. rimosus (neutramicin), S. deltáé ; (dcltamicinek), S. fungicidicus var. espinomyceticus (espinomicinek), S. furdicidicus (midekumicin), S. ambofaciens (foromacidin D), S. eurocidicus (metimicin), S. griseolus (griseomicin), S. fravochromogenes (amaromicin, shincomicinck), S. fimbriatus (amaromicin), S. fasciculus (amaromicin), S. erythreus (eritromicinek), S. antibioticus (oleandomicin), S. olivochromogenes (oleandomicin), S. spinichromogcnes var. suragaocnsis (kujimicinek), S. kitasatoensis (leukomicin). S. narbonensis var. josamyceticus (leukomicin A3, josamicin), S. albogriseolus (mikonomicin), S. bikiniensis (chalcomicín), S. cirratus (cirramicin), S. djakaitensis (niddamicin), S. eurythcrmus (angolamicin), S. fradiae (tilozin, laktenocin, makróéin), S. goshikiensis (bandamicin), S. griscoflavus (acumicin), S. halstedii (karbomicin), S. tendae (karbomicin), S. macrosporeus (karbomicin), S. thermotolerans (karbomicin) és S. alblreticuli (karbomicin). A találmány szerinti vektorokat és transzformációs módszereket előnyösen használhatjuk fel az alábbi restrikció-mentes, (Makrám típusú antibiotikumokat termelő Streptomyces törzseknél: S. lipmanii (A16884, MM4550, MM 13902), S clavuligerus (A16886B, klavulánsav), S. iactaindurans (cefamicin C), S. griseus (cefamicin A és Bj, S. hygroscopicus (dezacetoxi-cefalosporin C), S. wadayamensis (WS—3442—D), S. chartreusis (SF 1623), S. heteromorphus és S. panayensis (C2081X), S. cinnamonensis, S. fimbriatus, S. halstedii, S. rochei és S. viridochromogenes (cefamicin A és B); S. cattleya (thienamicin); és S. olivaceus, S. flavovirens, S.flavus, S. fulvoviridis, S. argenteolus és S. sioyaensis (MM 4550 és MM 13902). A találmány szerinti vektorokat és transzformációs módszereket előnyösen használhatjuk fel továbbá az alábbi, restrikció-mentes, poliéter-típusú antibiotikumokat termelő Streptomyces törzsek esetén: S. albus (A204, A28695A és B, szalinomicin), S. hygroscopicus (A218, emericid, DE3936), A120A, A28695A és B, etheromicin, dianemicin), S. griseus (grisorixin), S. conglobatus (ionomicin), S. eurocidicus var. asterocidicus (laidlomicin), S. iasaliensis (lazalocid), S. ribosidificus (Ionomicin), S. cacaoi var. asoensis(lysocellin), S. cinnamonensis (monenzin), S. aureofaciens (narazin), S. gallinarius (RP 30504). S. longwoodensis (lizocellin), S. flaveolus (CP38936), S. mutabilis (S- 11743a) ésS. violaceorúger (nigericin). A találmány szerinti vektorokat és transzformációs módszert különösen előnyösen használhatjuk továbbá az alábbi, restrikció-mentes, gliikopeptid antibiotikumokat termelő Streptomyces törzsek esetén: S. orientalis és S. haranomachiensis (vankomicin); S. candidus (A—35512, avoparcin) és S. eburosporeus (LL—AM 374). A találmány szerinti vektorokat és transzformációs módszert különösen előnyösen használhatjuk az alábbi restrikció-mentes Streptomyces törzseknél: S. coelicolor, S. granuioruber, S. roseosporus, S. lividans, S. tenebrarius, S. acrimycins, S. glaucescens, S. parvilin, S. pristinaespiralis, S. violaceoruber, S. vinaceus, S. espinosus és S. azureus. A fenti, reprezentatív Streptomyces gazdasejteken kívül a .találmány szerinti vektorokat és transzformációt az alábbi restrikció-mentes fajoknál is előnyösen használhatjuk: Bacillus, Staphylococcus, a fentiekkel rokon Actinomyceták, köztük Streptosporangium, Actinoplanes, Nocardia és Micromonospora esetén. így a találmány szerinti vektorok széleskörűen használhatók, és különböző mikroorganizmusok sejtjeibe transzformálhatok. A találmány szerinti eljárás összes kivitelezési változata használható, egyes rekombináns dezoxiribonukleinsav klónozo vektorok és transzformánsok azonban előnyösebbek a többinél. Előnyös vektorok a következők: pEL103, pEL105, pEL109, pELl 13, pEL104, pELlll, pEL117, pELI21, pFJ 124, pFJ144, pFJ146, pFJ147, pFJ 151. pFJ 153, pFJ155, és pFJ160. Előnyös transzformánsok a Streptomyces ambofaciens/ pELl03, S. ambofaciens/pEL105, S. ambofaciens/ pEI.109 S. embifaciens/pELl 13, S. ambofaciens/ pEL104, S. ambofaciens/pELlll, S. ambofaciens/ pELl 17, E. coli K12 HBi01/pELi21, S. ambofaciens/pFJ124, S. ambofaciens/pFJ144, S. ambofaciens/pFJ146, S. ambofaciens/pFJ147, E. coli K12 HB10I/pFJ 150, E. coli K12 HB101/pFJ153, E. coli K12 HB.101/pFJI55 és E. coli K12 HB101/ pFJióO. A fentieken beiül alegelőnyösebb a pELH)3 pEL105, pEL113, pEL109, pFJ124, pFJ 144 és pFJ 147 plazmid, és az S ambofaciens/ pEL!05, S. ambofaciens/pEL103, S. ambofaciens pELi 13, S. ambofacines/pEL109, S. ambofaciens/ pFJ 124, S. ambofaciens/pFJ144 és az S. ambofacicns/pFJ 147 transzformáns. A találmány szerinti rekombináns dezoxiribonukleinsav klónozó vektorokat és transzformánso-5 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
